Салон h1: цена, характеристики, фото, купить, комплектации
Автомобильные коврики в салон и багажник для Hyundai Starex h2
В нашем магазине вы можете заказать автомобильные коврики в салон и багажник Хендай Старекс Ш1 из текстиля, резины, велюра и полиуретана. Все изделия уже есть на нашем складе. Их доставка будет осуществлена уже на следующий день после оформления вами заказа. Купите автомобильные коврики в… читать подробнее
В нашем магазине вы можете заказать автомобильные коврики в салон и багажник Хендай Старекс Ш1 из текстиля, резины, велюра и полиуретана. Все изделия уже есть на нашем складе. Их доставка будет осуществлена уже на следующий день после оформления вами заказа.
Купите автомобильные коврики в салон и багажник Hyundai Starex h2 на лучших условиях в Москве:
- по оптовым ценам,
- с оперативной транспортировкой,
- получив развернутую бесплатную консультацию.
Телефоны для справок: +7 (495) 215-02-45, +8 (800) 555-02-76.
страница: 1 из 1 Сортировка:- По умолчанию
- От дешевых к дорогим
- От дорогих к дешевым
Материал
Полиуретан
Перемычка между задними ковриками
Нет
Материал
Полиуретан
Тип крепежа
Фиксаторы
Перемычка между задними коврикамиЕсть
Материал
Полиуретан
Тип крепежа
Фиксаторы
Перемычка между задними ковриками
Есть
Материал
Полиуретан
Полиуретан
Перемычка между задними ковриками
Есть
Материал
Полиуретан
Материал
Резина
МатериалПолиуретан
Страна производства
Россия
Перемычка между задними ковриками
Есть (между передними)
Материал
Полиуретан
Крепление
Нет в комплекте
Кузов
минивэн
Прочее
передний ряд
Габариты в упаковке
606х788х30 мм
Материал
Полиуретан
Перемычка между задними ковриками
Нет
Материал
Полиуретан
Страна производстваРоссия
Материал
Полиуретан
Кузов
минивэн
Крепление
Нет в комплекте
Особенности авто
2 и 3 ряд
Упаковка
Полиэтиленовый пакет
Место установки
Салон
Прочее
Сплошные ряды — 2 и 3 ряды
Габариты в упаковке
1042х1576х30 мм
Страна производства
Россия
Материал
Полиуретан
Кузов
минивэн
Место установки
багажник
Крепление
Нет в комплекте
Габариты в упаковке
811х1412х30 мм
МатериалПолиуретан
Тест-драйв обновленного Hyundai h2: что изменилось
Hyundai h2 давно снискал популярность среди наших автомобилистов.
Тем интереснее встретиться с его обновленной версией. На сегодня это уже третье поколение модели, хотя, конечно, по большому счету, это все тот же h2, который выпускается с 2007 года.Олег Калаушин
Hyundai h2. Цена: От 2 229 000 р. В продаже: с 2018 г.
В свое время те, кому был нужен практичный, вместительный, а главное за разумные деньги автомобиль, обращали внимание именно на Hyundai Н1. Популярность он заслужил как среди корпоративных клиентов, где вместительность автомобиля ценят больше всего, так и среди автолюбителей, которые привыкли стоя входить, стоя выходить из машины.
Понятно, что первое, на что обращаешь внимание при знакомстве с новинкой, — это обновленная передняя часть. Новые горизонтальные проекционные фары вместо вертикальных рефлекторных, новые противотуманки, иная, большего размера решетка радиатора — все это притягивает взор. Эти элементы, конечно же, осовременили машину, но в остальном h2 фактически остался прежним.
Обойдя далее машину по кругу, вы вряд ли найдете что-то еще, чего вам не доводилось видеть ранее. Даже отштамповки на кузове в районе колесных арок прежние.
Сзади автомобиль и вовсе не отличить от предыдущей модели. Кстати, если машина будет в максимальной комплектации, то на задней двери появится камера заднего вида, картинка с которой отображается в окошке салонного зеркала.
Панель приборов у автомобилей, поставляемых на внутренний и американский рынок, совсем иная, нежели у тех, которые идут к нам. Наш вариант — все тот же, знакомый по предыдущему Hyundai Н1.
Небольшие отличия есть только в блоке управления аудиосистемой и системой вентиляции и отопления. Эти блоки визуально разделили, что пошло только на пользу. Немного изменили и центральные воздуховоды.
Как и прежде, Н1, поставляемый на наш рынок, имеет 8‑местный салон. В максимальной комплектации сиденья отделаны тканью и кожей, в нашем случае это исключительно ткань. Все без исключения сиденья в автомобиле имеют регулировку наклона спинки. Это обеспечивает должный уровень комфорта при длительной поездке. Жаль, что угол наклона не позволяет превратить второй и третий ряд в ровное спальное место.
Средний ряд имеет несколько продольных положений. Это дает возможность увеличить место для ног сидящих на третьем ряду и обусловливает практически беспрепятственный доступ туда.
Пассажиры второго и третьего ряда могут самостоятельно контролировать систему вентиляции и отопления за счет ручек управления на потолке. У водителя также есть возможность вмешиваться в этот процесс.
Увеличить объем багажника можно лишь за счет наклона спинок сидений третьего ряда. Продольной регулировки задний диван не имеет, что существенно снижает возможность трансформации салона.
Технические характеристики Hyundai h2 | |
Габариты | 5150x1920x1925 мм |
Двигатель | дизельный, 4‑цилиндровый, 24953, 170/3600 л.с./мин-1, 441/2000–2250 Нм/мин-1 |
Трансмиссия | автоматическая, 5‑ступенчатая, привод задний |
Динамика | 180 км/ч; 14,4 с до 100 км/ч |
Расход топлива | 8,8 л на 100 км в смешанном цикле |
Конкуренты | Citroen Space Tourer, Mercedes-Benz V-Class, Volkswagen Multivan |
- Просторный и вместительный салон, тяговитый двигатель, адекватная цена.
- Незначительные изменения в интерьере.
Автомобиль предоставлен автосалоном «Hyundai Максимум».
Редакция рекомендует:
Хочу получать самые интересные статьи
Mercedes-Benz V-class. Отличник в классе
У последних «Мерседесов» очередная эпоха возрождения — один краше другого. Новый V-класс, который уже год бороздит просторы нашей необъятной, не исключение.
До чего же хорош! Только до сих пор было непонятно, чего же в нем больше — духа путешествий или коммерческой жилки?Иван Соколов
MB V-класс V 220 CDI. Цена: 3 413 000 р. В продаже: с 2014 г.
Приборная панель читается превосходно
Выпускаясь параллельно с коммерческим Vito, этот автомобиль должен был стать (а возможно, уже стал) отдушиной для семьянинов и путешественников. Начало было положено микроавтобусами прошлого поколения Viano, которые под занавес своего производства в 45 % случаев попадали в частные руки. Такое внимание к немецкому микроавтобусу, или, если хотите, минивэну, вполне обосновано. По крайней мере, в России. Во-первых, «Мерседесы» у нас любят не меньше, чем в Германии, — с этим не поспоришь. Во-вторых, размеры: с учетом предрасположенности соотечественников к постоянным перевозкам несметного количества скарба на дачу или на отдых, а затем обратно, объем салона здесь играет далеко не последнюю роль. Ну а в-третьих, как ни странно, — отсутствие конкуренции. Класс крупных, комфортных и, что очень важно, дизельных минивэнов в России, считай, отсутствует. Главные оппоненты — «Мультивэн» да «Тойота Альфард». Первый — слишком коммерческий и официальный, что проявляется в дизайне как экстерьера, так и салона, а второй — чересчур затратный, ибо продается лишь с 275-сильным пожирателем бензина. Если же учесть, что V-класс сам по себе микроавтобус, красивый до невозможного, то все сомнения в его предназначении должны, вроде бы, отпасть сами собой.
Никто из конкурентов еще не удостаивался столь изысканного интерьера
Чтобы узнать, насколько хорош V-класс в роли тревел-кара, я решил отправиться в мини-путешествие в Тульскую область: из Москвы в Ефремовский район и обратно. Сам маршрут составил без малого 1000 километров, которые полностью удовлетворили мое любопытство по поводу сущности V-класса.
Практически с первых километров стало понятно, что в городском потоке «Мерседес» — что рыба в воде: шустрый автомат, крайне скромный и совсем не автобусный радиус поворота, легкий руль и отличная обзорность, которую омрачают разве что широковатые передние стойки кузова, хотя отчасти это компенсируют отличные зеркала и удачная камера заднего вида. От грязи, пыли и слякоти она «прячется» в задней двери и может похвастать качественной контрастной картинкой — даже ночью в тесном переулке можно парковаться с миллиметровой точностью.
Удобные в городе кресла в дальних поездках утомляют
Описывая V-класс, нельзя пройти мимо шикарного салона: лаконичный и стильный интерьер никого не оставит равнодушным. Впрочем, кто имел опыт езды, к примеру, на последнем C-классе, удивлен не будет: дизайн и решения передней панели идентичны: те же «авиационные» дефлекторы обдува, те же монолитные изгибы консоли, те же кнопки и «гибридное» управление медиасистемой. О последней было уже немало сказано, отмечу лишь, что управление шайбой аналогично «бээмвэшной» системе I-Drive, а вот к сенсорной мышке, возможно, придется привыкнуть, благо что пользоваться можно тем, что удобнее. Неподготовленным будет в новинку рычаг переключения АКП, который находится на месте рычажка «дворников». Я был сильно удивлен, что такое решение оказалось для меня даже удобнее классической схемы — и экономия места на центральной консоли, и руки с руля можно практически не убирать. Но есть один эргономический казус, к которому не удалось привыкнуть даже спустя 1000 км. Речь о кнопке стояночного тормоза, которая работает по обратной схеме: на себя — снял с ручника, от себя — поставил. К чему такие нововведения?
А вот посадка в «вэ-классе» по-прежнему имеет «автобусные» гены: сидишь вертикально, высоко и с согнутыми в коленях ногами. В городе это в самый раз, тем более что кресла сами по себе довольно мягкие и удобные. Но на трассе хочется принять более расслабленную позу, чуть откинувшись назад (из-за лучшего распределения веса так устаешь гораздо меньше). Но не получается — руль ближе не подвинешь, да еще и подушка сиденья коротковата. В итоге после пары часов езды ноги затекают. Ехать на дальняк будет немного затруднительно еще и из-за недостатка емкостей и полочек для мелочей, особенно для пилота. Есть здесь, конечно, пара подстаканников и маленький отсек, но находятся они на самом полу. Приходится далеко тянуться, в итоге ни телефон не положить, ни стакан с кофе не поставить. Я понимаю, что такие вещи нужно делать на стоянке, но попробуйте это сказать, скажем, американцам… Также некоторые разногласия у меня произошли с медиасистемой. Выбрать, например, определенный канал, если тот плохо ловит, простым перебором частот нельзя — нужно по цифрам вбивать его в меню! Не очень удобно, если приходится пересекать много областей за день.
Зато пассажирам грех жаловаться: пять человек, сидящие за водителем, разместятся здесь с особым комфортом. Для них предусмотрен отдельный климат-контроль, выдвигающийся столик, а сами кресла имеют регулируемые спинки, и их можно перемещать на любое расстояние. Можно их даже поставить друг напротив друга (правда для этого нужно вытаскивать тяжеленные кресла из полозьев, переворачивать и ставить обратно). Забираться в салон одно удовольствие, особенно в «наш» V-класс: в данную комплектацию включены доводчики обеих сдвижных дверей. Приятно, что способов их открытия несколько — надо либо чуть дернуть ручку (с любой стороны), либо нажать кнопку на средней стойке. Процессом может руководить и пилот корабля — соответствующие кнопки есть на центральной консоли. Отсюда же, как и с брелока, можно отворить пятую дверь, скрывающую объемный багажник (1030 л). Там прячется еще один бонус: легкие и не очень вещи можно закинуть на заднюю полку, открыв только стекло. Полка — также с секретом. Она откидывается как целиком, так и частично, чтобы там разместить два складных ящичка. Удобно! Жаль, соорудить спальные места в салоне быстро не получится: придется либо выкидывать сиденья, либо класть какой-либо жесткий настил на сложенные спинки кресел (все они складываются вперед).
