Недостатки лады гранты: отзывы владельцев, оставить отзыв на LADA Granta седан 2018 – н.в., I Рестайлинг седан на Autospot

Недостатки Лада Гранта лифтбек 2019-2020

Все минусы Лада Гранта лифтбек

➖ Качество материалов отделки
➖ Посторонний шум в КПП
➖ Подвеска

Плюсы

➕ Вместительный багажник
➕ Теплый салон
➕ Экономичность

Достоинства и недостатки Лада Гранта хэтчбек 2019-2020 в новом кузове выявлены на основе отзывов реальных владельцев. Более детальные плюсы и минусы Lada Granta лифтбек с механикой, автоматом и роботом можно узнать из рассказов ниже.

Отзывы владельцев

О комфорте. Шумка, можно сказать, вообще отсутствует. После кроссовера Hyundai ix35 у меня, конечно, был культурный шок некоторое время. Сейчас уже привык и даже могу сказать, что это идеальный авто для работы. В первую очередь благодаря нереально низкому расходу топлива.

Возвращаясь к комфорту. Два противоречивых мнения: у меня первые полтора года от поездок дальше 50 км (на водительском сиденье) начинала ныть спина. А жена на заднем сиденье говорит, что намного комфортнее, чем на заднем диване ix35!

Робот на Гранту ставят прекрасный. Я имею в виду, что он практически лишен тех недостатков, которые имели первые роботы Опеля и Тойоты.

Динамика просто огонь! Машинка легкая и резвая. На светофорах можно оставлять конечно не всех, но… Правда после 60 км/ч динамика начинает падать.

Александр, отзыв о Lada Granta Liftback 1.6 (106 л.с.) с роботом АМТ 2018 года

Видео отзыв

Лифтбек, коробка робот, движок на 106 сил, ЭУР, электростеклоподъемники передние, заднее сиденье 60/40, кондиционер и т.д. В общем, комплектация «Норма».

Первые ощущения от робота – тупит (надо привыкать, это мой первый такой опыт), но вибраций никаких! Шумки нет по определению, колеса слышно откровенно хорошо. В зеркалах обзорность как в телевизорах. В поворотах чутка валится, но терпимо.

Салон? Предоставляет огромные возможности по тюнингу, главное не переборщить! Установлю музыку, коврики, подлокотник, шумку… Все это впереди. Спойлер хочется поставить, может быть пороги.

Владелец ездит на Лада Гранта лифтбек 1.6 (106 л.с.) с роботом 2018 г.в.

Впечатления? Купил в апреле, на сей день пробег 21 220 км, пока поменял только лампочку габарита (ТО не считаю). Есть плюсы по сравнению с Приорой (более ранние авто, которыми владел, не беру в расчет), но есть и минусы. Достоинства:

— КПП четко переключает скорости, но подвывает (зараза).

— Ходовые огни (на Приоре лампы ближнего света, расходники).

— Кондиционер лучше работает (мнение личное).

— Подвеска мягче (проходит лежачих полицейских, не тормозя).

— Расход топлива меньше.

Из недостатков пока могу отметить только вой КПП.

Алексей, отзыв о Лада Гранта лифтбек 1.6 (106 л.с.) на механике 2019 года

Отзывы реальных владельцев Лада Гранта 2020 лифтбек все минусы и плюсы

Итак, пройдусь по машине, одновременно сравнивая Гранту с Калиной.

Двигатель. Установленный здесь 16-клапанный мотор ощутимо тише старого восьмиклапаного, что стоял на моей Калине. Не тарахтит, как трактор, работает ровно. Из-за обкатки на газ не давлю, разгоняюсь плавно, но потенциал чувствуется. Если есть деньги, то считаю, что нужно брать машину именно с таким движком. Я не пожалел, хотя изначально хотел восьмиклапанник.

Расход топлива в начале пугал, машина кушала 12-14 литров в смешанном режиме. Примерно через 500 километров расход упал, и сейчас он составляет 7,5 литров на сотню в смешанном цикле, за городом 5-5,5 л. Все это с учетом того, что я не давлю на газ, спокойно разгоняюсь и торможу. Расход на Калине у меня был выше — 9-9,5 литров на сотню в смешанном режиме.

Коробка передач. Передачи переключаются легче и четче, чем на Калине. На Калине было невозможно воткнуть первую на невысокой скорости, на Гранте легко. Коробка воет, но на Калине было то же самое.

Подвеска. Честно, думал будет помягче. Как я понял на седанах именно так, а вот на лифтбеках, по-моему, подвеска жестче отрабатывает неровности. Но все равно лучше, чем на моей прежней Калине. Ощутимо лучше.

Салон и качество материалов. Такой же просторный, как и в Калине, но из-за изменения передней панели и формы бардачка места для ног переднего пассажира поменьше. Пластик и его устойчивость к царапинам будет немножко хуже, чем у пластика Калин первого поколения. Жесткость пластика в обеих машинах примерно одинаковая.

Сидения поплотнее, чем на Калине, лучше держат форму. Материал обивки сидений и пола нареканий не вызвал, только вот из-за черного цвета видно каждую соринку.

Кузовное железо. Стопроцентно тоньше, чем на Калинах первого поколения. Часто можно прочитать или услышать, что металл одинаковый. Так вот, это не так. Просто ради интереса понажимайте в разных местах. Бампера из совсем тоненькой пластмассы, на Калине все было гораздо основательнее.

Багажник. Больше чем у Калины универсала, а пятая дверь лифтбека и возможность сложить сидения делают машину при перевозке каких-либо грузов такой же удобной, как и универсал.

Кондиционер. Нормально работает и отлично охлаждает салон. На мощность двигателя влияния не оказывает. Если не ошибаюсь, то при наборе скорости кондиционер отключается автоматически.

Отзыв о Lada Granta 1.6 (106 л.с.) с механикой 2019 г.в.

Недостатки Лады Гранта: отзывы владельцев

Автомобиль Лада Гранта был создан для того, чтобы заменить не только ВАЗ-2107, который уже давно изжил себя, но и Калину, считающуюся серьезным просчетом маркетологов отечественного автопрома. Однако база именно Калины стала подспорьем для создания и дальнейшего производства Гранты.

Основной целью разработчиков этого автомобиля являлось создание бюджетного автомобиля, который имел бы достаточно привлекательный внешний вид. Конструкторы хорошенько поработали над кузовом Калины и изменили его, практически до неузнаваемости.

Таким образом, Гранта оказалась автомобилем, относящийся к классу В. Она может похвастаться достаточно внушительными габаритами, поскольку ее длина составляет 4260 мм, высота – 1500 мм, а ширина – 1700 мм.

Кстати, именно Гранта оказалась первым автомобилем отечественного производства, который выпускается с автоматической коробкой передач, правда, только в комплектации «люкс».

Читайте также: Объем багажника Лада Гранта лифтбек

Недостатки Лады Гранта

Как и все автомобили, Лада Гранта имеет собственные недостатки. Некоторые из них проявляются при первом же осмотре автомобиля, а другие – в процессе его эксплуатации.

1. При движении данного автомобиля начинают быть слышны скрипы его задней части.
2. Включить заднюю передачу можно лишь после того, как включишь первую. Если на улице стоит сильный мороз, то ручка переключения передач будет двигаться достаточно туго, а в коробке станет слышен неприятный вой.
3. Присутствие плавающих оборотов при рулевом управлении, что свидетельствует об отсутствии стабильной работы мотора без нагрузки.
4. На приборной панели отсутствует датчик, показывающий температуру двигателя. Вместо него там присутствует лампочка, которая даст о себе знать только в том случае, когда температура мотора достигнет 115 градусов.
5. Передние стойки автомобиля могут распухнуть в случае значительного повышения температуры в салоне.
6. Многие владельцы Лады Гранта жалуются, что стекла и фары запотевают намного сильнее, нежели в других автомобилях. Более того, в этом транспортном средстве запотеть готовы даже задние фары, что, кстати, является признаком произошедшей закупорки вентиляционных каналов.
7. Под капотом автомобиля можно обнаружить множество патрубков, которые будут достаточно сильно перетянуты. Вскоре их придется заменить, поскольку он дадут трещины в районе хомутов.
8. Как и во всех прошлых моделях Лады, в Гранте разработчики не додумались сделать крышку бензобака защищенной. Ее по-прежнему можно открыть одним пальцем.
9. Также по наследству в Гранте присутствует достаточно дешевый пластик, который к тому же еще и жесткий. Единственное, что сделали с ним разработчики, это немного подпилили, поэтому он больше не имеет надоедливых заусениц.
10. Лада Гранта оснащена гидрокорректором фар. В связи с этим регулировка фар происходит механическим путем. Весьма примечательно, что даже Калина была оборудована электрическим корректором. Почему разработчики предпочли поставить на Гранту гидрокоррекор, остается загадкой для всех.
11. Нет потолочных ручек.

Отдельно хотелось бы отметить, что у Лады Гранты достаточно часто возникают проблемы с термостатом и топливной системой. Эти неполадки довольно просто устранить, пройдя самое обыкновенное техническое обслуживание.

Согласно статистике, более 50% собственников этого автомобиля, пройдя обкатку, вынуждены обращаться в сервисный центр в связи с тем, что генератор вышел из строя. Решить данную проблему также достаточно легко. Для этого просто необходимо заменить имеющийся генератор на генератор от Лады Калина.

Поломка термостата выражается в том, что двигатель либо не может прогреться выше 70 градусов, либо прогревается, но при температуре, превышающей 100 градусов, не включается вентилятор. В данном случае также поможет замена этой делали на термостат от Калины.

Читайте также: Регулировка фар на Гранта

Дребезжание стекол во время езды – одна из самых раздражающих проблем. Ее удастся устранить только тюнингом.

Как видим, у Лады Гранта присутствует достаточно много недостатков, тем не менее если сравнивать соотношение цены и качества, можно прийти к выводу, что это сравнительно хороший автомобиль.

Слабые стороны и недочеты LADA Granta

Лада Гранта является отличным вариантом бюджетного седана. Автомобиль переднеприводный, он имеет привлекательный внешний вид и довольно приличную комплектацию. Стоимость транспортного средства невысокая, поэтому он востребован на рынке. Несмотря на современные технические характеристики, новый двигатель, повышенную систему безопасности и богатую комплектацию автомобиль имеет недостатки. О них необходимо знать и учитывать, приобретая модель Лада Гранта.