Задние сиденья регулируемые, а их спинки можно сложить
220-й шильдик, что красуется на задней двери, означает, что перед нами 163-сильная турбодизельная версия с мотором 2,1 л. Хотя две другие модификации оснащаются тем же двигателем, но с разной степенью форсировки: 200-й развивает 136 л. с., 250-й — 190. Тестируемая версия для России оптимальная: V200, пожалуй, слабоват, а V250 — соответствует более строгим нормам Евро-6 и требует дозаправки мочевиной. Турбодизель с 7-ступенчатым автоматом — идеальная слаженная пара: 220-й отзывчив, динамичен и не расточителен. Разгон до сотни занимает всего 10,8 секунды, а средний расход за весь пробег (учитывая и городскую, и загородную езду) так и застыл на отметке 7,9 л. Примечательно, что этот расход сохраняется и при скоростях выше сотни. При этом «Мерседес» остается «Мерседесом» — непоколебимым и прямолинейным. Курсовая устойчивость выше всяких похвал — ни колейность, ни заплатки, ни стыки не могут сбить «немца» с курса. Жаль, рулевое здесь, хоть и довольно острое, но пустоватое — хотелось бы большей обратной связи. То же касается и тормозов: мне они показались недостаточно чуткими: чтобы осадить минивэн с большой скорости, приходится сильно вдавливать педаль в пол. Еще одной загадкой осталась ходовая: вся мелочь «съедается» превосходно, но более серьезные и глубокие дефекты покрытия отдаются на кузов сильными ударами. Отчасти виноваты слишком низкопрофильные опциональные шины размерностью 245/45R18, но в любом случае эноргоемкость подвески тревел-кара неплохо бы повысить. Так что с магистрали при возможности лучше не сворачивать.
Доступ к задней полке возможен через открывающееся заднее стекло
- Отличные маневренность и динамика, превосходный дизайн, хороший головной свет, комфортный и качественный салон, удобный доступ в багажник с неплохой трансформацией
- Низкая энергоемкость подвески, неудачная эргономика водительского места, недостаток обратной связи на руле
Технические характеристики | |
Габариты | 5140х1928х1880 мм |
База | 3200 мм |
Снаряженная масса | 2075 кг |
Полная масса | 2800 кг |
Клиренс | н. д. |
Объем багажника | 1030/4630 л |
Объем топливного бака | 57 л |
Двигатель | дизельный, рядный, 4-цилиндровый, 2158 см3, 163/3800 л.с./мин-1, 380/1400–2400 Нм/мин-1 |
Трансмиссия | автомат., привод задний |
Размер шин | 245/45R18 |
Динамика | 195 км/ч; 10,8 с до 100 км/ч |
Расход топлива | 5,7 л на 100 км в смешанном цикле |
Вердикт
Идеальная среда обитания V-класса — мегаполис и ближний загород. Не противопоказаны «Мерседесу» и дальние путешествия, но асфальт в этом случае должен быть по-немецки ровным: не жалует минивэн плохие дороги. В целом автомобиль получился разносторонним — и семью на отдых отвезти, и бизнес-партнеров в аэропорту встретить. А за красоту — так и вовсе все простишь.
Компания Audi готовит к парижской осенней премьере новую версию автомобиля R8. Название очередной разработки – Spyder, и принципиально отличной от своей базовой модели будет ее не двигатель, но внешность. Так, Audi R8 Spyder оснащена складывающейся крышей, измененными бамперами, расположенными за водительским и пассажирскими креслами дугами безопасности, – сообщает Mail. Ru.
Мотор же создатели новинки оставили без изменений. Это будет все тот же 4,2-литровый и 420-сильный V8. Суперкар готов к показу, даже тесты в Нюрбургринге прошел. Но продавать Audi открытый вариант R8 не торопится. Предполагается, что первый серийный автомобиль сойдет с промышленных линий производителя лишь в середине 2009-го.
Редакция рекомендует:
Хочу получать самые интересные статьи
Barh2 и Barh3
В периферической нервной системе экспрессия Barh2/Barh3 наиболее высока у предшественников химически чувствительных колокольчатых сенсилл и почти отсутствует у предшественников механически чувствительных трихордовых сенсилл. Делеция Barh2/Barh3 в ПНС приводит к гомеозисным изменениям в этих органах с последующим превращением кампаниформных сенсилл в трихордовые сенсиллы. Сверхэкспрессия дает обратный результат, т. е. превращение химических сенсилл в механические.Самая сильная экспрессия Barh2/Bar h3 наблюдается в текогенных клетках, глиальных опорных клетках для внешних сенсорных нейронов. Участвуют ли эти клетки в изменении судьбы? Текущее понимание не является полным. Были созданы нокаутные мутации Barh3 . Такие мухи вполне жизнеспособны. Двойная мутация в обоих локусах необходима, чтобы повлиять на описанную выше трансформацию органов чувств (Higashijima, 1992b).
Регуляция экспрессии, вероятно, будет сложной.Поскольку cut жизненно важен для развития периферической нервной системы, возникает вопрос: находятся ли гены Bar ниже по течению от cut во внешних органах чувств? Они не находятся под контролем cut в головном мозге или глазах, так как cut там не экспрессируется. Более полное понимание базовой экспрессии Barh2/Barh3 позволит понять процесс, который определяет альтернативные судьбы в нейронах.
Гены гомеобокса Bar также функционируют как гены широтного препаттерна в развивающихся Дрозофила notum.У Drosophila notum экспрессия achete-scute было показано, что пронейральные гены и образование щетинок регулируются предполагаемыми генами препаттерна, экспрессируемыми продольно. Два гена локуса Bar могут принадлежать разным класс генов препаттернов, экспрессируемых широтно: это предположил, что развивающийся нотум состоит из субдоманов, расположенных в виде шахматной доски. квадраты, каждый субдомен управляется различной комбинацией генов препаттерна. Barh2 и Barh3 коэкспрессируются в самой передней нотальной области и регулируют образование микрохет в области Выражение Barh2/Barh3 через активацию ахете-щитка . Для образования предшовных макрохет также требуется Bar активность генов. Экспрессия гена Bar ограничена в спинной и задней областях декапентаплегией. передачи сигналов, в то время как вентральная граница домена экспрессии из Bar генов определяется бескрылыми , чьи экспрессия находится под контролем передачи сигналов декапентаплегии (M.Сато, 1999).
Drosophila notum считается генетически разделенной на несколько продольных, бок о бок, доменов, границы которых определяются экспрессией pannier, бескрылых и ирокезов (перечислены соответственно от медиального к латеральному). Для дальнейшего уточнить относительное расположение областей экспрессии pnr, wg и iro , личинку третьего возраста и будущую нотум куколки окрашивали различные комбинации молекулярных маркеров. У личинок и куколка будущего Notum, pnr-Gal4 выражен медиально и iro-lacZ сбоку. pnr-Gal4 и iro-lacZ домены частично перекрывают друг друга, и экспрессия wg-lacZ (или Wg) отмечено в районе pnr-iro , перекрывающемся и его непосредственном соседи. Гены барного гомеобокса могут принадлежать к дополнительному классу нотальных гены подразделения. Окрашивание для Barh2 указывает на то, что Barh2 экспрессируется по широте (передняя часть по сравнению с задней).posterior) в самом переднем отделе будущей спинки и спинки. Экспрессия Barh2 начинается в начале-середине третьего возраста. Окрашивание анти-Ас антителами и экспрессия neur-lacZ указывает на то, что макрохеты PS расположены вблизи задне-вентральные углы передней экспрессии Barh2 домен. Barh2 и Barh3 вместе обозначаются как Bar , а передняя часть прескутум или его предшественник, содержащий Bar , обозначается как Bar прескутум. Домен экспрессии Bar перекрывает домен pnr, wg и iro . У дисков жужжальца наблюдается выраженность перемычек, сходная с таковой в крыловых дисках (M. Sato, 1999).
Для разъяснения возможной роли Bar в нотном развитии, Был проведен FLP/FRT-опосредованный мозаичный анализ. В мутантных клонах образуется мало микрохет. в прескутуме. Образование макрохет PS происходит только при наличии мест образования макрохет ПС. не включены в число клонов mjtant.У мух гемизиготные или гомозиготные при дефиците в хромосомной области Bar , экспрессии Barh2 в медиальной Bar prescutum полностью отсутствует, подразумевая, что этот конкретный недостаток раскрывает энхансер Bar . специфический для медиального Bar prescutum. В этих недостатках летает, микрохеты теряются медиально в передние три четверти прескутума. PS макрохеты утрачены 60% времени.Потеря Барх2 выражение и отсутствие микрохет фенотип в медиальном Bar prescutum выявляются и в другом недостатке, раскрывающем только Barh3 и его 3-футовый усилитель Bar последовательности. В этих дефицитных линиях макрохеты PS отсутствуют. формирование. Вместе взятые, эти результаты предполагают, что Bar гены необходимы для образование щетинок в прескутуме Bar .Должны ли быть Bar генов гомеобокса? дублирующие функции и участвующие в формировании щетинок в Bar prescutum, дефекты щетины наверняка будут устранены Bar целевое выражение. Эти соображения подтвердились с помощью системы GAL4/UAS. Потеря микрохет, но не макрохет PS практически восстанавливается целевым выражением Бар гены. Barh2 и Barh3 будут кажутся функционально избыточными друг другу и существенными для образования микрохет в медиальном предкрылке Bar и Образование макрохет PS.При поиске усилителей Bar были обнаружены два усилителя notum. были идентифицированы. S8 признан ответственным за Бар выражение в медиальном Bar prescutum. Второй энхансер, B4.5, способен управлять экспрессией репортерного гена ( lacZ ) в латеральный Bar prescutum на фоне дикого типа (M. Sato, 1999).
Для оценки способности Bar индуцировать микрохеты hs-Barh2 или hs-Barh3 трансгенов были индуцированы нагреванием во время личиночного или куколочного развитие и одинаковые результаты были получены для каждого.Эктопические микрохеты формируются в щитке, крыле лопасти и головная капсула. в щитик (в норме без микрохет) 30- 50 эктопических микрохет генерируются тепловой шок через 6 часов АПФ (после образования пупария), но несколько эктопические микрохеты образуются при тепловом шоке до 2 часов АПФ или через 12 часов АПФ. В отличие от внематочной образование микрохет при нейрогенных мутациях, дополнительные микрохеты, индуцированные hs- Bar are несгруппированные, что позволяет предположить, что Bar действует как активатор пронейральных генов.Окрашивание на Ac показывает, что экспрессия Ac, специфичная для куколки notum начинается в характерных областях в 6 часов APF, достигая пика в 8 часов. часов АПФ и окончательно исчезает в 12 часов АПФ. Эти Ac-положительные области, по-видимому, соответствуют микрохеты пронейральные области, так как микрохеты SOP формирование начинается в 8 часов АПФ. СОП макрохет формируются в третьем возрасте. В прескутуме Bar видна область экспрессии Ac. чтобы перекрыть Bar .Выражение Sc очень похоже, если не идентичны, выражению Ac. Таким образом, было проведено исследование, чтобы выяснить, способен ли Bar действовать в качестве активатора ac-sc для контроля образования микрохет. Ас экспрессия почти полностью отсутствует из-за дефицита энхансера Bar медиальный Bar prescutum, где нет происходит образование микрохет. Следующий индукция hs- Bar , не только образование эктопических микрохет, но и сильная экспрессия Ac (и Sc) очевидна в щиток. hs- Бар зависимый образование микрохет значительно подавлено в ac-sc гипоморфные мутантные фоны, в то время как дефекты щетинок, в том числе потеря PS макрохет в Bar, усиливают дефицит элиминируются аллелем приобретения функции ac-sc . Таким образом, брусок можно рассматривать как активатор ac-sc . необходим для образования пронейральных скоплений микрохет и, возможно, PS macrochaetae (M.Сато, 1999).
Во время позднего третьего возраста домен экспрессии Bar в prescutum непосредственно примыкает к экспрессии dpp и wg домены. dpp , вероятно, регулирует экспрессию Bar отрицательно. Когда dpp выражается по всему нотуму с использованием UAS- dpp , управляемого ap-Gal4 , выражение Bar полностью отменен.И наоборот, снижение активности dpp эктопически индуцирует экспрессию Bar в медиальной области будущий нотум. Аналогичное среднее расширение Bar экспрессия наблюдается после снижения активности еж (hh) , индуктор dpp . Возможные эффекты wg на экспрессию Bar изучались с использованием wg ts , у которых секреция, но не продукция Wg чувствительна к температуре. Бар Выражение сбоку Bar prescutum отменяется через 48 часов (но не через 24 часа) инкубация при рестриктивной температуре. броненосец (рука) , гомолог бета-катенина, является преобразователем сигнала. сигнализации Wg. бар выражение потерянный в клонах мутант по плечу при генерации в латеральном баре prescutum, в то время как Bar неправильное выражение присутствует в латеральные клоны прескутума, экспрессирующие конститутивно активную форму рычаг .Таким образом, делается вывод, что экспрессия Bar в латеральном прескутуме требует сигналов Wg, уровни которых определяют вентральная граница прескутума Bar . В конце третьего возраста домен экспрессии Bar в prescutum перекрывается с таковыми pnr и iro . Поскольку никаких заметных изменений в экспрессии Bar не обнаружено в Мухи, мутантные по iro или pnr , экспрессия Bar могут регулироваться независимо пнр и иро . Bar может быть частично вовлечен в репрессию wg (M. Sato, 1999).