Как показывает практика, любой автомобиль имеет свои слабые места. Лада Гранта не стала исключением. Данная марка автомобиля не идеальна и после ряда исследований были определены ее болячки, которые в итоге портят всю картину и становятся причиной частой поломки. Поэтому требуют особого внимания от владельца транспортным средством.

Слабые места Лады Гранта:

• Салон;
• Фары;
• Электроника;
• Термостат;
• Кузов;
• Ходовая часть;
• Коробка передач;
• Тормозные колодки.

Теперь подробнее…

Салон

Салон явно слабая сторона автомобиля. Уже с первых минут эксплуатации автомобиля можно заметить ряд его недостатков. Первый связан с рукояткой, отвечающей за регулировку сиденья. Она достаточно хрупкая и быстро ломается. Кроме этого, чехол рычага коробки передач также оставляет желать лучшего. Материал низкого качества и быстро трескается. В процессе эксплуатации постоянно вылезает из-под набалдашника.

Практически сразу начинает мигать лампочка, контролирующая работу подушек безопасности. Она указывает на их неисправность. Вскоре выходя из строя стеклоподъемники. Они начинают заедать и издавать при опускании стекла неприятный звук.

В автомобиле установлен кондиционер, но качество его работы достаточно низкое. Он плохо справляется поставленной задачей. Днем в жару его работа практически незаметна. Особенно если машина стоит.

Фары, электроника, термостат

Уязвимым местом являются задние фары. Они быстро потеют и плохо закреплены. Со стороны ламп большие зазоры, в которых быстро скапливается пыль и грязь. Потребуется проводить мероприятия по ее удалению.

Что касается электроники, то она стала недостатком на первых автомобилях данной модели. Довольно часто происходит заливание ЭБУ по жгуту проводов. Кроме этого, возникают неисправности генератора. Проблема заключается в его подшипниках и ремне.

В принципе система охлаждения не имеет нареканий. Проблемы появляются лишь с термостатом и то не у всех моделей. Данная болячка в основном характерна для машин, выпушенных до 2012 года.

Кузов

Вышеперечисленные недостатки являются незначительными и относительно безобидны. Если говорить о кузове, то это серьезный минус транспортного средства. Краска на нем быстро протирается. В итоге кузов остается без защитного слоя и начинает ржаветь. Это свидетельствует о том, что неправильно проведен монтаж автомобиля. При этом пластиковые бамперы вовсе не окрашены, что многим покупателям не очень нравится.

Ходовая часть, коробка передач, тормозные колодки

Ходовая часть автомобиля стала ее важным недостатком. Передние стойки со временем начинают издавать неприятный звук. Он проявляется в виде стука уже через 6 тысяч км пробега. Со временем кронштейны растяжки тяги, находящиеся на передней подвеске, могут лопнуть.

Появление воя в КПП указывает на сбой в работе коробки передач. Эта проблема часто беспокоит владельцев автомобиля. Кроме этого, на холодную данная часть имеет тугой ход. Она плохо переносит низкие температуры. Зимой велика вероятность замерзания рукоятки. Решить эту проблему можно, достаточно провести замену масла в КПП на синтетику.

Тормозные колодки, которыми оборудована Лада Гранта, невысокого качества. Со временем они издают неприятный скрип и визжат. Кроме этого, быстро стираются тормозные диски.

Не совсем удачно закреплен в автомобиле трос ручника. Специалисты советуют начинать эксплуатировать транспортное средство крайне осторожно. Потребуется время для того, чтобы привыкнуть данной особенности.

Основные недостатки LADA Granta

Автомобиль Лада Гранта имеет плюсы и минусы. Последние довольно важны, так как часто становятся причиной выхода из строя транспортного средства. Основные недостатки Лада Гранта представлены в виде:

1. Заднего барабанного тормоза;
2. Слабого мотора;
3. Отсутствия задних подлокотников и потолочных ручек;
4. Одной подушки безопасности, которая установлена для водителя;
5. Минимального набора опций;
6. Отсутствия датчика температуры двигателя;
7. Скрипящего кузова;
8. Не корректной работы климатической системы.

Заключение.

Список недостатков Лада Гранта имеет достаточно большой, но многих из них можно избежать. Для этого необходимо бережно относится к транспортному средству и своевременно проводить техобслуживание. Замена вышедшей из стоя детали на аналоговую позволит повысить качество работы автомобиля и снизит вероятность его повторной поломки.

P.S.: Уважаемые владельцы Гранты, если вами были замечены систематические поломки каких-либо узлов, агрегатов или деталей Lada Granta, то сообщите об этом в комментариях ниже. Будем вместе вести статистику слабых мест и недостатков автомобилей данной модели.

Типичные проблемы и недостатки Лада Гранта

Как и многие другие автомобили «Лада Гранта» имеет свои слабые места, которые принято называть «болезнями». Некоторые «болезни» не заставят долго ждать и проявят себя уже в первое время эксплуатации, другие же дадут знать о себе лишь с более-менее большим пробегом. Часть проблем была признана производителем и может быть устранена в салонах официальных дилеров, в то время как другую часть придется решать самостоятельно.

Примерно половина проданных автомобилей после небольшого пробега огорчила своих владельцев поломкой генератора. Ремонт родной детали решит проблему лишь на время, поэтому стоит установить генератор от «Калины».

Вторая проблема — это поломка термостата. В результате зимой двигатель не прогревается выше 70 градусов или же при температуре даже в 100 градусов не срабатывает вентилятор. Решением является замена термостата на аналог от ВАЗ 21082 или от «Калины».

На холостых оборотах в салоне ощущается вибрация двигателя. Официально эту проблему не признают, а потому выходом становится протягивание подушек крепления.

Сильно перетянутые патрубки под капотом через некоторое время начинают трескаться в местах затяжки хомута. Спасти ситуацию можно ослабив хомуты.

Вой в коробке передач, тугой ход ручки и ее замерзание в морозы один из неприятных сюрпризов, который «Гранта» преподносит своим хозяевам. Залив в коробку синтетическое масло 75w90, Вы лишь немного избавитесь от воя, но решите проблему замерзания ручки

Жесткий пластик в салоне далеко не самое лучшее конструкторское решение для современного автомобиля, но с этим, по крайней мере, можно смириться из-за отсутствия скрипа. Докучает здесь другая проблема — скрип потолочной обшивки, что чаще всего проявляется при отрицательной температуре воздуха. Также владельцы Lada Granta жалуются на треск вверху лобового или заднего стекла, салонного фонаря и плохую шумоизоляцию. Официального решения проблемы пока нет, поэтому придется либо менять обшивку и улучшать шумоизоляцию, либо громче включать музыку. Бортовой компьютер не всегда выводит данные о мгновенном расходе топлива, что является одной из главных его задач. Крышка перчаточного ящика порой открывается, если закрыть ее до первого более громкого щелчка. Поэтому ее необходимо закрывать до второго тихого щелчка. Досаждают еще и очень слабые круглые рукоятки для регулировки угла наклона спинки передних кресел. По возможности их стоит меньше трогать или делать это более аккуратно.

Запотевающие задние фонари могут стать следствием закупорки вентиляционных каналов, которые рекомендует проверить сам производитель.

Плохо закрывающийся багажник — еще одна проблема, свойственная бюджетному отечественному седану. Протяжка петли замка устранит данный дефект. Бывает, что во время доступа к монтажному отсеку с кнопки открытия багажника спадает фишка. В этом случае придется сделать удлинитель из 20-сантиметрового провода, 10-сантиметровой термоусадочной трубки и четырех клем.

Преимущества новой Granta Универсал — статьи от компании Форсаж

29 августа 2018 года на Московском международном автосалоне компания «АвтоВАЗ» представила две «недостающие» кузовные модификации для своего «бестселлера» – модельной линейки LADA Granta. К давно уже успешно продающимся и лидирующим на российском рынке седану и лифтбеку добавились хэтчбек и универсал. И если к первой новинке особых вопросов не возникло (что ожидали, то и получили), то «универсальная» версия многих очень удивила.

Начнем с того, что LADA Granta универсал оказалась короче не только седана, но и лифтбека (на 150 и 132 мм соответственно). Разумеется, для любого автомобилиста уменьшение длины кузова является преимуществом с точки зрения маневренности, но ведь от универсалов обычно ожидают совсем другого. Чаще всего – это длиннющие «вагоны» намного превосходящие по габаритам других представителей линейки и предлагающие дополнительные сантиметры пространства для пассажиров и багажа.

В LADA Granta универсал ничего такого нет – колесная база осталась та же, свободное пространство первого и второго ряда не увеличилось, а объем багажника даже уменьшился (355 мм против 440 мм у лифтбека и 520 мм у седана). Так в чем же выгода для покупателя данного автомобиля? Все становится на свои места, если рассматривать «универсальную» Гранту исключительно как «увеличенный хэтчбек», не зря ведь они были представлены одновременно.

Это машина для тех, кому не хватает крохотного 240-литрового багажника в хэтчбеке, но при этом нужны все преимущества, которые предоставляет данная версия кузова – главным образом громадный проем задней двери. Попробуйте засунуть что-то габаритное и длинномерное в седан – ничего не получится, несмотря на все его литры. Лифтбек тоже проиграет во многих случаях из-за «скошенной» двери. Грубо говоря, длина холодильника, который можно уместить в универсал – окажется самой большой.

Чем еще может «похвастаться» новинка?

Как и все «собратья» по второму поколению LADA Granta универсал получил множество улучшений как извне, так и изнутри.

• Экстерьер. Автомобиль унаследовал от Vesta и X-Ray фирменный X-образный стиль оформления, что сделало его визуально более привлекательным. Кроме того снизилось аэродинамическое сопротивление.
• Интерьер. Улучшилась вибрационная и звуковая изоляция кузова и моторного отсека, установлены более эргономичные сидения с регулировкой по высоте, осовременилась центральная консоль и органы управления (X-Style).
• Ходовая часть. Подверглась модернизации механическая и автоматическая трансмиссия, повысилась информативность рулевого управления, доработана подвеска. Появились новые режимы для движения в пробке и езды в зимних условиях.

Подведем итоги. Кому можно посоветовать купить LADA Granta универсал? Тем, кто хочет относительно компактный автомобиль, но при этом способный «взять на борт» габаритный длинномерный груз. По параметру эффективности утилизации свободного пространства универсал превосходит седаны и лифтбеки, а в сравнении с хэтчбеком выигрывает в полезном объеме.

Лада Гранта лифтбек отзывы владельцев

Каждый покупатель отечественного авто желает знать о том, насколько будет практичен транспорт в эксплуатации, и как долго он сможет прослужить без поломок.

Наиболее верным решением станет для Гранта лифтбек отзывы владельцев, которые уже оценили автомобиль и смогли выявить конкретные плюсы и минусы. Ознакомление с подобными аннотациями упростят выбор. Кроме того и покупатель будет заранее знать обо всех особенностях приобретаемого средства.

Положительные отзывы владельцев Лады лифтбек: что понравилось покупателям?

Больше всего порадовало водителей – наличие вместительного багажника. И действительно, размеры отделения в некоторых случаях превосходят показатели заграничных аналогов.

В обычном состоянии объем составляет 440 л, а при сложенных задних сидениях возрастает до 760 л. Таких данных вполне хватает для перевозки больших грузов. И даже, несмотря на небольшие внешние размеры, лифтбек довольно стойко переносит максимальную загруженность.

Привлекательный внешний вид – не менее распространенная причина покупки Гранты в данном кузове. Большинство покупателей предпочитают обычному седану сплоченный и стильный лифтбек.

При этом от скромных размеров авто не страдает ни внутреннее пространство, ни объем багажника, что особо важно при покупке семейного или рабочего автомобиля.

 

Возможность выбора наиболее подходящего оттенка из цветовой гаммы позволяет купить не просто качественный, но и оригинальный транспорт. Весьма популярны среди водителей оттенки Одиссей (серо-голубой) и Ледяной (светло-серый).

Для многих владельцев главным критерием покупки стала низкая стоимость. Даже в полной комплектации (Люкс версия) цена приемлема. В отличие от бюджетных иномарок Гранта лифтбек позволяет получить надежный транспорт по доступной стоимости.

Если переходить к расчетам, то недорогая иностранная машина с подобным оснащением дороже отечественной примерно в 1,5 раза (а то и в два, если не кривить душой). Не каждый водитель может позволить себе такое приобретение.

Незначительный расход топлива версии лифтбек также оценили в своих отзывах многие владельцы. В смешанном режиме примерный расход составляет не более 8 л (7,6-7,9). Что касается поездок по трассе, то потребность автомобиля уменьшается до 6,7-7 л на 100 км. Высокую оценку поставили за такую экономию водители, использующие Гранту в качестве транспорта для перевозок или межгородских доставок.

Довольно мощный двигатель позволил большинству покупателей остановиться именно на Гранте с новым кузовом. Показатели для седана и лифтбека идентичны, устанавливаемые двигатели также одинаковы. Но преимущество второго типа кузова в практичности и оригинальном виде. Большинство водителей приобрели модели с мощностью в 106 л.с., меньшая часть выбрала авто на 87 л.с.

Отзывы владельцев Гранты лифтбек: особые преимущества

Качественная оптика автомобиля покорила сердца многих владельцев. Хозяева Гранты отмечают хорошую освещенность дорожного полотна, что особенно важно для повышенной безопасности.

Нареканий на работу или сбои при сильных вибрациях не было выявлено. Стильные задние фары позволяют едущим сзади автомобилям издалека увидеть передвигающуюся Ладу.

Покупатели отечественных авто тщательно изучают и эксплуатационные характеристики, позволяющие приобрести действительно качественный транспорт. Для стильной и удобной Лада Гранта лифтбек отзывы владельцев коснулись высокого клиренса.

Просвет составляет 16 см, что достаточно много для такой юркой модели. Проехать по полному бездорожью, не повредив при этом днище автомобиля и не застрять в глубокой колее более чем реально. Кроме того важным плюсом такого клиренса является простота поездок в любое время и по любым площадкам.

Комфортабельность салона – еще один фактор поиска рабочей “лошадки”. Если учитывать использование транспорта в зимний период, то стоит уделить особое внимание печке. В Гранта Лада, по мнению водителей, стоит одна из самых лучших обогревательных систем. Она быстро проводит нагрев салона, поэтому переживать о длительном старте печки не стоит.

Также покупка Гранты лифтбек порадовала владельцев дешевым обслуживанием. В большинстве своем выходят из строя мелкие детали, которые не нуждаются в особых затратах. При этом проведение ремонта во время гарантийного периода выполняется не только за минимум времени, но и совершенно бесплатно.

Устанавливать можно не только оригинальные запчасти, но и некоторые элементы от прародителя – Лады Калины. Это значительно упрощает поиск нужного элемента.

Недостатки Гранты лифтбек из отзывов владельцев

Помимо преимуществ новой версии были выявлены и ее минусы. Например, сильные шумы в салоне, связанные как с некачественной изоляцией, так и с работой двигателя. В комплектации Люкс установлена надежная шумоизоляция, но и она не справляется с поставленной задачей полностью. Поэтому владельцы отметили некоторые неудобства при длительной езде, особенно в черте крупных городов.

Проблемы с лишними скрипами отметили лишь часть водителей. Касаются они стуков в водительской двери из-за плохой закрепленности обшивки. Задняя полочка в багажнике не стучит, а вот при запуске двигателя может дребезжать капот и появляться неприятный гул. При наборе скорости данное явление полностью исчезает (в этом случае нужно проверить обороты холостого хода. Возможно, они занижены).

Небольшое заднее стекло не позволяет в должной мере проводить осмотр дороги. Правда, данная особенность относится не только к Ладе Гранте лифтбек, а и большинству других авто в данном кузове. С проблемой вполне можно справиться, используя для обзора боковые зеркала. Также практичным решением станет установка камеры заднего вида.

Чересчур жесткая подвеска версии Люкс не позволяет полностью насладиться управлением. Неприятное явление исчезает только при перевозке грузов или пассажиров. Подобная проблема не коснулась комплектаций Стандарт и Норма, хотя на неровных дорогах они менее хорошо держатся пути. Замена подвески – очень дорогое решение, поэтому многие владельцы решили мириться с данным явлением.

Наличие довольно крупных зазоров отмечено лишь небольшой частью покупателей. Многие из них указывают на появление лишних звуков из-за подобного оснащения модели. Если же рассматривать проблему более детально, то не все модификации имеют совершенную сборку. И на данные нюансы стоит обратить особое внимание при покупке.

Второстепенные проблемы Лады Гранты лифтбек: отзывы владельцев о незначительных недостатках

К менее сложным проблемам владельцы отнесли те явления, которые не влияют на удобство управления и эксплуатации авто. В частности некоторые из них может решить и сам владелец. Подобные недостатки могут быть “врожденными”, но могут и выявляться со временем. В частности к незначительным минусам Гранты лифтбек можно отнести:

1. Некачественные динамики в версиях Стандарт и Норма (Люкс включает усовершенствованную медиа систему с хорошей передачей звука).

2. Жесткий пластик салона, на котором остаются царапины (при аккуратной эксплуатации вовсе не является проблемой).

3. Замерзающие дворники в зимние периоды (решением станет покупка специальных дворников с резиновыми чехлами).

4. Небольшие рычаги на руле (все зависит от владельца и его навыков управления Грантой, необходимо лишь приноровиться к работе с переключателями).

5. Отсутствие кондиционера (включен в модификацию Люкс и планируется к установке в версии Норма).

Все указанные недостатки являются мелочными и от них удобство эксплуатации авто ничуть не снижается. А для получения самой практичного и комфортабельного транспорта рекомендуется заранее обратить внимание на версию Люкс. Она стоит не намного дороже стандартной модели, но при этом включает все необходимое.

Многие автомобилисты люксовой модификации отметили в отзывах исключительно положительные впечатления от управления усовершенствованным авто и отсутствием неполадок и существенных проблем.

Вам также может быть интересно

плюсы и минусы после 2 лет эксплуатации

Lada Granta – это значимый автомобиль для АвтоВаз. Она была построена за достаточно короткие сроки, пусть и на уже имеющейся базе Калины. Существует много обзоров и тест-драйвов Гранты, но все они, как правило, посвящены общей оценке, но давайте разберёмся, что представляет этот автомобиль в эксплуатации. Так сказать, с учётом мнения владельцев.

Изначально создатели отнесли Гранту в класс B, то есть неплохой автомобиль за небольшие деньги. Но, как показывает время, авто переросло этот класс и стало для России уже нечто большее, с учётом всех комплектаций.

Лада Гранта спроектирована по принципу достаточности. Между тем в сравнении с Калиной здесь порядка 400 новых деталей.

Сравнение Гранты и Калины

Конструкторы старались оснастить это авто всем необходимым. Владельцы отмечают, что электроусилитель руля, который, кстати, есть даже в комплектации Норма, весь достойны. Да, он не идеальный, минусы есть, но рулится авто хорошо. Приятно удивляет в этой машине подвеска: она не является слишком комфортной, но она вполне себе обеспечивает баланс, который и позволяет чувствовать себя в машине комфортно. Владельцы, бывшие, Самар и Классики отмечают весьма ощутимые отличия в положительную сторону. Но всё таки среди всех достоинств отдельно хочется выделить двигатель. В сравнении с китайскими авто, соответственно той же ценовой категории, вряд ли найдётся конкурент, который с такой же заявленной мощностью так резко стартовал, так хорошо набирал бы обороты, иными словами – с такой же динамикой. Преимущество 8-ми клапанного мотора Гранты – это хороший крутящий момент на низах. Впрочем, это достоинство всех похожих силовых агрегатов. Передачи переключаются достаточно хорошо, избирательность достаточная, по крайней мере за те деньги за которые автомобиль предлагают. Но прикладывать усилия всё таки придётся, необходима чёткость в переключении, то есть водитель должен знать машину.

Теперь немного о минусах, выявленных в процессе эксплуатации. Первое – это руль. При его поворотах слышны какие-то шумы, напоминающие трения пластика о металл.