Делается вывод, что шахматное деление будущего нотума регулируется предполагаемая экспрессия гена препаттерна. Будущий нотум может быть разделен на квадратные подобласти в в шахматном порядке, каждый со своим уникальным комбинации экспрессии генов препаттерна. Предполагаемые гены препаттерна, iro и pnr, образуют продольные домены. Бар Гены гомеобокса образуют самый передний домен. Это первая демонстрация наличия широтного, спереди назад, препаттерна гены в нотуме. Образование щетинок в каждом субдомене может позитивно регулироваться специфичной для региона комбинацией гены препаттерна. В соответствии с этим образование микрохет в переднебоковых prescutum (латеральный Bar prescutum), где Bar и iro являются коэкспрессируется, требует согласованного действия Bar и иро (М.Сато, 1999).
Atonal (Ato)/Math (атональный гомолог млекопитающих) являются ключевыми регуляторами нейрогенеза как у позвоночных, так и у беспозвоночных. В глазу дрозофилы Ато необходим для образования фоторецепторных нейронов.Экспрессия Ato инициируется в переднем гребне морфогенетической борозды, но репрессируется в клетках-предшественниках сетчатки позади борозды, чтобы предотвратить эктопический нейрогенез. Репрессия Ato опосредуется консервативными гомеобоксными белками Barh2 и Barh3. Потеря Bar вызывает клеточно-автономную эктопическую экспрессию Ato, что приводит к избыточным кластерам фоторецепторов. Начальное омматидиальное расстояние в борозде происходит в норме в отсутствие Bar , указывая на то, что эктопический нейрогенез в мутантных клонах Bar не связан с отсутствием Notch (N)-зависимого латерального ингибирования. Целенаправленного неправильного выражения Bar достаточно, чтобы подавить выражение до . Кроме того, предоставлены доказательства того, что Bar репрессирует экспрессию — на уровне транскрипции, не влияя на экспрессию активатора —, Cubitus interruptus (Ci). Т.о., предполагается, что Bar необходим для репрессии транскрипции от до и предотвращения эктопического нейрогенеза позади борозды (Lim, 2003).
Каждый омматидий сложного глаза взрослого человека состоит из восьми фоторецепторов, которые генерируются пронейральной функцией Ато, экспрессируемой внутри и впереди борозды на глазном диске.Домен экспрессии Ato примыкает к Bar-экспрессирующим недифференцированным клеткам позади борозды. Хотя Bar также экспрессируется в фоторецепторах R1 и R6, это исследование фокусируется конкретно на экспрессии Bar в недифференцированных клетках и экспрессии Ato в соседних передних клетках. Эти Bar-экспрессирующие недифференцированные клетки будут называться «базальными клетками», поскольку их ядра остаются в базальной области, в то время как ядра фоторецепторных клеток мигрируют апикально, хотя клеточные тела обоих типов связаны с верхним и нижним эпителием глазного диска. Ядра Ato-экспрессирующих клеток располагаются базально на стадиях 1 и 2, но мигрируют апикально, когда они становятся нейронами-основателями R8 позади борозды (Lim, 2003).
Таким образом, экспрессия Ato сильно повышается при отсутствии Bar за бороздой, указывая на то, что Bar необходим для подавления экспрессии Ato. Более того, Bar репрессирует экспрессию — на уровне транскрипции посредством как 3′-, так и 5′-регуляторные области от до .9,3 КБ Последовательность от до 5′ ( 5 ‘ F:9.3 ) была показано, что он отвечает за экспрессию от до в группах эквивалентности и клетки-основатели R8 Ато-зависимым образом (стадии 2-4). Ска и Egfr-опосредованная передача сигналов МАР-киназы может ингибировать эту энхансерную функцию 5′-регуляторный элемент от до в интеромматидиальных областях до установить регулярно расположенные промежуточные группы. От контраст, 5.8 кб энхансера to 3′ ( 3 ‘ F:5. 8 ) активируется только перед бороздой для прогнать начальную полосу от до выражения (этап 1). Как это энхансерная активность ингибируется позади Ато-домена глаза на стадии 1. диск неизвестен. Теперь результаты показывают, что начальная полоса (стадия 1) Экспрессия от до , управляемая 3′-регуляторным элементом, сильно ингибируется Баром за бороздой (Lim, 2003).
Эктопически повышенная экспрессия Ато в пределах Bar Потеря функции клонов достаточно, чтобы вызвать образование зрелых эктопических фоторецепторов кластеры. Это указывает на то, что мутации Bar специфически устраняют репрессию начальной экспрессии в с небольшим влиянием на последующие этапы рекрутирования фоторецепторов. Это согласуется с наблюдениями, что Sca, Передача сигналов Egfr и N-опосредованное латеральное торможение функционируют должным образом в Бар клонов с потерей функции.Следовательно, главная роль Bar во время нейрогенеза сетчатки, по-видимому, заключается в ингибировании экспрессии начальной полосы — через 3′-регуляторные элементы — позади борозды (Lim, 2003).
Bar представляет собой ДНК-связывающий гомеодоменовый фактор транскрипции. Гомолог млекопитающих Было показано, что Barx2 напрямую связывается с регуляторными элементами нескольких нервных клеток. молекулы адгезии, которые содержат сайты-мишени, включая основную последовательность CCATTAGPyGA.Интересно, что нормативные требования 5’F9.3 и 3’F5.8 области от до также имеют несколько потенциальных сайтов связывания Bar. содержащие ту же основную последовательность, предполагая, что Бар может напрямую связываются с этими сайтами-мишенями от до регуляторных элементов и репрессировать транскрипцию с по (Lim, 2003).
Важно отметить, что Ci FL , индуцированный передачей сигналов Hh, может активировать выражение от до . Более того, Bar и Ci FL дополняют друг друга.Эти наблюдения повышают вероятность того, что репрессии Бара с по год могли быть опосредованы Бар репрессии Ci FL . Однако результаты показывают, что Бар функция не зависит от Ci FL , поддерживая идею о том, что первопричиной до репрессий за бороздой является прямая функцию Bar как репрессора, а не косвенные эффекты удаления активатор, Ci FL . Кроме того, сверхэкспрессия Ci FL драйвером lz-Gal4 при наличии Бара не активируется экспрессия to , что указывает на то, что Bar-опосредованная репрессия to является эпистатической по отношению к сверхэкспрессии активатора Ci FL (Lim, 2003).
На основании полученных данных создана модель функции Bar в сетчатке. предполагается нейрогенез. Ато экспрессируется внутри борозды и необходим для образования нейронов-основателей R8. Гомеодоменовые белки Bar экспрессируются в базальные клетки позади борозды и подавляет экспрессию —, демонстрируя комплементарный паттерн экспрессии для Ato. Эта функция Бара на — — подавление происходит независимо от Ci FL , a активатор транскрипции —. Скорее, Бар может напрямую подавлять транскрипция от до путем связывания с 3′- и 5′-регуляторными области от до через его потенциальные сайты связывания (Lim, 2003).
Открытие того, что Bar ингибирует экспрессию пронейрального гена – в качестве репрессора транскрипции в глазном диске. вопрос о том, может ли Bar также подавлять экспрессию других пронейральных генов в глаза или другие ткани.Неправильное выражение Barh2 или Barh3 использование драйвера dpp-Gal4 показывает повышенную экспрессию пронейрального гена щиток в проушинах и дисках крыльев вместо того, чтобы подавлять его выражение, производя больше сенсорных щетинок. От Напротив, дефицит Bar вызывает потерю сенсорных интеромматидиальные щетинки в глазу. Эти результаты показывают, что Bar может действовать как активатор экспрессии ASC пронейральных генов для образования щетинкообразных сенсорных нейронов.Следовательно, Bar может действовать как активатор транскрипции, а также как репрессор для различных пронейральные гены в зависимости от контекста развития у дрозофилы . Эта двойная функция Bar также наблюдалась у Barx2 млекопитающих. Баркс2 имеет активаторный и репрессорный домены в С- или N-концевых областях, соответственно. Mbh2 , еще один гомолог Bar у млекопитающих. классовые гены, функционирующие либо как активаторы, либо как репрессоры экспрессии нейральные гены bHLH в системе культивирования клеток.Следовательно, двойная функция транскрипционной активации и репрессии может быть общим свойством гомеодоменовых белков семейства Bar в контроле экспрессии нейральных генов-мишеней. Эти противоположные действия Bar могут зависеть от связывания их специфических партнеров с доменом активатора или репрессора (Lim, 2003).
Было показано, что потеря groucho ( gro ) приводит к увеличению экспрессии до за бороздой глазного диска.Gro репрессирует экспрессию пронейральных генов во время N-опосредованного латерального ингибирования. Интересно отметить, что гомеодоменовые белки семейства Bar имеют консервативный мотив ~10 аминокислот, называемый доменом FIL, в N-концевой области гомеобокса. Этот домен демонстрирует сходство последовательности с центральной областью домена engrailed homology-1 (eh2) в репрессоре Engrailed (En), который может напрямую взаимодействовать с ко-репрессором Gro посредством своего мотива eh2. Следовательно, Bar может взаимодействовать с Gro через свой домен FIL для выполнения его репрессорной функции (Lim, 2003).
Гомеодоменные белки класса Bar эволюционно высоко консервативны от Дрозофила человеку. Гомологи Bar позвоночных включают и мышиный и человеческий гены Barx1 и Barx2 . Несмотря на то что in vivo функция гомологов Bar подробно не анализировалась, некоторые члены гомеобоксных генов класса Bar могут быть вовлечены в генезис и спецификация судеб нейронных клеток.Гомолог млекопитающих, Mbh2 , выражается в комплементарном образце к Mash2 , a гомолог ASC в крысином глазу. Следовательно, Mbh2 может участвовать в ингибировании экспрессии Mash2 , аналогично репрессия to белками Bar дрозофилы (Lim, 2003).
В развитии глаз позвоночных, гомолог ато млекопитающих, Math5 (и/или Xath5 ), имеет решающее значение для образования ганглия сетчатки. клетки, которые возникают первыми нейронами и, следовательно, могут быть аналогичны клетки-основатели R8 в глазу дрозофилы.То Существенная роль Math5 в генезе ганглиозных клеток предполагает, что Math5 играет атоподобную пронейральную функцию в развитии глаз позвоночных. Это будет интересно посмотреть, могут ли конкретные гомологи Bar участвовать в подавление Math5 , так как Drosophila Bar ингибирует выражение от до . Кроме того, привлекательны гены класса Bar . кандидатов на многие генетические заболевания человека, включая синдром Жубера и Синдром Ригера.Новая функция Drosophila Bar в негативе регуляция нейрогенеза может дать представление о функции Гены семейства Bar у позвоночных и молекулярная основа человека заболевания, связанные с измененной функцией Bar (Lim, 2003).
Гены Barh2/h3 кодируют два родственных фактора транскрипции гомеобокса (B-h2 и B-h3), которые, как ранее было показано, играют важную роль в формировании и спецификации дистальных сегментов ног и в нейрогенезе сетчатки.Это исследование описывает ограниченный паттерн экспрессии гомеопротеина B-h2/-h3 в эмбриональном вентральном нервном шнуре Drosophila. B-h2/-h3 специфически экспрессируются в подмножестве дофаминергических нейронов, а именно в непарном вентральном срединном дофаминергическом нейроне, и в субпопуляции латерально выступающих мотонейронов, т.е. в пяти мотонейронах, образующих ветвь сегментарного нерва a (SNa). Используя систему GAL4-UAS, было показано, что B-h2/-h3Gal4 в сочетании с репортерной линией усиленного зеленого флуоресцентного белка, нацеленного на мембрану, обеспечивает мощный генетический инструмент, воспроизводимый для мечения проекций и терминалов мотонейронов SNa на периферии и их дендритного дерева. в вентральном нервном тяже.Таким образом, сильно ограниченный паттерн экспрессии гомеопротеинов B-h2/-h3 и особенно родственный драйвер Gal4 представляют собой мощные генетические инструменты для идентификации и изучения генов, которые контролируют наведение аксонов, синаптогенез или разветвление дендритов в небольшой субпопуляции мотонейронов, идентифицируемых от эмбриогенеза до поздние личиночные стадии (Garses, 2006).
Одна линия, которая показала сильно ограниченную экспрессию в подмножествах клеток в VNC, представляет собой вставку в ген Barh2 (обозначенный Barh2 lacZ ). генов Barh2/h3 кодируют два родственных фактора транскрипции гомеобокса (B-h2 и B-h3), которые, как ранее было показано, играют важную роль в формировании и спецификации дистальных сегментов ног. У эмбриона коэкспрессия B-h2 и B-h3 была описана в межсегментарных, дорсальных эпидермальных клетках и в некоторых клетках ЦНС. В периферической нервной системе они экспрессируются в es (внешних сенсорных) нейронах и части их опорных клеток, где они необходимы для правильной спецификации подтипа es органов. В VNC экспрессия Barh2 впервые обнаруживается на поздней стадии 12. Положение и морфология клеток, экспрессирующих Barh2 lacZ , предполагают нейронную идентичность. Используя антитело, которое распознает как B-h2, так и B-h3, было обнаружено, что экспрессия B-h2/-h3 близко соответствует экспрессии репортера Barh2 lacZ в этих клетках. Экспрессия B-h2/-h3 в VNC достигает пика на стадии 14, когда она сильно экспрессируется ровно в восьми нейронах на полусегмент, включая хорошо охарактеризованный неспаренный дофаминовый нейрон вентральной срединной линии [тирозингидроксилаза (TH)-положительный].На этом уровне в каждом полусегменте была обнаружена еще одна TH- и Barh2- (и B-h2/-h3) положительная клетка, которая лежит латеральнее. Более дорсально, в промежуточной области VNC, пара клеток экспрессирует B-h2/-h3 в каждом полусегменте. Используя репортер Barh2 lacZ , было отмечено, что экспрессия Barh2 в этой паре клеток значительно варьирует от полусегмента к полусегменту, часто маркируя только одну клетку или вообще не метя. Наконец, в дорсальной части ВНЦ можно обнаружить группу из трех Barh2 -позитивных (и B-h2/-h3) клеток, лежащих на латеральном крае ЦНС. Возможность того, что одна из этих клеток может быть дорсо-латеральным дофаминовым нейроном, была исключена, потому что не наблюдалось перекрывания между TH и Barh2 . Т.о., в VNC Barh2 экспрессируется в очень небольшом подмножестве постмитотических клеток, включая субпопуляцию дофаминергических нейронов (Garces, 2006).
Ключевой отличительной чертой нейронов является траектория их аксонов.Чтобы проследить траекторию Barh2 -позитивных нейронов, для экспрессии нацеленного на мембрану GFP использовали доступный составной драйвер B-h2 Gal4 [обозначенный B-h2-GAL4.B4.5 или BN-GAL4] UAS-mEGFP F ]. В VNC удалось обнаружить экспрессию B-h2 Gal4 , начиная со стадии 13. Сначала было подтверждено, что экспрессия EGFP точно воспроизводит паттерн экспрессии B-h2/-h3, за исключением того, что вентральная непарная дофаминергический нейрон и две другие TH-позитивные клетки, описанные ранее, экспрессируют B-h2/-h3, но не экспрессируют B-h2 Gal4 . Другое отличие заключалось в том, что в некоторых полусегментах три клетки, расположенные в промежуточной области VNC, экспрессируют B-h2 Gal4 , тогда как только две из трех последовательно B-h2/-h3-позитивны. Поскольку это различие более заметно у эмбрионов ранней стадии 14 и имеет тенденцию исчезать у эмбрионов поздней стадии 16, присутствие этой эктопической клетки (которая находится в непосредственной близости от двух других) может быть связано с персистенцией экспрессии трансгена и стабильностью EGFP и, таким образом, отражает временную экспрессию эндогенных B-h2/-h3 в материнской клетке общего ганглия (Garces, 2006).
Используя драйвер B-h2 Gal4 , траектория B-h2/-h3-позитивных нейронов была прослежена на поздней стадии 16, и было обнаружено, что пять из этих клеток на самом деле являются мотонейронами, которые образуют пучки вместе до проецируются на периферию и специфически заселяют одну и ту же ветвь моторного аксона. В брюшных полусегментах дрозофилы A 2 -A 7 двигательные аксоны выходят из ЦНС и проецируются на периферию вдоль шести нервов: TN, ISN и двух ветвей SN.Основная ветвь ISN иннервирует мускулатуру дорсальной и латеральной стенок тела. Аксоны в двух ветвях ISN, ISNb и ISNd, дефасцикулируют от ISN, чтобы иннервировать отдельные группы мышц вентральной стенки тела. Точно так же первичная ветвь SN, SNa, иннервирует группу латеральных мышц, а аксоны ее малой ветви, SNc, проходят вдоль SNa до точки, в которой они дефасцикулируют и иннервируют вентральные мышцы. B-h2 Gal4 -положительные двигательные аксоны проходят только в SNa нервах, и их можно визуализировать проецируясь на мышцы 21-24 (латеральные поперечные 1-4, LT1-4) и мышцу 8 (пограничная мышца сегмента, SBM ) и/или 5 (латеральная косая 1, LO1).Интересно, что никакие другие клетки ЦНС, будь то глии или интернейроны, не экспрессируют B-h2 Gal4 . Вместе эти данные демонстрируют, что B-h2 Gal4 -позитивные моторные аксоны заселяют исключительно ветвь SNa (Garces, 2006).
B-h2 Gal4 экспрессия в нерве SNa сохраняется до третьей личиночной стадии, когда специфичность мышц-мишеней и морфология синаптических окончаний позволяют точно идентифицировать мотонейроны.Сравнивая окрашивание GFP (от B-h2 Gal4 ::UAS-CD8-GFP ) с анти-HRP иммунофлюоресценцией, можно было визуализировать B-h2 Gal4 7 —
7 — положительный мотор. -проекции аксона в области мышц 21-24, но не в направлении мышц 5 и 8. Дальнейшее сравнение окрашивания GFP и DLG [преимущественно постсинаптический структурный белок, в основном встречающийся в бутонах типа Ib] показывает, что бутоны типа Ib видны на каждая отдельная мышца 21-24 и были
B-h2 Gal4 -положительными.Окрашивание HRP показало, что удлинения мотонейронов II типа не были B-h2 Gal4 -положительными. Таким образом, эти наблюдения подчеркивают, что экспрессия B-h2 Gal4 на поздних личиночных стадиях позволяет визуализировать подмножество мотонейронов SNa, обеспечивающих иннервацию типа Ib в поле 21-24 мышц (Garces, 2006).Ранее ЧС определялась как нерв, состоящий исключительно из аксонов мотонейронов, расположенных в том же сегменте, что и мышцы, которые они иннервируют.Однако точное картирование мотонейронов показало, что только SNa и SNc являются действительно сегментарными нервами, поскольку только эти ветви содержат исключительно аксоны мотонейронов из того же сегмента. Именно эти аксоны выходят из ЦНС через сегментарный корешок нерва. Эксперименты, сочетающие ретроградное мечение мотонейронов с анализом клонов, генерируемых отдельными нейробластами, предоставили веские доказательства группирования клеточных тел мотонейронов в ЦНС, часто состоящих из нейронов, иннервирующих функционально связанные мышцы.Было высказано предположение, что морфологически сходные мотонейроны возникают из общего нейробласта, но один нейробласт может давать начало более чем одному морфологическому типу. Например, NB 2-2 производит два одинаковых мотонейрона. Клеточные тела этих мотонейронов лежат в непосредственной близости от VNC, а их аксоны направляются к родственным мышцам-мишеням, в данном случае к мышцам LT1-2. Напротив, NB 3-2 дает начало двум морфологически различным наборам мотонейронов. Первый набор из 3-4 мотонейронов иннервирует дорсальные мышцы DO3-4, DT1 и, возможно, также мышцу DO5.Второй набор из двух мотонейронов, полученных из NB 3-2, иннервирует мышечный LT3 и, вероятно, также мышцу. Детальный анализ мотонейронов, экспрессирующих B-h2 Gal4 в сочетании с антителом против B-h2/-h3, позволил идентифицировать группу из трех дорсальных мотонейронов, расположенных на латеральном крае VNC, и группу из два мотонейрона расположены вентрально и медиально. В соответствии с предыдущим отслеживанием и картированием мотонейронов можно предположить, что (1) в дорсолатеральной группе мотонейронов SNa два фактически являются мотонейронами, происходящими из NB 3-2, плюс мотонейрон, иннервирующий SBM и/или LO1 (неизвестного происхождения) и что (2) два вентро-медианных мотонейрона SNa происходят от NB 2-2.Эти наблюдения подчеркивают, что обе подгруппы мотонейронов SNa, происходящих из двух разных нейробластов, специфически экспрессируют B-h2 Gal4 и являются B-h2/-h3 положительными. Как отмечалось выше, отсутствие экспрессии B-h2 Gal4 в дофаминергических клетках оказалось выгодным, поскольку можно однозначно следовать только проекциям мотонейронов (Garces, 2006).
Мотонейроны, иннервирующие соседние мышцы, имеют перекрывающиеся дендритные деревья, и это верно даже для родственных мотонейронов, происходящих из разных нейробластов.Используя драйвер B-h2 Gal4 для экспрессии мембранно-направленного EGFP, было замечено, что мотонейроны SNa вырабатывают свои дендриты в определенной области дорсального нейропиля, которая лежит латеральнее передней комиссуры, как ранее описано другие используют ретроградную маркировку мотонейронов. Поскольку никакие другие клетки в VNC — ни интернейроны, ни глии — не экспрессируют B-h2 Gal4 , этот драйвер Gal4 в сочетании с используемой репортерной линией EGFP [UAS-mEGFP F ] обеспечивает мощный генетический инструмент для воспроизводимой маркировки мотонейронов SNa и визуализации их морфологии. Чтобы проиллюстрировать, что этот Gal4 может быть использован для экспериментов, направленных на генетическое манипулирование мотонейронами SNa, конститутивно активная форма малой GTPase RhoA [RhoA(V14)] неправильно экспрессируется в мотонейронах SNa. Неправильная экспрессия RhoA(V14) с использованием системы UAS/Gal4 в нейронах грибовидных тел приводит к уменьшению объема чашечки и сложности дендритов этих нейронов. Когда UASRhoA(V14) неправильно экспрессируется (вместе с UAS-EGFP F ) с использованием B-h2 Gal4 в качестве драйвера, мотонейроны SNa демонстрируют менее сложную дендритную разветвленность по сравнению с контролем.Кроме того, положение тел мотонейронов SNa внутри VNC воспроизводимо изменяется (проанализировано 48 полусегментов), поскольку они появляются в виде единого медиального кластера, близко примыкающего к наиболее латеральному продольному межнейронному пучку. Этот результат показывает, что линия B-h2 Gal4 представляет собой эффективный инструмент для функционального управления популяцией мотонейронов SNa (Garces, 2006).
Более того, поскольку ранее не сообщалось о специфической экспрессии какого-либо другого транскрипционного фактора или молекулярного маркера в субпопуляции мотонейронов SNa, гены Bar-h2/-h3 будут очень полезными маркерами для дальнейшей характеристики этих нейронов.Кроме того, ограниченный паттерн экспрессии обоих генов позволяет различать на молекулярном уровне мотонейроны SNa и SNc, которые представляют собой две родственные субпопуляции сегментарных мотонейронов, которые иннервируют, соответственно, набор латеральных и вентральных соматических мышц. Таким образом, драйвер Barh2 lacZ и особенно составной B-h2 Gal4 являются мощными генетическими инструментами в исследованиях, направленных на идентификацию и исследование генов, которые контролируют направление аксонов, синаптогенез и разветвление дендритов в пределах очень маленького участка. субпопуляция мотонейронов.По мере появления стандартизированной системы для картирования нейронов и родственных им нейритов в VNC эмбриона дрозофилы настоящая работа дополняет понимание разделения нейропиля и расширяет предыдущую работу, направленную на изучение формирования цепей в ЦНС эмбрионов и личинок дрозофилы (Garces , 2006).
Настройка строки заголовка страницы — ThemeFusion
Панель заголовка страницы — это горизонтальная полоса/раздел, который находится непосредственно под меню/заголовком.Его можно добавить через раздел макета с помощью макетов Avada или через глобальные параметры.
При добавлении с помощью макетов Avada практически нет ограничений в отношении содержимого строки заголовка страницы, поскольку при создании пользовательского макета строки заголовка страницы вам доступен полный набор элементов Avada Builder. Для получения дополнительной информации о том, как создать настраиваемую строку заголовка страницы, см. документ How To Build A Custom Page Title Bar Layout.
При добавлении через глобальные параметры строка заголовка страницы может содержать текст заголовка страницы, а также вариант хлебных крошек или строку поиска.Существует множество вариантов настройки строки заголовка страницы, включая фоновые изображения и настраиваемые подзаголовки. Строка заголовка страницы имеет глобальные параметры, которые можно найти на панели Avada > Параметры > Панель заголовка страницы , а также отдельные параметры в параметрах страницы Avada, которые можно найти на всех страницах и сообщениях, которые переопределяют глобальные параметры. Строка заголовка страницы может быть полностью отображена или скрыта на каждой странице или публикации в глобальном масштабе, и вы можете отображать или скрывать ее индивидуально для каждой страницы или публикации.