Второе – это то, что всё таки при активной езде машина достаточно шумная. В салон проникают звуки от двигателя и трансмиссии. Кстати, Гранта с АКПП, по мнению обладателей, гораздо тише, но и стоит она дороже. Третье – это тормоза. Хотя на Лада Гранта и установили вентилируемые передние дисковые тормоза, они всё равно кажутся недостаточными. Вероятно, следовало бы сделать их жёстче, чтобы педаль не было бы необходимости давить до самого упора. Четвёртое – управление. При прохождении поворотов на скорости чуть более высокой заметен снос передней оси на внешнюю сторону. Конечно, это не очень хорошо, а главное – следует помнить любителям активного, или даже агрессивного вождения.

Пятое – бортовая раскачка. Всё таки если работать рулём активно, к вопросу об агрессивном вождении, авто раскачивает заметно. Соответственно автомобиль рассчитан только на спокойное вождение.

Багажник. Вместительность Лада Гранта, действительно, неплохая. На практике легко можно уместить пять мешков и ещё немного коробок. Большой багажник обещают и производители, ведь это класс B, а значит авто не для развлечений, машина должна быть универсальной.

Интерьер. Он совершенно отличен от Лада Калина. Отдалённо напоминает Рено Логан первого поколения, как минимум – воздуховоды такие же. Пластик среднего качества, как показывает время, одинаков на панели приборов и на дверях. Приборная панель простая: спидометр, тахометр, посередине жидкокристаллический дисплей, но смотрится и читается хорошо, в показаниях приборов ошибиться трудно. Но показатель температуры двигателя отсутствует. А салоне предусмотрено много ёмкостей: ниши в боковых дверях, полочки, подстаканники спереди.

И всё таки при осмотре авто внимательно понимаешь за счёт чего удалось его так удешевить. Это гораздо меньшее использование числа деталей, цельная штамповка и прочее.

В общем авто даже после эксплуатации ведёт себя неплохо, но доводить его всё таки нужно.

Объяснение

раздутых ладов: все, что вам нужно знать

Если вы когда-нибудь видели гитару с веерными ладами и задавались вопросом, в чем их смысл, это руководство для вас.

Существует много дезинформации о преимуществах веерных ладов, поэтому я объясню, как они работают, каковы реальные преимущества и подходят ли они вам.

Раздутые лады или многомасштабные гитары располагают лады под рассчитанным углом, чтобы каждая струна имела разную длину шкалы.Раздутые лады придают гитарам большую длину гаммы на нижних струнах и меньшую длину гаммы на более высоких струнах.

Я объясню, что это означает ниже, но если вы хотите узнать больше о длине гитарной гаммы и почему это важно, прочтите мое полное руководство по длине гитарной гаммы здесь.

Знакомство с гитарой с веерными ладами

Прежде чем мы рассмотрим, как работают веерные лады, преимущества веерных ладов и многое другое, давайте рассмотрим некоторые ключевые факты о веерных ладах, чтобы вы могли понять, что они означают.

Измерительная гитара с веером

Обычные гитары измеряются по их длине шкалы, как описано здесь. Например, у Fender Stratocaster длина шкалы 25,5 дюйма, а у PRS — 25 дюймов.

Гитары с веерными ладами также измеряются по их длине шкалы, но нам даны два числа, потому что это гитар с разной шкалой.

Если вы ищете гитару с веерными ладами, вам дается длина шкалы для самой низкой и самой высокой струн.

Например, Ibanez RGIF8 — восьмиструнная гитара с веерными ладами, как показано ниже:

Длина шкалы на самой нижней струне составляет 27,2 дюйма , а длина шкалы на самой высокой струне составляет 25,5 дюйма .

Давайте сравним это со струной Strandberg Boden 8:

Длина шкалы на самой нижней струне Strandberg составляет 28 ″ , а длина шкалы на самой высокой струне составляет 26,5 ″ .

Хотя обе гитары 8-струнные и обе имеют веерные лады, вы заметите большую разницу в их ощущениях от игры. Я расскажу об этом позже в этом руководстве.

Нейтральное положение

Угол наклона веерных ладов также различается для разных гитар.

Взгляните на гриф Ibanez RGIF8 ниже и обратите внимание, что лады начинаются наклонно в одну сторону, а затем постепенно меняются, пока не станут наклонными в другую сторону:

Точка, в которой лады прямые, как у обычной гитары, называется нейтральной точкой .

На гитаре выше нейтральной точкой является 12-й лад.

Некоторые гитары с веерными ладами устанавливают нейтральный лад выше, а некоторые — ниже. На нижнем Strandberg нейтральная точка находится на 7-м ладу:

.

Сравните Ibanez и Strandberg, и вы заметите, что это изменение нейтральной точки сильно влияет на общее ощущение грифа.

На некоторых гитарах с веерным ладом нейтральная точка располагается по всей длине грифа у гайки, как это:

Все лады наклонены в одном и том же направлении, и угол постепенно становится более экстремальным по мере продвижения вверх по грифу.Вышеупомянутая гитара будет полностью отличаться от других гитар с веерными ладами, показанных ранее.

Я объясню это подробно позже, когда мы рассмотрим возможность игры.

Как работают веерные лады

Чтобы понять, как работают веерные лады, давайте сравним их с обычной гитарой с прямыми ладами.

Проблема с обычными гитарными ладами

На приведенной ниже фотографии обычной гитары с обычными ладами вы можете видеть, что длина струны от бриджа до гайки (узнайте о частях гитары и их названиях здесь) одинакова для каждой струны.

Проблема одинаковой длины для каждой струны состоит в том, что каждая струна настраивается по-разному. Струна низкой ми значительно ниже по высоте, чем струна высокой ми.

Это проблема из-за вибрации струн. Низкие ноты звучат лучше, когда они вибрируют на длинной струне. Вот почему у бас-гитары шейки длиннее, чем у обычных.

На фотографии выше видно, что длина струны у бас-гитары намного больше, чем у электрогитары.Это потому, что низкие ноты лучше всего звучат при большей длине струны.

Поскольку существует большая разница в том, на что настроены гитарные струны, это создает серьезную проблему.

Обычная гитара решает эту проблему за счет увеличения толщины струны.

Более толстые струны предохраняют нижние струны от расшатывания. Но это работает только до определенного момента. Раздутые лады помогают преодолеть это ограничение.

Как работают веерные лады

Раздутые лады позволяют удлинить нижние струны, а верхние — короткими.

Это означает, что длина нижней струны ми может быть больше, чем длина высокой струны ми, что помогает ноте звучать более отчетливо.

В случае с веерной гитарой для лада нижние струны не нуждаются в более толстых струнах, чтобы сохранять плотное натяжение. Более длинная струна помогает сохранять натяжение струны там, где вам удобнее всего играть.

Если вы посмотрите на 7- или 8-струнную гитару, станет очевидно, почему веерные лады так полезны:

Самая нижняя струна на 8-струнной гитаре имеет очень низкую высоту тона.Если вы попытаетесь настроить низкую струну ми ми на F #, вы заметите, что струна становится слабой и гибкой.

Более длинная струна на гитаре с веерными ладами сохранит эту струну красивой и плотной без необходимости использования струны сверхтяжелого калибра.

Основной урок: веерных ладов работают, придавая каждой струне оптимальную длину, соответствующую высоте струны. Низкие ноты лучше всего подходят для длинных струн.

Раздутые лады имеют значение

Раздутые лады действительно имеют значение по сравнению с обычными гитарами, но есть много дезинформации о том, как они имеют значение.

Суть в том, что веерные лады действительно имеют значение на гитаре. Раздутые лады влияют на натяжение струн, играбельность и тон. Вопреки распространенному мнению, интонация от них не зависит.

Давайте подробно рассмотрим, как веерные лады имеют значение, чтобы вы могли решить, подходят ли они вам.

Натяжение струны

Первое, что я заметил, когда впервые взял в руки веерную ладовую гитару, — это натяжение струн.

Раздутые лады влияют на натяжение струн, которое играет важную роль. Большое преимущество веерных ладов состоит в том, что они увеличивают натяжение нижних струн, не влияя на верхние.

Давайте посмотрим на примере, чтобы увидеть, насколько сильно веерные лады влияют на натяжение струн.

На обычной гитаре с длиной шкалы 25,5 дюймов натяжение на низкой струне E с 42 струнами будет 14,37 фунта.

На гитаре с веерными ладами и 26.При длине шкалы 5 дюймов натяжение нижней струны E с тем же калибром будет 15,52 фунта.

Если бы угол раскрытых ладов был более экстремальным и длина струны увеличилась до 27 дюймов, натяжение нижней струны ми было бы 16,11 фунта.

Как видите, небольшая разница, которую вносит веерный лад, может значительно изменить натяжение струны.

Это означает, что вы получите более тугие нижние струны без увеличения натяжения верхних струн.

Чем резче звучат веерные лады, тем выше натяжение нижних струн.

Тон

Раздутые лады имеют различный тон из-за дополнительной длины струны на нижних струнах.

Более низкие струны кажутся более тугими, что явно отражается на тембре гитары. Если вы настроитесь ниже, вы услышите более резкий и плотный звук при исполнении риффов.

Общие ощущения и играбельность

Лады с веером выглядят совсем иначе, чем обычные гитары, но вы можете быть удивлены, узнав, что они не так сильно отличаются.

Общее ощущение от гитары с веерными ладами зависит от того, насколько сильно веер (разница в длине шкалы между самой низкой и самой высокой струнами).

Чем сильнее веер, тем больше вы его замечаете, когда играете аккорды или переходите от струны к струне.

Представьте, что вы играете барре-аккорд на гитарах ниже, и подумайте о положении вашей руки:

Вы можете подумать, что экстремальный фанат сделает игру барре-аккордами неудобной, но многие гитары предпочитают то, как это ощущается.В зависимости от угла наклона веера вы можете обнаружить, что барре-аккорды более удобны для всего грифа.

Ключевым моментом для играбельности является нейтральная точка . Как объяснялось ранее, это точка, в которой лад прямой, как на обычной гитаре.