См. примеры строки заголовка страницы, созданной с помощью макетов Avada, на веб-сайте ресторана, сообщения в блогах на предварительно созданном сайте винодельни и на сайте диетолога Avada, и это лишь некоторые из них.Вы по-прежнему можете увидеть метод глобальных опций на различных страницах веб-сайтов науки, университетов, спа и отелей. Читайте дальше, чтобы узнать больше о каждом методе.
ВАЖНОЕ ПРИМЕЧАНИЕ. В Avada 5.5 мы улучшили обработку автоматического назначения h2 и h3 для заголовков в строке заголовка страницы и отдельных сообщений. Заголовок сообщения для отдельных сообщений, отдельных часто задаваемых вопросов, одного портфолио и страниц отдельных продуктов WooCommerce автоматически по умолчанию будет иметь значение h2, если, например, для Строка заголовка страницы >> Текст строки заголовка страницы установлено значение Скрыть .если Строка заголовка страницы >> Текст строки заголовка страницы установлен на Показать , то заголовок сообщения по умолчанию автоматически будет иметь значение h3.
Запчасти и аксессуары для освещения Hummer h2
Predator Inc: Запчасти и аксессуары для освещения Hummer h2Показаны все 37 результатов
Легкая штанга для тяжелых условий эксплуатации
689,00 $ В корзинуКомплект боковых габаритных огней Predator
487,00 $ Выберите параметрыНабор светодиодных указателей поворота Predator
477 долларов.00 Выберите параметрыПАКЕТ МОДЕРНИЗАЦИИ СВЕТОДИОДНЫХ СВЕТИЛЬНИКОВ
1 566,00 долл. США – 1 790,00 долл. США Выберите параметрыКомплект овальных светодиодных задних фонарей 6″
884,00 $ В корзину7-дюймовый светодиодный фонарь дальнего света с ДХО и ангельскими глазками
439,00 $ В корзинуНабор светодиодных налобных фонарей h2
880,00 $ В корзинуСветодиодные задние фонари в стиле милитари Predator
726 долларов.00 В корзину7-дюймовый светодиодный фонарь дальнего света
439,00 $ В корзинуh2 Задняя световая балка со складным верхом
789,00 $ В корзинуКомплект светодиодных задних фонарей Predator
435,00 $ Выберите параметрыСистема обнаружения объектов FLIR PathfindIR II с корпусом
3 355,00 $ В корзинуКомплект многофункциональных боковых габаритных огней LED Billet
998 долларов. 00 В корзинуКомплект светодиодной панели h2
2 571,00 $ В корзинуЖесткая 50-дюймовая светодиодная фара для бездорожья
1 599,00 $ В корзину30-дюймовая ЖЕСТКАЯ СВЕТОДИОДНАЯ БАРКА ДЛЯ ВНЕДОРОЖНИКОВ
999,00 $ В корзину20-дюймовая светодиодная панель для бездорожья — заливной свет
783,00 $ В корзинуOnX6 — 20-дюймовая светодиодная панель
769 долларов.00 – 862,00 $ Выберите параметрыОвальные светодиодные задние фонари Gen 2
949,00 $ В корзинуЖесткая 40-дюймовая светодиодная ВНЕДОРОЖНАЯ ФОНАРЬ
1455,00 $ В корзину2-дюймовый светодиодный фонарь для бездорожья — точечный
179,00 $ В корзину2-дюймовый светодиодный фонарь для бездорожья — прожектор
179,00 $ В корзинуЖЕСТКАЯ СВЕТОДИОДНАЯ ВНЕДОРОЖНАЯ ФОНАРЬ 6″
299 долларов. 00 Выберите параметры10-дюймовая СВЕТОДИОДНАЯ ВНЕДОРОЖНАЯ ФОНАРЬ
399,00 $ – 447,00 $ Выберите параметры4″ СВЕТОДИОДНАЯ ВНЕДОРОЖНАЯ ФОНАРЬ
219,00 $ – 263,00 $ Выберите параметрыWhite Squadron Pro — светодиод для скрытого монтажа
239,00 $ Выберите параметрыСветодиодный индикатор Squadron XL с одним корпусом
349,00 $ Выберите параметрыЭскадрилья XL-R LED
349 долларов.00 Выберите параметрыСветодиодный индикатор Squadron Pro
246,00 $ Выберите параметрыSquadron Pro — белый светодиод
219,00 $ Выберите параметрыСветодиод Squadron Pro для скрытого монтажа
239,00 $ – 391,00 $ Выберите параметрыOnX6 — 40-дюймовая светодиодная панель
1 567,00 $ Выберите параметрыOnX6 — 30-дюймовая светодиодная панель Pro Series
1231 доллар. 00 Выберите параметрыOnX6 — 10-дюймовая светодиодная панель
470,00 $ Выберите параметрыOnX, 4-дюймовая ИК-светодиодная панель EMI Lightbar
449,95 $ – 595,00 $ Выберите параметрыНабор защиты от камней
149,00 $ В корзинуПоисково-спасательная двойная светодиодная панель
5 195,00 $ В корзину
Гистон h2 линкера дрозофилы координирует STAT-зависимую организацию гетерохроматина и подавляет онкогенез, вызванный гиперактивной передачей сигналов JAK-STAT | Эпигенетика и хроматин
Гиперактивная передача сигналов JAK/STAT разрушает перицентрический гетерохроматин
Предыдущие отчеты указывали на участие пути передачи сигналов JAK-STAT в стабильности гетерохроматина и локализации гетерохроматинового белка 1 (HP1) у Drosophila.Tumorous-lethal ( Tum-l ), онкогенный аллель hopscotch ( hop ), кодирующий конститутивно гиперактивный мутант Drosophila JAK, нарушает гетерохроматическое замалчивание и локализацию HP1 в гетерохроматине [18]. Было обнаружено, что потеря Drosophila STAT (STAT92E) имеет очень похожие эффекты [19]. Основываясь на наблюдении, что HP1 и STAT92E взаимодействуют, было предположено, что два белка совместно локализуются внутри гетерохроматина и что нефосфорилированный STAT92E регулирует локализацию HP1 и стабильность гетерохроматина [19].
Эффекты передачи сигналов JAK-STAT на гетерохроматин были постулированы на основании окрашивания слюнных желез с низким разрешением для HP1. Чтобы более подробно изучить влияние нарушения передачи сигналов JAK-STAT на структуру хроматина, мы проанализировали политенные хромосомы из слюнных желез hop Tum-l мутантных личинок. На рисунке 1 показано сравнение политенных хромосом, полученных из контрольных и мутантных слюнных желез hop Tum-l .Общая структура политенных хромосом у мутанта не сильно нарушена, и они демонстрируют близкий к нормальному набор полос и межполос. Однако окрашивание DAPI hop Tum-1 слюнных желез показало, что политенные хромосомы лишены различимого хромоцентра, единственной объединенной области гетерохроматина, образованной из перицентрических областей всех хромосом. Эта область встроена в гетерохроматин и в норме интенсивно окрашивается на НР1.Напротив, окрашивание HP1 у мутантов hop Tum-1 было рассеяно в несколько дискретных очагов. Интересно, что аномальная структура хромоцентра у животных hop Tum-l напоминает таковую в слюнных железах животных, лишенных линкерного гистона h2 [13]. Чтобы напрямую сравнить эффекты мутации hop Tum-l и истощения h2 на структуру слюнной железы, мы рекомбинировали два трансгена, кодирующих шпильку РНК h2, управляемую промотором UAS, чувствительным к GAL4, и pActin-GAL4.При 29 °C эти трансгены вместе вызывают умеренное истощение h2 у личинок (см. Дополнительный файл 1: рисунок S1) примерно до 30% уровня дикого типа. Мы заметили, что мутация hop Tum-l или умеренная деплеция h2 у личинок L3 приводят к сопоставимым дефектам структуры политенных хромосом (рис. 1). Следовательно, мы предположили, что h2 и STAT92E могут взаимодействовать для поддержания нормальной архитектуры политенных хромосом, а также структуры и функции гетерохроматина.
Рисунок 1Гиперактивный JAK влияет на формирование хромоцентров в Drosophila политенных хромосом. Политенные хромосомы клеток слюнных желез личинок L3 анализировали методом непрямой иммунофлуоресценции (ИФ) с антителами против НР1 (зеленый) и h4K9Me 2 ( красный ). ДНК окрашивали DAPI ( синий ). Top , Политенные хромосомы дикого типа имеют равномерную регулярную структуру полос и межполос с единым хромоцентром, характеризующимся перекрывающимся интенсивным окрашиванием HP1 и h4K9Me 2 . Middle , hop Tum-l политенные хромосомы имеют аномальную морфологию с нарушенной структурой политенных хромосом и рассеянными фокусами HP1. Отдельный хромоцентр не может быть различим при окрашивании DAPI или HP1. Окраска h4K9Me 2 перекрывается с HP1-положительными очагами. Внизу , политенные хромосомы с дефицитом h2 имеют аномальную морфологию с нарушенной структурой политенных хромосом и рассеянными фокусами HP1. Отдельный хромоцентр не может быть различим при окрашивании DAPI или HP1.Окрашивание h4K9Me 2 сильно снижено. Масштабная линейка соответствует 10 мкм.
Интересно, что хотя гиперактивный JAK явно нарушает локализацию НР1 и образование единственного хромоцентра в политенных хромосомах, это не приводит к уменьшению количества диметиловой метки h4K9 в перицентрическом гетерохроматине. Напротив, истощение h2 вызывает заметное снижение перицентрического сигнала h4K9Me 2 (рис. 1). Т.о., h2 и STAT92E могут разделять некоторые, но не все роли в регуляции структуры и активности гетерохроматина.
h2 регулирует локализацию STAT92E в хроматине
Чтобы начать исследовать отношения между h2 и STAT92E, мы стремились определить, локализуются ли два белка совместно в политенных хромосомах. Используя окрашивание с помощью непрямой иммунофлуоресценции (IF), мы обнаружили, что STAT92E совместно локализуется с h2 в хромоцентре и на всех эухроматических плечах (рис. 2A). Изображения с большим увеличением плеч политенных хромосом из слюнных желез дикого типа демонстрируют поразительно сходную картину окрашивания для h2 и STAT92E, при этом оба белка наиболее сильно сконцентрированы в полосах.Разделенные изображения для h2 и STAT92E показывают практически полное совпадение их распределений. Эти наблюдения указывают на то, что h2 и STAT92E совместно локализуются в политенных хромосомах.
Рисунок 2Распределение STAT92E в политенных хромосомах зависит от h2. Политенные хромосомы клеток слюнных желез личинок L3 анализировали методом непрямой иммунофлуоресценции (ИФ) с антителами против h2 ( красный ) и STAT92E ( зеленый ). ДНК окрашивали DAPI ( синий ). Масштабные линейки соответствуют 10 мкм. (A) Top , полногеномная локализация h2 и STAT92E в политенных хромосомах. Паттерны локализации h2 и STAT92E сильно перекрываются в эухроматиновых плечах и хромоцентре политенных хромосом. ДНК окрашивали DAPI ( синий ). Внизу , увеличенное изображение совместной локализации h2 и STAT92E в плечах политенных хромосом. Объединенное разделенное изображение показывает, что STAT и h2 демонстрируют почти идентичные паттерны локализации, которые коррелируют с полосами политена. (B) Полногеномная локализация STAT92E у дикого типа , h2-истощенный, Su(var)3-9 [1] /Su(var)3-9 [2] и HP1-истощенный политенные хромосомы. В слюнных железах, истощенных по h2, структура политенных хромосом нарушена, и окрашивание STAT92E сильно снижено до уровня чуть выше фона. Ни мутация Su(var)3-9 , ни истощение HP1 существенно не влияют на локализацию STAT92E. (C) Занятость h2 и STAT92E в регуляторных областях эухроматиновых ( тубулин ) и гетерохроматиновых ( светлый , концертина ) генов и мобильного элемента ZAM .Заселение измеряли с помощью qChIP в контрольных аллелях и аллелях h2 RNAi. Ордината указывает количество специфических продуктов полимеразной цепной реакции (ПЦР) в образцах ДНК ChIP относительно исходной ДНК. Все эксперименты с qChIP были выполнены в трех повторностях. Планки погрешностей, стандартное отклонение. (D) Полногеномная локализация h2 в STAT92E-истощенных и hop Tum-l мутантных политенных хромосомах. Паттерн локализации h2 не изменяется и подобен таковому в хромосомах дикого типа (сравните с А).
Для дальнейшего изучения основы совместной локализации h2 и STAT92E в хроматине мы проанализировали их распределение в ядрах слюнных желез, в которых h2 был истощен РНКи. Как и ожидалось, мы наблюдали снижение содержания h2 в политенных хромосомах личинок с дефицитом h2 (дополнительный файл 1: рисунок S2A). Поразительно, но мы также обнаружили, что специфическое окрашивание STAT92E политенных хромосом, включая хромоцентр и эухроматиновые плечи, почти полностью теряется при истощении h2 (рис. 2B). В контрольных экспериментах локализация STAT92E или h2 существенно не изменилась у животных с гомозиготной нулевой мутацией Su(var)3-9 или с истощением HP1 по РНКи (рис. 2B и дополнительный файл 1: рис. S2A).Наблюдаемая неправильная локализация STAT92E в личинках с дефицитом h2 подтверждается экспериментами с хроматиновым IP (ChIP): занятость как h2, так и STAT92E в нескольких геномных локусах сильно снижается при нокдауне h2 (рис. 2C).