Гитара ниже устанавливает нейтральную точку по направлению к гайке:

Это означает, что все лады наклонены в одном направлении. По мере того, как вы поднимаетесь вверх по грифу, угол становится более экстремальным.

Вышеупомянутая гитара будет полностью отличаться от гитары ниже, у которой есть нейтральная точка на 12-м ладу:

С этой гитарой игра на грифе выше ощущений будет совершенно другой, чем игра на грифе ниже.

Главное, что нужно помнить, это то, что способ установки веерной ладовой гитары (где установлена ​​нейтральная точка) играет большую роль в том, как гитара чувствует себя при игре.

Низкие настройки

Как объяснялось ранее, ноты с низким тоном лучше всего подходят для длинных струн.Вот почему 8- и 9-струнные гитары часто поставляются с веерными ладами в стандартной комплектации.

Но если вы настроитесь на 6-струнную гитару, вы обнаружите, что веерные лады имеют большое значение в играбельности.

Настройка на что-то вроде Drop-C или ниже на 6-струнной гитаре обычно требует довольно толстых струн для компенсации низких частот. Вы также получаете ужасно мутный тон, который звучит безжизненно.

Но гитара с веерными ладами позволит вам использовать более легкие струны, сохраняя натяжение струн даже на всех шести струнах.

Раздутые лады не только улучшают играбельность низких строев, но и серьезно улучшают тон.

Интонация

Многие говорят, что гитары с веерным ладом дают лучшую интонацию. Это не совсем так, давайте рассмотрим это поближе.

Интонация — это то, насколько настроен каждый лад на струне. Если ваша интонация отсутствует, ваша открытая струна будет звучать нормально, но когда вы взорвете ноту, она исчезнет.

Чем длиннее гамма гитары, тем лучше интонация гитары.

Это означает, что гитара с длиной шкалы 27 дюймов будет иметь немного лучшую интонацию, чем гитара с длиной шкалы 25 дюймов.

Тот факт, что у гитар с веерным ладом большая длина лада на нижних струнах, является причиной того, что многие гитаристы считают, что интонация улучшается благодаря веерным ладам.

Хотя технически это правда, это всего лишь незначительное изменение и только на нижних струнах. У более высоких струн будет такая же интонация, как у обычной гитары с той же длиной звукоряда.

Если вам действительно нужна гитара с отличной интонацией, узнайте об True Temperament Frets здесь. В руководстве очень подробно рассказывается об интонации и о том, почему у всех нормальных гитар плохая интонация.

Трудно играть на веерных ладах

Хотя веерные лады выглядят неудобно, играть на них несложно. Многие гитаристы на самом деле предпочитают играть на гитарных гитарах с веерными ладами из-за того, что угол ладов естественным образом повторяет угол ваших пальцев на грифе.

Давайте посмотрим, как ощущаются веерные лады, когда вы играете разные вещи:

Низкие рифы

Играете ли вы на 6-, 7- или 8-струнной гитаре, веерные лады создают более низкие риффы и улучшают настроение.

Более высокое натяжение струны означает, что вы получаете плотный и напористый тон, который отлично подходит для игры быстрых или плотных риффов.

Как вариант, вы можете уменьшить толщину струны на нижних струнах, чтобы вам было удобнее.

В целом, низкие риффы имеют тенденцию ощущаться более комфортно на гитаре с веерным ладом.

Аккорды

Открытые аккорды могут ощущаться лучше или хуже на веерной ладовой гитаре в зависимости от того, где находится нейтральная точка.

Взгляните на гитары ниже и представьте, что вы играете разные открытые аккорды:

Должно быть очевидно, что каждый будет чувствовать себя совершенно по-другому, и некоторым будет удобнее, чем другим.

Аккорды

Barre обычно более удобны на веерных ладах, но это опять же зависит от того, где находится нейтральная точка.

На некоторых гитарах с веерным ладом ваш первый палец имеет тенденцию идеально выстраиваться в линию, где бы вы ни играли барре-аккорд.

Изгибы и вибрато

Благодаря более короткой длине звукоряда на высоких струнах, бенды и вибрато, как правило, более комфортны на гитаре с веерными ладами по сравнению с обычной гитарой.

Это зависит от используемой длины звукоряда, но большим преимуществом веерных ладов является то, что нижние струны кажутся более тугими, в то время как более высокие струны более удобны при игре на бенд.

Играть бенды на обычной 8-струнной гитаре с длиной шкалы 27 дюймов невероятно неудобно из-за сильного натяжения всех струн. Но играть бенды на 8-струнной гитаре с веерными ладами смехотворно удобно на более высоких струнах из-за меньшей длины звукоряда.

Приглушение ладони

Насколько комфортно звучит приглушение звука ладони, зависит от того, где установлена ​​нейтральная точка.

Нейтральная точка изменит угол наклона моста, что влияет на комфорт приглушения звука ладонью.

Посмотрите на нижний бридж на веерной гитаре и подумайте, как бы вы положили ладонь на струны:

В зависимости от положения рук, на некоторых гитарах с веерными ладами играть более комфортно, а на некоторых — хуже. Угол наклона моста зависит от положения нейтральной точки.

Раздутые лады Плюсы и минусы

Вот несколько плюсов и минусов, которые помогут вам решить, подходят ли вам веерные лады.

Плюсы с раздутым ладом

• Серьезно улучшает 7-, 8- и 9-струнные гитары
• Повышенный комфорт и удобство игры для некоторых гитаристов
• Лучшее натяжение струн для низких строев при сохранении комфорта на высоких струнах

Раздутый лад, против

• Каждая веерная гитара отличается из-за разных нейтральных точек
• Вам нужно найти гитару с правильной длиной звукоряда и нейтральной точкой в ​​соответствии с вашими предпочтениями
• Ограниченные преимущества для 6-струнных гитар
• Меньше вариантов звукоснимателей и мостов

Раздутые лады того стоят

Раздутые лады того стоят, если вы играете в низких строчках или хотите гитару с расширенным диапазоном.Семиструнная или восьмиструнная гитара звучит значительно лучше с веерными ладами.

Если вы играете на шестиструнной гитаре в стандартной настройке, преимущества веерных ладов незначительны, и, возможно, они того не стоят.

Хотя обычные ладовые гитары несовершенны, ограничения на шестиструнной гитаре при стандартной настройке не очень заметны. Натяжение струн довольно равномерное.

Но если бы вы попробовали сыграть на 8-струнной гитаре с длиной шкалы 25,5 дюймов, это звучало бы как мусор и было бы ужасно играть.Раздутые лады значительно улучшили бы тон и играбельность гитары.

Чем больше вы отходите от стандартного строя, тем более веерные лады того стоят.

Раздутые лады на разных гитарах

Давайте посмотрим, как выглядят веерные лады, и поработаем с разными типами гитар, чтобы понять, подходит ли вам одна из них.

Прочтите это руководство, чтобы узнать о различных типах гитар, которые вы можете купить. В руководстве объясняются различия между разными типами гитар, какие стили музыки вы можете играть на каждом типе и подходят ли они для начинающих.Как вы увидите ниже, веерные лады становятся очень распространенными для разных типов гитар.

6-струнная гитара

Преимущества веерных ладов на шестиструнных гитарах ограничены. Если вы возьмете шестиструнную гитару с веерными ладами, вы можете любить / ненавидеть разницу, или вы можете даже не заметить ее.

Когда я играл на шестиструнной гитаре с веерными ладами, я заметил разницу, но не подумал, что это явное улучшение по сравнению с обычной гитарой.

Единственный раз, когда я чувствую, что веерные лады действительно имеют значение для 6-струнных гитар, это когда вы используете дроп-строй.

7-, 8- и 9-струнные гитары

Раздутые лады могут серьезно улучшить играбельность и тон гитары с расширенным диапазоном.

Когда я впервые сыграл на семиструнной партии с веерными ладами, я был поражен тем, насколько лучше она звучит и ощущается. Низкие струны были красивыми и тугими, в то время как изгибы были до смешного удобны на высоких струнах.

Когда я попробовал 8-струнную с веерными ладами, а затем напрямую сравнил ее с обычными 8-струнными, я не мог не посмеяться над тем, насколько лучше ощущаются веерные лады.

Если вы играете на гитарах с расширенным диапазоном, я настоятельно рекомендую вам попробовать веерную ладовую гитару, чтобы понять, о чем идет речь.

Бас

Раздутые лады на басу имеют те же преимущества, что и на гитарах.

Необходимо учитывать те же моменты, например, насколько сильно вентилятор и где находится нейтральная точка.

Если вы играете на 5-струнной бас-гитаре, вы, вероятно, заметите большую разницу в том, как веер меняет тон и ощущения от того, что вы играете.

Акустическая гитара

В то время как веерные лады довольно часто встречаются на электрогитарах, они все еще редко встречаются на акустических гитарах.

Вероятно, это связано с тем, что акустические гитаристы с меньшей вероятностью увидят преимущества веерных ладов из-за своего другого стиля игры.

Например, акустические гитаристы вряд ли будут использовать дроп-строй для металлических риффов, поэтому они не получат тех преимуществ, которые предлагают веерные лады.

Хотя веерные акустические гитары существуют, они имеют очень ограниченную привлекательность.

Если вы ищете акустическую гитару с веером, приготовьтесь заплатить за нее серьезную цену за очень ограниченные преимущества.

Раздутые лады FAQ

Вот некоторые общие вопросы, не рассмотренные выше, о веерных ладах.

Что делает Zero Fret?

На некоторых гитарах с веером вы можете заметить лад рядом с гайкой, как показано ниже. Это называется нулевым ладом.

Нулевой лад — это лад, расположенный рядом с гайкой, чтобы удерживать струны в нужном положении.Вместо того, чтобы прижимать струны к гайке, они упираются в лад.

Нулевые лады могут улучшить интонацию и действие, поскольку струны находятся в самом нижнем положении.

Как и любую другую функцию на гитаре, некоторые гитаристы любят их, а некоторые не переносят.

Узнайте, почему так важно действие, как его измерить и отрегулировать на акустической или электрической гитаре в этом полном руководстве по игре на гитаре.

Истинный темперамент и веерные лады

Лады True Temperament полностью отличаются от ладов с веером и другими целями.

Цель ладов True Temperament — исправить интонационные проблемы, возникающие при использовании прямых ладов. Цель веерных ладов — изменить длину звукоряда на каждой струне.

Чтобы понять, что такое лады True Temperament и почему они так хорошо работают, прочтите мое руководство здесь.

Сопутствующие руководства и уроки:

FRET и дрожжевые двухгибридные системы по сравнению

Флуоресцентный резонансный перенос энергии (FRET) — это метод, при котором две светочувствительные молекулы передают энергию от молекулы-донора к молекуле-акцептору.В результате молекула-акцептор излучает флуоресцентный сигнал, который затем может быть обнаружен.

Кредит: Калеб Фостер / Shutterstock.com

FRET имеет множество применений в биологии. Он широко используется при изучении кинетики ферментативных реакций и в качестве системы обнаружения в ферментных анализах. Он также использовался для изучения белок-белковых взаимодействий.

Описание белок-белковых взаимодействий в живых клетках дает представление об общей системе организма.Дрожжевая двугибридная (Y2H) система, первоначально разработанная в 1989 году, представляет собой традиционный метод изучения белок-белковых взаимодействий.

Методология двугибридных дрожжей (Y2H)

Метод Y2H основан на взаимодействии белков в дрожжах. Белки в системе обозначаются как приманка и добыча. Взаимодействие между двумя белками активирует репортерные гены, которые обеспечивают рост на определенной среде или изменение цвета.

Системы

Y2H были автоматизированы для высокопроизводительных исследований.Они намного превосходят возможности более ранних интерактивных экранов, которые не могут обнаруживать взаимодействия in vivo.

Использование анализов Y2H было особенно использовано для создания первой крупномасштабной сети взаимодействия белков в дрожжах. Подобные исследования проводились и на других организмах.

Однако анализы Y2H имеют высокий уровень ложноположительных результатов, что затрудняет интерпретацию данных. В некоторых исследованиях количество ложных срабатываний превышало 50 процентов. Y2H также не очень хорошо подходит для захвата динамики белковых сетей в реальном времени.

В качестве альтернативы FRET был адаптирован для исследований взаимодействия белков. Для этих исследований флуоресцентные белки, которые демонстрируют FRET, генетически кодируются в организме хозяина. Эти взаимодействия затем можно обнаружить в различных типах клеток.

Использование FRET для исследований взаимодействия белков устраняет некоторые недостатки старого метода Y2H, такие как ложные срабатывания.

Белковые интерактомы

Все сети взаимодействия белков в организме известны как интерактом.Понимание интерактома имеет решающее значение для определения путей и поиска эффективных методов лечения заболеваний.

Изучение целого интерактома требует более сложных методов, чем изучение взаимодействия отдельных белков. Y2H выгоден для этого, поскольку он прост, надежен и экономичен. Его можно использовать в крупномасштабном скрининге, а также в небольших исследованиях взаимодействия белков. Также может быть проведено in vivo .

Однако использование дрожжей в качестве хозяина означает, что взаимодействия с другими организмами могут быть не обнаружены.Это может быть связано с плохой экспрессией или несоответствием посттрансляционной модификации, или отсутствием факторов связывания.

Оба белка должны иметь доступ к ядру, поэтому белки, такие как мембраносвязанные белки, которые не могут свободно проникать в ядро, не могут быть изучены должным образом.

Избыточная экспрессия белков в системах Y2H может приводить к неспецифическим взаимодействиям и высокому уровню ложноположительных результатов. Косвенное считывание — еще один недостаток метода.

FRET имеет ряд преимуществ для исследований на основе интерактомов.Его способность отслеживать белок-белковые взаимодействия в режиме реального времени позволяет измерять даже самые кратковременные взаимодействия.

Он также может использоваться в живых клетках и позволяет идентифицировать сайты взаимодействия. Поскольку взаимодействия флуорофоров обратимы, можно отслеживать сложную динамику взаимодействия, такую ​​как динамика равновесия.

Ограничение FRET состоит в том, что соответствующие флуорофоры должны быть слиты с белками. Для надежного считывания требуется близкая пространственная близость флуорофоров для передачи энергии.

FRET также имеет более низкую чувствительность по сравнению с некоторыми другими методами, основанными на флуоресценции, из-за фоновой автофлуоресценции. Таким образом, необходимы контрольные эксперименты для количественной оценки интенсивности флуоресценции.

FRET — Передача энергии резонанса флуоресценции — Д-р Отон Жервазио — Научная 3D-анимация Воспроизвести

Процесс FRET, основанный на клетках, трансфицированных плазмидами, кодирующими белки с флуоресцентными метками. CFP и YFP используются в качестве донора и акцептора соответственно.Кредит: leogervasio / Youtube.com

Дополнительная литература

Улучшенный вариант голубого флуоресцентного белка, полезный для FRET — Research Profiles в Медицинской школе Вашингтонского университета

TY — JOUR

T1 — Улучшенный вариант голубого флуоресцентного белка, полезный для FRET

AU — Rizzo, Mark A.

AU — Springer, Gerald H.

AU — Гранада, Бутч

AU — Piston, David W.

N1 — Информация о финансировании: Мы благодарим А.Риццо за полезные советы. Финансирование этой работы было предоставлено грантами Национального института здравоохранения США DK60275 (MAR), DK53434 и CA86283 (оба для DWP), грантом BBI-9871063 (DWP) Национального научного фонда США и бесплатными медицинскими услугами Министерства обороны США. Грант программы «Электронный лазер» F49620-01-1-0429 (DWP).

PY — 2004/4

Y1 — 2004/4

N2 — Многие генетически закодированные биосенсоры используют резонансный перенос энергии Ферстера (FRET) между флуоресцентными белками для определения биохимических явлений в живых клетках.Чаще всего в качестве донорного флуорофора используется усиленный голубой флуоресцентный белок (ECFP) в сочетании с одним из нескольких вариантов желтого флуоресцентного белка (YFP) в качестве акцептора. ECFP используется, несмотря на несколько спектроскопических недостатков, а именно низкий квантовый выход, низкий коэффициент экстинкции и время жизни флуоресценции, которое лучше всего соответствует двойной экспоненте. Чтобы улучшить характеристики ECFP для измерений FRET, мы использовали подход сайт-направленного мутагенеза, чтобы преодолеть эти недостатки.Получившийся вариант, который мы назвали Cerulean (ECFP / S72A / Y145A / h248D), имеет значительно улучшенный квантовый выход, более высокий коэффициент экстинкции и время жизни флуоресценции, которое лучше всего соответствует одной экспоненте. Cerulean в 2,5 раза ярче, чем ECFP, и замена ECFP на Cerulean существенно улучшает отношение сигнал / шум датчика активации глюкокиназы на основе FRET.

AB — Многие генетически закодированные биосенсоры используют резонансный перенос энергии Ферстера (FRET) между флуоресцентными белками для определения биохимических явлений в живых клетках.Чаще всего в качестве донорного флуорофора используется усиленный голубой флуоресцентный белок (ECFP) в сочетании с одним из нескольких вариантов желтого флуоресцентного белка (YFP) в качестве акцептора. ECFP используется, несмотря на несколько спектроскопических недостатков, а именно низкий квантовый выход, низкий коэффициент экстинкции и время жизни флуоресценции, которое лучше всего соответствует двойной экспоненте. Чтобы улучшить характеристики ECFP для измерений FRET, мы использовали подход сайт-направленного мутагенеза, чтобы преодолеть эти недостатки.Получившийся вариант, который мы назвали Cerulean (ECFP / S72A / Y145A / h248D), имеет значительно улучшенный квантовый выход, более высокий коэффициент экстинкции и время жизни флуоресценции, которое лучше всего соответствует одной экспоненте. Cerulean в 2,5 раза ярче, чем ECFP, и замена ECFP на Cerulean существенно улучшает отношение сигнал / шум датчика активации глюкокиназы на основе FRET.

UR — http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=1842424983&partnerID=8YFLogxK

U2 — 10.1038 / nbt945

DO — 10.1038 / nbt945

M3 — Артикул

C2 — 149

AN — SCOPUS: 1842424983

VL — 22

SP — 445

EP — 445

EP — 445 JF — Nature Biotechnology

SN — 1087-0156

IS — 4

ER —

Стоит ли вам покупать 5-струнный бас? Вот плюсы и минусы

Несмотря на наличие всего лишь дополнительной струны, кажется, что 5-струнный бас окружен множеством загадок.У новичков, как правило, возникает много вопросов о том, стоит ли им брать в руки одну, даже если они немного поиграли с 4-струнным. В этой статье я попытаюсь ответить на некоторые из наиболее часто задаваемых вопросов о 5-струнных бас-гитарах, рассказав об их плюсах и минусах.

Преимущества использования 5-струнной бас-гитары

Я думаю, что всегда хорошо начинать с положительных сторон инструмента; в любом случае преимуществ больше, чем недостатков. Я лично большой поклонник 5-струнной бас-гитары, но я постараюсь быть максимально объективным в этой статье, даже когда мы перейдем к минусам.

Одна из самых больших проблем по поводу пятиструнного баса, который есть у людей, заключается в том, усложнит ли новая струна из-за дополнительных нот.

В большинстве случаев вы получаете только пять дополнительных нот, если у вас стандартная настройка и вы используете 5-ю струну в качестве нижней си. Есть люди, которые используют дополнительную доступность строки для высокой C.

На самом деле вы получаете меньше нот, если используете струну с высоким C, потому что у большинства басов нет 24-го лада.В конце концов, я думаю, что использование high-C лучше для удобства и отсутствия необходимости делать более широкие растяжки, тогда как low-B дает вам доступ к более низким тонам, которые вы не можете достичь без настройки на стандартном 4. -нить.

Расширенный диапазон, обеспечиваемый струной low-B, на сегодняшний день является наиболее популярным способом использования 5-струнного баса, а дополнительные низкие ноты очень важны для определенных типов музыки. Например, в современной тяжелой музыке используются самые низкие струны, особенно в тех, которые издают открытую ноту B

. Это также может дать вам дополнительный аккордовый тон, который вы не смогли бы иметь на 4-струнном бас-гитаре. .Тем не менее, это преимущество может также относиться и к высокому содержанию углерода. Кроме того, вам может быть легче транспонировать и играть в рамках определенных ключевых сигнатур, имея те низкие ноты, которых у вас не было раньше.