Мы также проанализировали распределение h2 и STAT92E в политенных хромосомах hop Tum-l мутантных личинок и у животных со STAT92E, истощенным РНКи. Опосредованное РНКи истощение почти полностью устраняет присутствие STAT92E в политенных хромосомах (дополнительный файл 1: рисунок S2C).Интересно, что мутация hop Tum-l также приводит к редукции и перераспределению STAT92E-специфического сигнала в политенных хромосомах (дополнительный файл 1: рисунок S2C). В отличие от эффектов истощения h2 на распределение STAT92E, ни истощение STAT92E, ни его гиперфосфорилирование не оказали заметного влияния на локализацию h2 (рис. 2D). Эти результаты указывают на то, что линкерный гистон h2 сильно способствует связыванию STAT92E с хроматином. h2 необходим для кажущейся повсеместной локализации STAT92E и, таким образом, может действовать выше STAT92E в регуляции нормальной архитектуры хромосом и структуры гетерохроматина, что было предложено ранее [18, 19].
h2 физически взаимодействует со STAT92E
Поскольку h2 контролирует локализацию STAT92E в хроматине, мы затем спросили, взаимодействуют ли h2 и STAT92E физически. Очищенный рекомбинантный His-меченый STAT92E и слитый белок h2 и глутатион-S-трансферазы (GST) исследовали на физические взаимодействия in vitro с помощью GST pull-down (фиг. 3A). GST-h2 легко взаимодействует со STAT92E, что определяется иммуноблоттингом белков, связанных с глутатион-агарозой, с антителом против His.В контрольных экспериментах STAT92E не связывался ни с самим GST, ни со слиянием GST-Histone h3A. Таким образом, взаимодействие h2-STAT92E не связано с высоким суммарным положительным зарядом белка h2 или образованием мостиков потенциально загрязняющими нуклеиновыми кислотами. С другой стороны, STAT92E связывается с GST-HP1, подтверждая более ранние доказательства взаимодействия между этими двумя белками [19]. Наблюдаемое физическое взаимодействие STAT92E и h2 обеспечивает in vitro поддержку модели, в которой h2 опосредует рекрутирование STAT92E на хроматин.
Рисунок 3h2 физически взаимодействует со STAT92E. Белок-белковые взаимодействия между очищенным STAT92E и h2 исследовали in vitro с помощью GST pull-down и ChIP. (A) GST и слитые белки GST с полноразмерным h2, HP1 или h3A были экспрессированы и очищены из E. coli и проанализированы с помощью GST pull-down с экспрессированным бакуловирусом очищенным рекомбинантным STAT92E-His 6 . Собранные образцы исследовали с помощью SDS-PAGE и окрашивания Кумасси ( сверху ) или иммуноблотинга с анти-His антителом 6 ( снизу ).В качестве контроля исследовали 10% вводимого STAT92E-His 6 . (B) Связывание STAT92E и Su(var)3-9 с восстановленным хроматином анализировали с помощью in vitro ChIP. Олигонуклеосомы воссоздавали на сверхскрученной плазмидной ДНК с очищенными нативными коровыми гистонами, с ( h2+ , темно-серых столбиков ) или без ( h2–, светло-серых столбцов ) очищенного нативного h2. Также исследовали непоследовательное связывание с плазмидой ( ДНК , белых столбиков ).Его 6 -меченые рекомбинантные белки инкубировали с матрицами хроматин/ДНК, сшивали, иммунопреципитировали с анти-His 6 антителом и определяли оккупацию с помощью ПЦР в реальном времени фрагмента плазмиды. Заселенность белков по отношению к вводу нормализовали к занятости на голой ДНК и наносили на график. Присутствие h2 в матрицах хроматина сильно стимулирует связывание как STAT92E, так и Su(var)3-9 . Все эксперименты ChIP проводились в двух повторах, и каждый биологический образец анализировался с помощью ПЦР в трех повторах. Столбики погрешностей представляют собой стандартное отклонение шести экспериментальных точек. (C) GST и слитые белки GST с полноразмерным h2, N-концевым доменом h2 (h2-N, аминокислотные остатки 1–40), глобулярным доменом (h2-G, остатки 41–119) и C -концевой домен (h2-C, 120–256) экспрессировали и очищали из E. coli и использовали в экспериментах по вытягиванию GST с экспрессированным бакуловирусом очищенным рекомбинантным STAT92E-His 6 . Вытянутые образцы исследовали, как в (А) .Полноразмерные полипептиды слитых белков GST обозначены открытыми треугольниками . STAT92E связывается со слияниями GST h2 и h2-C, но не взаимодействует с GST или слияниями GST h2-N и h2-G.
Для дальнейшего подтверждения этой модели мы исследовали взаимодействия h2 и STAT92E в контексте хроматина. С этой целью мы восстановили определенные олигонуклеосомные субстраты, которые содержали или не содержали h2 [14], и использовали ChIP in vitro для анализа ассоциации очищенного рекомбинантного STAT92E с h2-содержащим и не содержащим h2 хроматином. Плазмидная матрица, используемая для восстановления олигонуклеосом, не содержит специфических последовательностей распознавания STAT92E. В то время как присутствие нуклеосом ингибировало неспецифическое занятие STAT ДНК-субстратом, добавление h2 к хроматину стимулировало связывание STAT92E (рис. 3B). Таким образом, STAT92E физически взаимодействует с h2 как в виде свободного белка, так и в составе реконструированного хроматина. Эти наблюдения аналогичны нашему недавнему открытию взаимодействия между h2 и Su(var)3-9, а также привлечению Su(var)3-9 к хроматину, содержащему h2 (рис. 3B) [14].
линкерные гистоны h2 состоят из короткого неструктурированного N-концевого домена (NTD), центрального глобулярного домена в виде крылатой спирали (GD) и длинного неструктурированного C-концевого домена (CTD) [1, 2]. Определенные остатки внутри GD и области внутри CTD способствуют связыванию h2 с нуклеосомами in vitro [26]. Чтобы определить, какая область (области) способствует взаимодействию h2-STAT92E, мы провели экспериментов по связыванию in vitro со слияниями GST отдельных доменов h2 и STAT92E с His-меткой (рис. 3C).Мы наблюдали, что CTD h2 взаимодействует со STAT92E, тогда как NTD и GD h2 не взаимодействуют со STAT92E. Взаимодействие полноразмерного h2 со STAT92E, по-видимому, сильнее, чем взаимодействие изолированного CTD h2, что позволяет предположить, что на структуру CTD, необходимую для взаимодействия со STAT92E, может влиять один или оба других домена h2. Интересно, что мы недавно обнаружили, что CTD мышиного подтипа h2d необходим для его взаимодействия с DNMT1 и DNMT3B [26]. Таким образом, С-конец h2 может охватывать модуль(и) взаимодействия для нескольких партнеров по связыванию линкерного гистона h2.
h2 подавляет онкогенез, вызванный гиперактивной передачей сигналов JAK/STAT
В дополнение к демонстрации того, что передача сигналов JAK-STAT участвует в стабильности гетерохроматина, Ли и его коллеги также обнаружили, что HP1 и Su(var)3-9 могут действовать как супрессоры hop Tum-l — опосредованный онкогенез[18]. Аллель hop Tum-l , который вызывает гиперактивную передачу сигналов JAK/STAT, связан с высокой частотой неопластической трансформации личиночных макрофагоподобных ламелоцитов, что приводит к меланотическим опухолям преимущественно при рестриктивных температурах (>25° С)[27]. Чтобы исследовать потенциальную роль h2 в онкогенезе Drosophila , мы истощили h2 с помощью РНКи в мутантных личинках hop Tum-l . С этой целью мы скрестили мух, несущих рекомбинантную шпильку h2 РНК и трансгены pActin-GAL4, с аналогами hop Tum-l . В качестве контроля использовали трансген, истощающий неродственный белок Nautilus [28]. Когда личинки hop Tum-l подверглись истощению h2 при 29°C (примерно до 30% уровня дикого типа, дополнительный файл 1: рисунок S1), мы наблюдали заметное увеличение частоты и размера опухолей ( Рисунок 4A и Таблица 1).Опухолевой индекс увеличивался почти в два раза при истощении h2. Чтобы подтвердить роль h2 в опосредованном hop Tum-l онкогенезе, белок h2 был сверхэкспрессирован в hop Tum-l мутантных личинках. Это было достигнуто путем объединения аллеля hop Tum-1 с трансгенами, кодирующими полноразмерный h2 и драйвер Actin-GAL4. Эта комбинация вызвала заметное (более чем в три раза) снижение опухолевого индекса (таблица 1).Взятые вместе с результатами экспериментов по истощению h2, эти данные показывают, что h2 действует как супрессор онкогенеза, вызванного гиперактивной передачей сигналов JAK/STAT.
Рисунок 4Истощение h2 усиливает образование гемопоэтических опухолей, вызванное гиперактивностью JAK, но не влияет на транскрипционную активность JAK/STAT. (A) Личинки L3 с мутацией hop Tum-l ( слева ) демонстрируют гемопоэтические опухоли (белые стрелки) при выращивании при 29°C.Когда h2 одновременно истощается в личинках hop Tum-1 , как размер, так и количество опухолей значительно увеличиваются по всему личиночному телу (три панели на справа демонстрируют спектр наблюдаемых фенотипов). Для количественного определения см. Таблицу 1. Масштабная линейка соответствует 1 мм. (B) Гомозиготных мух, которые несут трансген eGFP под контролем промотора с 10 вышележащими сайтами связывания STAT92E ( 10xSTAT92E-GFP ), скрещивали с соответствующими аналогами, дикого типа ; аллель хмеля Tum-l ; нокдаун h2 (KD) pINT1-h2 4M , аллель Actin-GAL4 ; или комбинированный нокдаун h2, аллель hop Tum-1 при 29°C, и экспрессию eGFP исследовали в потомстве с помощью аутофлуоресценции GFP.Мутация hop Tum-l , но не истощение h2, сильно усиливает экспрессию eGFP. Масштабная линейка соответствует 1 мм. (C) Полуколичественный вестерн-анализ экспрессии репортера eGFP у целых личинок. Дикий тип ; хмель Тум-л ; pINT1-h2 4M , Actin-GAL4 ; и хоп TUM-L , PINT1-H2 4M , , Actin-Gal4 Мухи были скрещены с 10xStat92e92E-GFP репортерами, и белки в лизинах целых личинок L3 в Потомство F1 анализировали вестерн-блоттингом. В качестве контроля загрузки использовали антитубулиновый вестерн. h2 КД h2 нокдаун. (D) Для количественного определения eGFP интенсивность окрашивания GFP в вестерн-блоттинге (C) нормализовали по отношению к тубулину и наносили на график. На фоне hop Tum-1 экспрессия репортера eGFP примерно в четыре раза выше, чем на фоне дикого типа , и дополнительно стимулируется (примерно в 1,5 раза) нокдауном h2, тогда как истощение h2 сам по себе не оказывает заметного влияния на экспрессию eGFP.Количественное определение основано на трех независимых экспериментах. Планки ошибок представляют собой стандартное отклонение.
Таблица 1 h2 регулирует образование гемопоэтических опухолей, вызванное гиперактивным JAKВажно отметить, что истощение h2 на фоне дикого типа не приводит к онкогенезу (таблица 1), что предполагает, что h2 не играет прямой роли в транскрипционном ответе JAK-STAT. Чтобы подтвердить это наблюдение, мы использовали трансгенный аллель, в котором репортер GFP помещен под контроль STAT-чувствительного промотора, содержащего 10 сайтов связывания STAT92E [29].Мы исследовали экспрессию GFP с помощью аутофлуоресценции GFP целых личинок или вестерн-блоттинга лизатов личинок (рис. 4B, C). При гиперфосфорилировании мутанта hop Tum-1 STAT92E становится транскрипционно активным и сильно активирует экспрессию GFP. Количественная оценка западных данных указывает на четырехкратную активацию трансгена при гиперфосфорилировании STAT92E (рис. 4D), которая дополнительно усиливается за счет истощения h2 на фоне hop Tum-l .С другой стороны, истощение h2 само по себе не активирует экспрессию трансгена (рис. 4B, C, D). Таким образом, h2, по-видимому, не играет существенной роли в непосредственной регуляции нормальных транскрипционных мишеней фосфорилированного STAT92E.