Тем не менее, вы должны рассчитывать на некоторое время, чтобы узнать, где и что это за заметки, но если вы уже хорошо разбираетесь в своей игре, это будет совсем не сложно, и это может принести вам только пользу. долгий пробег. Знание того, где находятся ноты на грифе, также иногда может избавить вас от необходимости вообще настраиваться, даже если это сделал ваш гитарист.

2. Общая настройка инструмента не меняется

Независимо от того, используете ли вы 5-струнный бас для low-B или high-C, нет никаких изменений в настройке, если вы переход на пятиструнный бас с четырехструнного.

Четыре струны, которые были там с самого начала, по-прежнему являются E, A, D, G , если, конечно, вы не используете альтернативные строчки, но поскольку настройка этих основных струн остается прежней, переход к Пятиструнный бас намного более цельный, чем вы могли подумать изначально.

Итак, если вы выберете обычный low-B, ваш 5-струнный бас будет настроен как B, E, A, D, G, , а тот, который использует струну high-C, будет настроен как E, A, D, G, C.

Неплохо, правда?

Единственное, о чем вы никогда не должны помнить, — это небольшая горстка новых нот, которые вы получите с дополнительной строкой. Даже при использовании 5-струнной бас-гитары вы можете обнаружить, что используете эти ноты только в избранных ситуациях, но по-прежнему полагаетесь по большей части на четыре исходные струны, так что это всегда должно держать вас в курсе.

3. Появились новые возможности настройки, которых у вас не было до

Даже несмотря на то, что настройку не нужно менять при переходе на 5-струнный бас, это не означает, что вы можете Не пользуюсь разными настройками.

Фактически, 5-струнный бас открывает множество возможностей в этом отношении.

Например, если вы играете в группе, которая использует риффы drop-A, это было бы невозможно без 5-струнного баса. Ну, это так, но это не очень хорошая идея.

Если вы опустили струну E на 4-струнном бас-гитаре полностью вниз до A, это будет на 3 с половиной шага вниз! Это безумие!

При этом ваша E-струна, вероятно, выйдет из-под контроля и повсюду будет хлопать, не говоря уже о том, что она будет издавать ужасный звук.

Если вы планируете играть песни в этих низких строчках, просто возьмите 5-струнный бас; вы будете благодарить себя и в процессе звучать намного лучше. Это того стоит.

4. Вы можете использовать нижнюю струну в качестве якоря или упора для большого пальца

Одно из моих любимых преимуществ использования 5-струнной бас-гитары — это возможность поместить свой большой палец на струну нижнего си.

Хотя размещение большого пальца на звукоснимателе вполне допустимо, особенно если вы используете 4-струнный бас, переход от E к A кажется немного шатким, потому что расстояние между этими двумя струнами отличается при переходе от Например, от А до D.

Для меня это всегда создавало некоторую «задержку» при игре в очень быстром темпе, например, триоли при 180 ударов в минуту, и даже небольшое дополнительное расстояние между звукоснимателем и струной делало вещи не такими плавными, как у меня. предпочитаю.

Возможно, вы уже сталкивались с этой проблемой раньше.

Однако с помощью 5-струнного баса это можно полностью исправить, и вы можете более комфортно играть на этих быстрых линиях и перекрестных струнах с E-струны.

Конечно, вы столкнетесь с той же проблемой, если будете играть быстрые вещи из low-B, но в большинстве песен, которые вы играете, используется E-струна, я думаю, вы можете извлечь выгоду из 5-струнной бас-гитары, просто за возможности крепления.

5.Струны не разнесены так далеко друг от друга (большую часть времени)

Хотя есть некоторые исключения из этого правила, в целом, струны на большинстве 5-струнных басов расположены ближе друг к другу, чем на 4-струнных.

Я думаю, что это хороший перк, потому что он делает скрещивание струн немного проще, чем на 4-струнной бас-гитаре, особенно если я играю на быстрой гамме или заполнении. Это позволяет мне работать немного плавнее и быстрее, потому что моим пальцам не нужно перемещаться так далеко — это связано с экономией движения, что также применимо к игре на гитаре.

При пикировании вы хотите избежать излишнего напряжения и движения и постарайтесь сделать расстояние между точкой A и точкой B короче, потому что это увеличит скорость и эффективность, и это может быть абсолютно применимо и к fingerstyle; тем не менее, это вопрос технических возможностей и контроля и не имеет отношения к конструкции прибора.

Даже играя на 5-струнной бас-гитаре, вы все равно захотите помнить об этих вещах, но более близкое расстояние может облегчить вам задачу, точно так же, как некоторые гитарные грифы «быстрее», чем другие. тоньше, что помогает повысить комфорт, удобство игры и, следовательно, скорость.

6. Он готовит вас к будущим возможностям

5-струнный бас — это не экзотический инструмент; на самом деле он существует уже несколько десятилетий и приобрел популярность, потому что начал часто использоваться синтезированный бас.

Чтобы избежать замены клавишными, люди начали использовать 5-струнные басы, потому что они давали им ноты, которые использовали синтезаторы.

Если вы начнете выступать с другими музыкантами, я могу почти гарантировать (если вы не создадите свою собственную группу), что вы столкнетесь с ситуацией, когда вам придется играть их музыку, требующую использования струны low-B.

Привыкнув к 5-струнной бас-гитаре, вы будете очень подготовлены и откроете двери для новых возможностей. Вы же не хотите проигрывать на концертах из-за того, что вам неудобно играть на 5-струнной.

Вместо этого вы должны стремиться быть басистом, с которым все хотят играть, и 5-струнный бас никогда не должен быть вашим ограничивающим фактором. Это не то же самое, что играть на безладовом басу, для знакомства с которым потребуется гораздо больше усилий.

Недостатки использования 5-струнной бас-гитары

Даже если 5-струнная бас-гитара проще, чем вы думали, есть еще несколько дополнительных соображений, которые вам следует сделать.В целом, я не верю, что это те вещи, которые действительно могут помешать человеческому решению получить такую; скорее, эти минусы использования 5-струнной бас-гитары — лишь некоторые «неприятности», о которых вам следует знать. К счастью, некоторые из них на самом деле находятся под вашим контролем и не будут проблемой навсегда.

1. Нежелательный шум струны

Когда вы впервые начинаете играть на 5-струнной бас-гитаре, очень высока вероятность того, что у вас могут возникнуть небольшие проблемы с настройкой ощущений от инструмента (которые будут подробно описаны ниже). в следующем разделе).

Например, вы можете привыкнуть к старому интервалу на своем 4-струнном бас-гитаре, поэтому есть вероятность, что ваши руки могут быть расположены по-другому, из-за чего вы случайно ударите не ту вещь, будь то лад или область, которая вы щипаете или ковыряете.

Многие из этих дополнительных звуков можно исправить, просто потратив больше времени на инструмент и адаптируясь к нему, но также можно обратить внимание на свою технику.

Техника «плавающего большого пальца» или подвижного якоря для правой руки может предотвратить выпадение некоторых из этих дополнительных струн; сторона большого пальца отлично подходит для мутера, поскольку она поднимает и опускает струны во время игры.Это просто приходит с практикой, но я считаю, что это не так уж сложно реализовать. Он также очень эргономичен, и вам не придется наклоняться, чтобы дотянуться до высоких нот.

Вы также можете использовать накладку на басу для шумов, которые невозможно контролировать с помощью вашей техники. Многие профессионалы используют их, и они могут быть эффективным способом получить максимально чистый звук ваших басов.

На самом деле, дополнительный шум может возникать и с 4-струнным басом, но вам просто нужно быть особенно осторожным, если вы приобретете 5-струнный бас.

2. Он тяжелее (по весу)

В среднем, 5-струнные бас-гитары обычно весят больше, чем их 4-струнные аналоги, что может занять некоторое время, чтобы привыкнуть.

Для размещения дополнительной струны вашему басу необходимо больше дерева на корпусе и грифе, а в некоторых случаях на грифе, чтобы на него можно было установить дополнительный колышек.

Вся эта лишняя древесина складывается, и может быть значительная разница в весе по сравнению с вашим 4-струнным бас-гитарой, и надевание ее впервые может быть несколько неожиданным.Тем не менее, они по-прежнему должны быть играбельными, и дискомфорт от использования одного из них должен пройти довольно быстро.

С другой стороны, больше дерева означает больше звука, и ваш 5-струнный бас, вероятно, будет тяжелее с точки зрения веса, но также и звука. Тип дерева, который используется в инструменте, конечно, влияет на звук, но некоторые люди часто забывают, что просто наличие большего куска дерева тоже может.

Таким образом, здесь есть довольно равномерный компромисс, но в конечном итоге дополнительный вес на басу, который способствует более мощному звучанию, должен того стоить.

3. Дополнительная струна требует небольшого обслуживания

Одним из преимуществ игры на басу является то, что они требуют гораздо меньшего обслуживания, чем гитара. Вы можете месяцами не менять струны на басу, но на гитаре рекомендуется делать это каждые несколько недель или около того, потому что они становятся грязными намного быстрее.

Даже старые струны на басу могут быть приемлемы в определенных сценариях, потому что они создают определенный тип тона, а некоторым людям не нравится сверхъяркий звук и лязгание свежих струн, которые на самом деле могут длиться довольно долго.

Мне лично нравится где-то посередине, но пока ваши струны не выглядят неприятно и не издают мертвый тон, все должно быть хорошо.

Тем не менее, вам придется время от времени менять свои струны, и если вам не понравилось это на вашей 4-струнной, вы, вероятно, обнаружите, что наличие 5-й струны только усложняет задачу.

Некоторые люди не возражают против этого, потому что это не то, чем они должны заниматься все время, как гитаристы.

В любом случае, люди обычно не с нетерпением ждут дополнительной работы, поэтому я считаю это одним из недостатков 5-струнной бас-гитары.

4. Вероятно, это будет неудобно (сначала!)

Если вы задумывались о приобретении 5-струнной бас-гитары, вы, возможно, уже думали о том, как звучит гриф у одной из них, и беспокоились о том, будет ли это хорошо себя чувствуешь в руках.