Скорее, наши результаты согласуются с моделью, в которой h2 необходим для поддержания независимой от последовательности эктопической локализации STAT в хроматине. При истощении h2 из эктопических участков высвобождается избыток STAT92E. Высвобожденный STAT находится в нефосфорилированной, транскрипционно неактивной форме и не может активировать STAT-чувствительные гены (рис. 4).С другой стороны, в присутствии мутантного аллеля hop Tum-l высвобождаемый при истощении h2 STAT становится доступным в качестве субстрата для фосфорилирования гиперактивным JAK, что приводит к дополнительной активации эндогенных мишеней STAT и повышенный онкогенез. Если эта модель верна, то избыточная экспрессия самого STAT у мутанта hop Tum-l также должна приводить к аналогичному, усиленному образованию опухоли благодаря повышенной доступности субстрата JAK.Действительно, как и ожидалось, UAS-контролируемая сверхэкспрессия STAT92E, управляемая Actin-GAL4, приводит к четырехкратному увеличению индекса опухоли на фоне hop Tum-1 (таблица 1). Однако, когда нефосфорилируемый мутант STAT, STAT92E(Y704F)[30], сверхэкспрессируется в аналогичных условиях, онкогенный эффект hop Tum-l не затрагивается.
Эктопическая сверхэкспрессия либо HP1, либо Su(var)3-9 под контролем промотора теплового шока может также снижать индекс опухоли у hop Tum-l мутантных личинок[18].Чтобы определить, требуется ли h2 для опухолевых супрессорных функций HP1 и Su(var)3-9, мы одновременно истощили h2 и сверхэкспрессировали Su(var)3-9 или HP1 в личинках hop Tum-l . Истощение h2 устранило снижение туморогенности, вызванное гиперэкспрессией либо Su(var)3-9, либо HP1 (примерно в три раза), в результате чего опухолевые индексы были почти идентичны тем, которые наблюдались в исходном hop Tum-1 аллель (таблица 2).Эти наблюдения показывают, что h2 необходим для супрессорной активности HP1 и Su(var)3-9. Они также подтверждают модель, в которой h2 лежит выше STAT92E, HP1 и Su(var)3-9 как в поддержании структуры гетерохроматина, так и в онкогенезе, вызванном гиперактивной передачей сигналов JAK/STAT.
Таблица 2 Опухолесупрессорная функция HP1 и Su(var)3-9 зависит от h2h2 и STAT92E сотрудничают в установлении структуры гетерохроматина.
Истощение h2 приводит к глубоким изменениям архитектуры политенных хромосом и структуры, активности и биохимического состава гетерохроматина.Например, личинки с дефицитом h2 в значительной степени теряют перицентрическую диметильную метку h4K9 (рис. 1) и [13]. Однако ранее мы наблюдали, что избыточная экспрессия h4K9-специфического HMT, Su(var)3-9, частично устраняет этот дефект [14].
Результаты этого и др. исследований [18, 19] предполагают, что эктопическая локализация нефосфорилированного STAT92E в хроматине может играть важную роль в правильной морфологии политенных хромосом у личинок, особенно в формировании гетерохроматинового хромоцентра.Эктопическая локализация STAT требует линкерного гистона h2, истощение которого приводит к высвобождению STAT92E из эктопических участков и одновременному разрушению хромоцентра. Т.о., в свою очередь, возможно, что h2-обеспечиваемые эффекты на структуру гетерохроматина могут зависеть, по крайней мере частично, от STAT92E.
Мы решили изучить структуру политенных хромосом у личинок с дефицитом h2, которые сверхэкспрессируют нефосфорилируемую форму STAT92E(Y704F) in vivo у личинок. Мы обнаружили, что в то время как истощение h2 само по себе приводит к диссоциации одного хромоцентра на несколько очагов почти у 100% исследованных образцов (рис. 1 и 5A), сверхэкспрессия STAT92E (Y704F) частично устраняет этот дефект (рис. 5A).У истощенных по h2 животных, которые сверхэкспрессируют STAT92E(Y704F), до 40% клеток слюнных желез содержат один хромоцентр, различимый при окрашивании анти-HP1 или DAPI. Кроме того, при сверхэкспрессии STAT92E(Y704F) повторно заселяет эктопические участки в политенных хромосомах, из которых эндогенный STAT92E вытесняется из-за истощения h2 (сравните Дополнительный файл 1: рисунок S2C и рисунок 5B, вверху), и локализуется совместно с остаточным h2. . Эти результаты показывают, что выселение STAT92E необходимо для полной пенетрантности дефектов политенных хромосом, связанных с истощением h2.Они также совпадают с нашими предыдущими находками частичного обращения эффектов истощения h2 за счет избыточной экспрессии in vivo другого партнера по рекрутированию h2, Su(var)3-9. Напротив, сверхэкспрессия STAT92E дикого типа в личинках с дефицитом h2 не может восстановить единственный хромоцентр политенных хромосом, а трансгенный STAT92E не сильно ко-локализуется с остаточным h2 (рис. 5B, внизу ). Эти наблюдения указывают на то, что сверхэкспрессированный STA92E дикого типа не может быть эффективно связан с остаточным h2 в хроматине и не повторно заселяет эктопические хромосомные локусы.Такие результаты могут быть объяснены способностью STAT92E дикого типа фосфорилироваться киназой JAK и, таким образом, способностью связываться с нативными, специфичными к последовательности (и h2-независимыми) сайтами. С другой стороны, STAT92E(Y704F) менее динамичен, не может фосфорилироваться киназой JAK или взаимодействовать с нормальными мишенями активного (фосфорилированного) STAT и, следовательно, с большей вероятностью будет сильно конкурировать с эндогенным STAT92E за лимитирование h2 в условиях истощения h2. .
Рисунок 5STAT92E способствует образованию h2-зависимого гетерохроматина. Политенные хромосомы клеток слюнных желез личинок L3 анализировали методом непрямой иммунофлуоресценции (IF) окрашивания антителами против HP1 или h2 ( красный ) и STAT92E ( зеленый ). ДНК окрашивали DAPI ( синий ). Масштабная линейка соответствует 10 мкм. (A) Структура политенных хромосом у личинок дикого типа ( сверху ), личинок с истощением h2 ( посередине ) и личинок с истощением по h2, которые сверхэкспрессируют нефосфорилируемый STAT, STAT92E(Y704F) ( снизу ).Сигнал HP1 сильно обогащен в одной области хромоцентра у дикого типа. Хромоцентр не различим (DAPI), а окрашивание HP1 рассредоточено в нескольких очагах при истощении h2 (см. также рисунок 1A). Фенотип частично восстанавливается экспрессией STAT92E(Y704F). (B) STAT92E(Y704F), сверхэкспрессированный в личинках с дефицитом h2, локализуется совместно с остаточным h2 в политенных хромосомах ( сверху ). Эктопически сверхэкспрессированный трансгенный дикий тип ( WT ) STAT92E не восстанавливает единственный хромоцентр и не локализуется совместно с остаточным h2 ( внизу ).
Предложенная модель взаимодействия h2 и STAT в установлении структуры перицентрического гетерохроматина может на первый взгляд показаться маловероятной, поскольку ожидается, что распространенность фактора транскрипции, такого как STAT92E, будет на много порядков ниже, чем у вездесущих компонентов. хроматина, таких как h2 и HP1, и, следовательно, в недостаточном количестве, чтобы опосредовать глобальные структурные свойства хромосом. Чтобы устранить это предполагаемое противоречие в нашей модели, мы исследовали обилие STAT92E и HP1 в личиночных и эмбриональных лизатах с помощью полуколичественного вестерн-блоттинга.В этих экспериментах мы сравнили интенсивность вестерн-полос в нативных образцах и образцах, содержащих определенное количество рекомбинантных белков (дополнительный файл 1: рисунок S3). Мы обнаружили, что относительное содержание STAT92E in vivo отличается менее чем в десять раз от HP1. Кроме того, IF-окрашивание политенных хромосом на STAT92E (рис. 2A) ясно показывает, что STAT92E присутствует во всех политенных хромосомах с гораздо более широким распределением, чем ожидается от обычного фактора транскрипции, специфичного для последовательности. Таким образом, STAT92E является гораздо более распространенным компонентом хроматина, чем считалось ранее, и он вполне может способствовать глобальной структуре хромосом, как это предлагается в нашей модели (рис. 6).
Рисунок 6Истощение h2 предотвращает ассоциацию STAT с эктопическими участками и усиливает образование опухолей крови, вызванное гиперактивным JAK. Нуклеосомы, h2, HP1, STAT и JAK представлены светло-серыми овалами, красными прямоугольниками, синими овалами, оранжевыми шестиугольниками и светло-зелеными прямоугольниками соответственно.Гиперактивный JAK представлен увеличенным количеством соответствующих прямоугольников. (A) Top , в хроматине дикого типа нефосфорилированный STAT92E физически взаимодействует с h2 и рекрутируется в эктопические локусы независимо от последовательности-специфического распознавания ДНК. Два белка стабилизируют ассоциацию HP1 с гетерохроматином. Second , гиперактивный JAK в hop Tum-l личинки фосфорилируют большую часть STAT92E, что предотвращает его ассоциацию с h2 и HP1 в эктопических сайтах и дестабилизирует ассоциацию HP1 с перицентрическим гетерохроматином. Избыток фосфорилированного STAT92E аномально стимулирует транскрипционные мишени ниже по течению и приводит к образованию опухолей крови. В-третьих, , ассоциация STAT92E и HP1 с гетерохроматином зависит от присутствия h2. Когда h2 истощается, и STAT92E, и HP1 диссоциируют от хроматина. Из-за лимитирующей активности JAK дикого типа избыток STAT92E не активирует транскрипцию и не вызывает онкогенеза. Bottom , истощение h2 в хмеле Tum-l личинок приводит к выселению STAT92E из эктопических участков.Высвобожденный STAT92E становится доступным для фосфорилирования гиперактивным JAK и усиливает образование опухолей в крови. (B) Два независимых пути образования h2-зависимого гетерохроматина. Стрелки указывают на физические взаимодействия/связывание или ферментативную реакцию (метилирование h4K9). Фосфорилирование с помощью JAK предотвращает накопление STAT в эктопических локусах, включая перицентрический гетерохроматин.
Новая парадигма подавления опухоли: линкерный гистон h2 как молекулярный резервуар для онкогенного фактора транскрипции прямое следствие результирующего нарушения гетерохроматина, которое затем вызывает глобальные дефекты в регуляции генов [18].
Недавнее исследование на клетках млекопитающих [31] также предположило роль нефосфорилированного STAT5A в стабилизации гетерохроматина и подавлении опухолей посредством репрессии множественных онкогенов. Наши результаты не подтверждают эту модель. Самым убедительным доказательством против нарушения гетерохроматина как основной причины онкогенеза является наше открытие, что истощение h2 вызывает нарушения в гетерохроматине, которые сравнимы или сильнее, чем те, которые вызваны мутацией сам по себе не приводит к онкогенезу (таблица 1).Также важно, что, хотя сверхэкспрессия нефосфорилируемого STAT92E(Y704F) в значительной степени восстанавливает перицентрический гетерохроматин в слюнных железах, истощенных по h2 (рис. 5A), он не действует как супрессор опухоли на фоне hop Tum-l (таблица 1). ). Следовательно, образование опухоли и структурные аномалии гетерохроматина, наблюдаемые у мутанта hop Tum-l , вероятно, являются независимыми явлениями.Вместо этого наши результаты согласуются с моделью, в которой линкерный гистон h2 служит молекулярным резервуаром для STAT92E.Мы предполагаем, что в норме нефосфорилированный STAT92E находится вместе с h2 во многих локусах по всей хромосоме, включая перицентрический гетерохроматин, где два белка стабилизируют связывание HP1 (рис. 6A, вверху слева). Ассоциация STAT92E с этими эктопическими локусами зависит от h2, но не зависит от канонических элементов распознавания ДНК STAT92E. Гиперфосфорилирование STAT92E предотвращает его эффективную ассоциацию с эктопическими сайтами, направляет его к определенным элементам ДНК и вызывает аномальную активацию транскрипции и онкогенез (рис. 6А, вверху справа).Истощение h2 само по себе приводит к высвобождению нефосфорилированного STAT92E из резервуара хроматина и нарушению нормальных перицентрических структур. Однако в отсутствие гиперактивного JAK это не приводит к онкогенезу, поскольку нормальный уровень активности JAK-киназы ограничивается, и не достигается генерация более высоких уровней активированного STAT92E (Рисунок 6A, внизу слева). Однако истощение h2 в присутствии гиперактивной киназы hop Tum-l приводит к избыточной продукции фосфорилированного STAT92E и усилению онкогенеза (рис. 6A, внизу справа).
Линкерный гистон h2 направляет два альтернативных пути образования гетерохроматина
Ранее мы сообщали, что Drosophila h2 взаимодействует с Su(var)3-9 и рекрутирует его для стимуляции образования гетерохроматина [14]. Представленные здесь результаты предоставляют доказательства др., альтернативного пути образования h2-зависимого гетерохроматина, который включает взаимодействие h2 со STAT92E и его привлечение к эктопическим сайтам в хроматине. Выселение STAT92E из его хроматинового резервуара может быть достигнуто истощением h2 или гиперфосфорилированием STAT.Однако, хотя гиперфосфорилирование STAT92E нарушает структуру перицентрического гетерохроматина, оно существенно не влияет на диметилирование h4K9, присутствующее в HP1-позитивных очагах (рис. 1). Таким образом, STAT92E, по-видимому, необязателен для локализации или активности Su(var)3-9. И наоборот, нулевая мутация Su(var)3-9 не влияет на локализацию STAT92E в политенных хромосомах (рис. 2B). Мы пришли к выводу, что функция STAT92E в установлении или поддержании структуры гетерохроматина не зависит от метилирования h4K9 с помощью Su(var)3-9.С другой стороны, h2 направляет образование структур гетерохроматина посредством обоих путей, один из которых включает диметилирование h4K9, а другой использует STAT-зависимую стабилизацию HP1 (рис. 6B).
Наши анализы показывают, что нефосфорилированный STAT92E является обильным и почти повсеместным компонентом хроматина (рис. 2A и дополнительный файл 1: рис. S3). Его уровень экспрессии приближается к 10-20% уровня гетерохроматинового белка HP1, или близко к 1 молекуле на 100 нуклеосом в геноме [32], что намного выше, чем ожидалось для специфичного к последовательности фактора транскрипции.Хранение и секвестрация избытка неактивного STAT в ядре достигается за счет ассоциации с h2-содержащим хроматином и обеспечивает быструю активацию регуляторного каскада JAK-STAT внешними стимулами. В то же время, STAT92E, по-видимому, стабилизирует определенные конформации хроматина, такие как перицентрический гетерохроматин в хромоцентре хромосом личиночной слюнной железы у Drosophila , и физически взаимодействует с h2 и HP1, компонентами гетерохроматина. В будущем будет интересно проанализировать молекулярные взаимодействия в предполагаемом тройственном комплексе STAT-h2-HP1 в контексте хроматина и изучить, как STAT92E модулирует структуру хроматинового волокна in vitro .
Vantech® h3166W — Система грузовых стеллажей среднего размера серии h2™
Система стеллажей среднего размера серии h2™ (h3166W) от Vantech®. Тип крепления: гусеничное крепление R16. Количество баров: 2 шт. Материал: сталь. Отделка: белый. В этой системе используются прямоугольные прочные стержни. Монтажные стойки имеют очень широкое основание 8 дюймов при общей высоте 16,5 дюймов. Основание полностью приварено к вертикальной стойке для полной герметизации. На каждом вертикальном монтажном основании имеется четыре крючка с проушиной 3/4 дюйма. Для установки этой системы не требуется сверление отверстий.Эта система поставляется с зажимами для капельницы для установки на капельницы автомобиля. Они покрыты резиной сверху и снизу, чтобы предотвратить износ металла о металл. Резиновый колпачок на вертикальной стойке предотвращает шум ветра и предотвращает попадание воды в систему.
Технические характеристики:
Емкость: 500 фунтов |
Тип монтажа: R16 треки Mount |
Bar Количество: 2 шт. |
Материал: сталь |
Отделка: белый |
Особенности:
- Крепится к транспортному средству с помощью гусениц R16
- Низкий профиль 10.Общий клиренс 5 дюймов
- 4 крючка с проушиной 75 дюймов на основание для легкого крепления
- Обеспечивает максимальный комфорт и функциональность
- Повышает вашу личную безопасность и эффективность
- Предназначен для увеличения грузового пространства вашего автомобиля
- Сделано в США
Включает:
- 2 перекладины
- 1 стопор лестницы
- 1 направляющая лестницы
- 1 ремень EZ
- 2 направляющие R16
Тех.
Каждое монтажное основание изготовлено из авиационного алюминия 6061 толщиной 4 мм. Перекладина сверху защищена резиновым кожухом. Алюминиевая монтажная стойка составляет прибл. Толщина основания 1/8 дюйма. Треугольная опорная пластина полностью приварена к вертикальной стойке для полной герметизации. Для установки не требуется сверление отверстий. Эта система поставляется с зажимами для установки на капельные поручни автомобиля. Резиновая заглушка на вертикальной стойке предотвращает шум ветра и предотвращает попадание воды в систему.В комплект входят 2 нескользящих резиновых защитного кожуха для защиты верхней поверхности поперечных стержней от износа.Направляющая лестницы и стопоры лестницы оцинкованы, а затем покрыты резиной. Легкая поворотная ручка позволяет быстро регулировать и снимать или регулировать ограничитель лестницы и направляющую лестницы.Лидер в области дизайна и технологии, Vantech® — лучший выбор для коммерческих багажников на крышу фургонов и грузовиков. В Vantech они производят высококачественные системы багажников, чтобы доставить ваше снаряжение на работу или на прогулку и обратно в целости и сохранности. Бренд предлагает высокоэффективные багажники на крышу для безопасного подъема строительных материалов, лестниц, рекреационного оборудования или чего-либо промежуточного без особых усилий.Разработанные для повышения вашей производительности и снижения утомляемости, багажники на крышу Vantech предлагают достаточно места для всего, что вам нужно взять с собой, а также множество функций безопасности и удобства, позволяющих выполнять работу быстро, легко и надежно. Багажники Vantech изготавливаются из стали, алюминия или нержавеющей стали, чтобы быть прочными и долговечными, чтобы выдерживать нагрузку, обеспечивая долгие годы безотказной службы. От коммерческих грузовиков для подрядчиков до прогулочных внедорожников для любителей активного отдыха — у Vantech есть стойки для любых нужд.
Vision X Xmitter Off Road Light Bar Установка — 1999 Hummer h2 Video
Продукты, показанные в этом видео
Как установить световую полосу Vision X Xmitter Off Road на Hummer h2 1999 года
Сегодня на наш Hummer h2 1999 года мы будем устанавливать 12-дюймовую световую полосу Long Vision X Xmitter Low-Pro Prime Xtreme Off Road Light Bar, артикул XIL- LPX940. В связи с нашей установкой мы также будем использовать монтажные кронштейны Vision X, артикул XIL-B125 и некоторые термоусадочные стыковые соединители Deka, артикул DW05744-5.Первым шагом к установке наших новых фонарей Vision X является то, что нам нужно сначала установить наши кронштейны, поэтому вам нужно удалить четыре болта внизу, чтобы они выглядели так. Затем мы можем взять верхнюю часть нашего кронштейна, мы возьмем прилагаемое оборудование, мы собираемся пропустить наш болт вот так, перевернуть его, поставить шайбу, а затем мы собираемся получить это контргайка началась. Затем мы возьмем кронштейн, поместим его в надрезанную часть фонаря вот так, чтобы мы могли сдвинуть его в любую сторону вот так.Я собираюсь расположить свою прямо там, и тогда мы сможем ее затянуть.
Получите это красиво и надежно, нет причин затягивать слишком сильно. Сделайте его красивым и аккуратным, а затем мы просто повторим тот же процесс с другой стороны. С нашими кронштейнами на месте, мы собираемся прикрепить их к нашей световой панели. Я нашел самый простой способ сделать это, расположив его в этом положении, перевернув таким образом, чтобы мы могли прикрепить нашу нижнюю часть нашего кронштейна к кронштейну на фонаре. Мы выровняем его с нашими болтами, и мы просто собираемся начать их.Мы начнем их с обеих сторон, а затем мы можем повернуть его и закончить затягивание.
Закрепив скобы, мы можем приступить к проводке. Сегодня мы собираемся подключить его к существующему жгуту проводов на нашем Хаммере. Если у вас нет существующего жгута проводов, он входит в комплект, но на сегодня мы собираемся отрезать здесь конец розетки, и теперь мы можем начать снимать резиновое покрытие, защищающее провода. Как только я получу его наполовину, я собираюсь вырезать щель в резиновом покрытии, чтобы я мог как бы отклеить его.Вы должны быть уверены, что не прорежете слишком глубоко. Сделав это, мы можем пойти дальше и взять наши инструменты для зачистки проводов, и мы собираемся отрезать этот избыток.
Затем мы начнем с зачистки наших проводов, мы спустимся примерно на 1/2 дюйма и начнем зачищать их. Теперь давайте оголим наш существующий провод, затем мы возьмем один из моих стыковых разъемов Deka, и я знаю, что мой зеленый — мой положительный, поэтому я собираюсь подключить его к моему красному на моем Vision X Light, поэтому я сначала включу его.Это приятно. Принесите наш красный провод вокруг, вставьте его, затем обожмите его.
Затем мы соединим желтый с черным, который будет землей, затем мы сможем взять нашу тепловую пушку и сжать их. Если у вас нет тепловой пушки, зажигалка работает так же хорошо, вы просто хотите убедиться и продолжать двигаться вперед и назад таким образом, чтобы не сжечь стыковой разъем. Этот желтый провод здесь с нашим Vision X Light — это наш регулятор диммера, который мы не используем для этого приложения, поэтому мы собираемся просто установить его там и мы просто собираемся использовать немного изоленты, чтобы склеить все это вместе.Теперь, когда мы заклеили его скотчем, мы продолжим и приведем в порядок наш внешний вид, так что я просто засуну этот провод обратно в нашу световую панель, затем я просто возьму несколько стяжек и сделай так, чтобы это выглядело мило и красиво, и я просто отрезаю лишнюю стяжку, и тогда мы будем готовы проверить это. Как видите, они отлично работают. Как вы можете видеть, для этой стороны у нас есть хорошее открытое место, поэтому мы поставим еще одно, мы просто повторим тот же процесс. На этом мы завершаем установку 12-дюймовой световой панели Long Vision X Xmitter Low-Pro Prime Xtreme Off Road Light Bar, номер детали XIL-LPX940, на наш Hummer h2 1999 года выпуска.О нас 1 056 204
Создано, чтобы вы знали, что получаете, и получали именно то, что вам нужно.
35 570Чтобы убедиться, что продукты работают так, как должны.
2 476 5111 125 924 телефонных звонка и 1 350 587 электронных писем, чтобы помочь найти правильное решение.
400+Мы знакомимся с нашей продукцией из первых рук, чтобы специалисты могли лучше помочь вам.
76Помощь нашим соседям и клиентам лицом к лицу за прилавком.
193 357Создан для того, чтобы вы всегда получали ответы на свои вопросы от настоящих экспертов.
Низкопрофильные стальные стойки Vantech h2 с 2 перекладинами для универсальных лестниц для фургонов Sprinter
Обработка заказа по кредитной карте
Ваш заказ будет проверен на точность и обработан после получения. Если возникнут проблемы с вашим заказом, вы будете немедленно уведомлены по телефону или электронной почте. Обработка кредитной карты проводится внутри компании после проверки правильности вашего заказа.Из-за своего веса и размера некоторые строительные стеллажи и прицепы необходимо заказывать и отправлять только через наземную службу FedEx. Бесплатная наземная доставка при покупке на сумму более 99 долларов США распространяется на следующие бренды: BackRack, Front Runner, Hauler, Inno, Malone, Rhino-Rack, RinseKit, Rocky Mounts, Saris, Thule, TracRac, Vantech и Yakima. Плата за доставку негабаритных товаров будет четко отображаться и будет добавлена к цене негабаритных товаров в вашей корзине. Наше предложение по бесплатной наземной доставке не распространяется на грузовые ящики, специализированные багажные корзины, оконные решетки BackRack и продукты System One Utility Rack.Все заказы отправляются через FedEx или USPS. Коды купонов не применяются к товарам с потрясающими предложениями!, товарам с переупаковкой или во время распродаж.Доставка
Хотя это не всегда возможно, мы постараемся отправить все заказы к концу следующего рабочего дня (за исключением Vantech, Rhino Rack, RockyMounts и BackRack). Пример: заказы, полученные в пятницу, будут отправлены в понедельник. Поскольку суббота не считается рабочим днем, срочные посылки не отправляются и не доставляются в субботу. Прямая подпись требуется для всех ускоренных заказов и заказов на сумму более 499 долларов США. Наземные посылки могут быть доставлены в субботу в некоторые регионы. День получения посылки не считается одним из дней доставки. Грузовые ящики , транспортные средства, стойки Rhino Rack, BackRack, RockyMounts и прицепы Malone могут иметь задержку доставки на 2–4 дня. В настоящее время Vantech испытывает 8-10-дневные задержки доставки из-за ситуации с Covid-19 в Нью-Йорке. Мы не предлагаем ускоренную доставку для Aries, Hauler, Vantech, Rhino Rack, System One, RockyMounts, Malone Trailers или BackRack.Мы отправляем , а не в отели или транспортно-экспедиторские компании.