Поскольку у вас есть дополнительная струна, гриф должен быть шире, чтобы для нее оставалось место, и, естественно, это, скорее всего, будет немного странно, если вы возьмете струну в первый раз.

Чтобы привыкнуть к 5-струнному грифу, нужно время, но не так много времени, как вы думаете.Просто практикуйтесь, как обычно, и в конечном итоге это больше не будет иметь большого значения.

Кто знает, через некоторое время вернуться и сыграть на 4-струнной игре может показаться странным! Это то, что случилось со мной после того, как я играл на своей 5-струнной исключительно около недели.

Если вы решили приобрести такую, просто ожидайте, что вам, возможно, придется адаптироваться к ощущениям от новой шеи, и, что важно, не сдавайтесь! Все басисты, которые начали использовать 5-струнную музыку, должны были пройти через тот же процесс.

Если это что-то, что вас беспокоит, вы также можете рассмотреть бренд, который известен более тонкими шейками на своих инструментах и ​​довольно легким весом.Ibanez — хороший пример, и я рекомендую их басы серии SR, подобные этой, на Amazon, потому что я считаю их удобными для игры, и вы, вероятно, тоже. Я нашел видеообзор той же модели, только в другом цвете, но вы можете услышать, как она звучит, а также лучше понять, насколько тонок гриф для стандартов с 5 струнами.

Заключительные мысли и выводы

Если вы задумывались над вопросом: «Следует ли мне взять 5-струнный бас?» На какое-то время я надеюсь, что эта статья дала вам некоторое представление о том, подходит ли вам эта покупка.

Некоторые люди беспокоятся, получат ли они от них достаточно пользы, а другие задаются вопросом: «А на 5-струнной бас-гитаре сложнее играть?» но на самом деле они никогда не доходят до того, чтобы разобраться в некоторых из этих вещей самостоятельно, и в конечном итоге упускают отличный инструмент.

Итак, 5-струнный бас сложен?

Нет. Не совсем.

Как я уже упоминал ранее, сначала играть может быть неудобно, но это не займет много времени, чтобы приспособиться. На самом деле, я даже не отговариваю новичков получить его.Я думаю, что, начав с 5-струнной бас-гитары, некоторые из этих минусов можно обойти, потому что они действительно не знают ничего лучшего и не имеют отношения к 4-струнной бас-гитаре и ее ощущениям.

Я действительно хочу отметить, что считаю неправильным думать о 4-, 5- и 6-струнных басах как о показателе уровня навыков человека, и они не используются для оценки прогресса. Например, 4-струнные басы не для новичков, и это не «ритуал перехода», чтобы перейти на 5 или 6-струнный бас по мере того, как вы продолжаете совершенствоваться.

Большинство великих музыкантов использовали 4-струнные на протяжении всей своей карьеры, даже не прикасаясь к 6-струнным, потому что они им не нужны.

Тем не менее, к ним часто переходят либо из любопытства, либо из-за потребности в преимуществах, которые они предоставляют.

Итак, я бы не стал беспокоиться о том, что еще рано играть на 5-струнной бас-гитаре, если это вас интересует, я говорю: дерзайте. Возможно, вы поймете, что приняли одно из лучших музыкальных решений в своей жизни — 5 струн могут многое предложить, и вам просто нужно воспользоваться этими замечательными инструментами.

Эй, я Майк! Будучи гитаристом более 15 лет, я решил объединить мою страсть к музыке, сочинительству и преподаванию в одном месте — GuitarMeet. Я люблю говорить о музыкальном оборудовании и делиться своими знаниями с другими. Я ценю все жанры музыки, но металл всегда будет №1!

Установите пользовательское содержимое вкладки HTML для автора на странице профиля

Одномолекулярный FRET раскрывает механизм индуцированной подгонки для селективности субстрата в эндонуклеазе 1 лоскута

Существенные изменения:

— Между настоящей рукописью и одним из предыдущих отчетов авторов (Sobhy et al., Cell Reports 2013). Здесь FEN1 человека связывается примерно с 5 нМ Kd с различными субстратами ДНК, тогда как в предыдущей работе Kd был примерно в 50 раз выше. Кроме того, k-изгиб / связывание здесь ограничено диффузией, тогда как в предыдущей работе оно было на порядки меньше. Это несоответствие необходимо устранить.

Хорошее замечание. Нам неясно, почему K _d-bending был высоким в нашем предыдущем исследовании (Sobhy et al., Cell Reports 2013), но мы подозреваем, что это могло быть результатом неправильной подготовки системы поглощения кислорода.Здесь мы также оптимизировали очистку нативного FEN1 с помощью расщепляемого тега SUMO-fusion. Как отметили обозреватели, более медленная ассоциация и более высокая скорость диссоциации способствовали более высокому d-изгибу K . Тем не менее, значения FRET в несогнутом и изогнутом состояниях в схеме мечения лоскута, единственной схеме мечения, использованной Sobhy et al., И относительное сравнение изгибающихся родственных и непознанных субстратов остаются действительными результатами, подтвержденными текущим исследованием при оптимальных условиях. К _{Г-образная} .В исправленную рукопись мы добавили следующий абзац для решения этого вопроса.

«Неясно, что вызвало гораздо более высокий d-изгиб K , о котором сообщалось в нашей более ранней работе (Sobhy et al., 2013), но мы предполагаем, что влияли как более медленная ассоциация, так и более высокая скорость диссоциации. Тем не менее, состояния FRET одного NonEQ DF-6,1Flap и при изгибе посредством FEN1 и относительное сравнение изгиба родственного субстрата с нераспознанными субстратами аналогичны в условиях низкого и высокого K _{d-изгиба} , как показано ниже.”

— В этом направлении авторы заявляют в предыдущей работе, что «мы находим многоступенчатый механизм, который проверяет все особенности субстрата перед тем, как вызвать этап изгиба промежуточной ДНК, который, как полагают, объединяет механизмы 5′-нуклеазы. Это достигается путем координации продевание 5′-створки зазубрины в консервативный шлюз с конической спиралью, наблюдение за активным сайтом и изгиб путем связывания в основании соединения ». Эти утверждения, если они верны, несомненно, украдут гром из текущей рукописи; однако, поскольку здесь не обсуждаются предыдущие результаты, неясно, решили ли авторы проигнорировать свое ранее опубликованное исследование, потому что оно было выполнено неправильно.Этот вопрос требует решения. Кроме того, авторы должны процитировать соответствующее исследование FRET одной молекулы FEN1, проведенное лабораторией Пенедо, опубликованное в Nucleic Acids Research 2014.

Спасибо, что отметили эти моменты. Мы приносим свои извинения за слишком краткое объяснение, связывающее текущие выводы с выводами Собхи и др. Теперь этот вопрос рассматривается в исправленной рукописи, как мы надеемся, подходящей подробностью.

Sobhy et al. использовали схему мечения лоскута, чтобы рассмотреть взаимосвязь между прохождением 5’-лоскута в шлюз cap-helical и изгибом ДНК.Эта схема маркировки показала, что блокирование заправки 5’-лепестка путем введения биотин / стрептавидиновой составляющей на 5’-створке привело к незначительному изменению FRET по сравнению с тем, когда нарезание резьбы было разрешено. Действительно, этот эксперимент можно воспроизвести при оптимальном d-изгибе K _{(данные не показаны). Собхи и др. поэтому предположили, что нарезание 5’-лепестков строго необходимо для индукции изгиба ДНК и, следовательно, изгиб ДНК происходит в конце распознавания субстрата; абзац, выделенный рецензентами.В текущем исследовании мы полагались на схему внутренней маркировки, которая напрямую сообщает о геометрии дуплексной ДНК. Эта схема мечения привела к другому результату, показав значительное искажение дуплексной ДНК, когда процесс заправки 5’-лепестков был заблокирован. Однако это искажение было все же меньше, чем наблюдаемое при разрешении заправки 5’-створок. Мы также обнаружили, что изменение остатков в шлюзе снижает скорость изгиба ДНК. Хотя эти новые результаты также предполагают, что для правильного искажения ДНК требуется нарезка 5’-лоскута, как первоначально было предложено Sobhy et al., значительное изгибание ДНК, о котором сообщалось в текущем исследовании, затруднило окончательное исключение возможности того, что FEN1 может пронизывать 5’-лоскут после того, как он значительно изгибает ДНК или когда он изгибает ДНК. Эти результаты расширяют наши знания о взаимосвязи между заправкой 5’-лепестков и изгибом ДНК, но они также подчеркивают сложность понимания точного временного механизма заправки 5’-лепестков по сравнению с изгибом ДНК. В текущем исследовании мы также выполнили кинетический анализ включений и отклонений на несвязанных субстратах, в сочетании с измерениями FRET с высоким временным разрешением, и показали, что FEN1 способен сгибать как родственные, так и чужие субстраты, но демонстрирует замечательную селективность для стабилизации. изогнутый конформер родственного субстрата.Эти результаты вместе со значительным искажением ДНК при блокировании образования нитей 5’-лоскута более согласуются с моделью, согласно которой FEN1 изгибает ДНК и использует ее для исследования свойств субстрата. В отредактированную рукопись мы добавили обсуждение, связывающее результаты распознавания 5’-лоскута из схемы мечения лоскута в Sobhy et al. со схемой внутренней маркировки в текущем исследовании. Мы также добавили следующий заключительный параграф, в котором комментируются предложенные модели в обоих исследованиях.}

«В совокупности эти результаты демонстрируют, что FEN1 изгибает как родственные, так и непознаваемые субстраты, а K _d-изгиб выше для непознаваемых субстратов. Это согласуется с нашими предыдущими выводами в условиях высокого d-изгиба K _{(Sobhy et al., 2013). Кроме того, они показали, что FEN1 стабилизирует родственный субстрат за счет замечательной селективности в отношении его ключевых особенностей полностью парных узловых соединений, 3’-створок и 5’-створок, при этом способствуя диссоциации нераспознанных субстратов.Наше наблюдение способности FEN1 значительно изгибать ДНК в комплексе с блокированной нитью ставит под сомнение наш предыдущий вывод о том, что нарезание 5’-лоскута строго необходимо для индукции изгиба ДНК (Sobhy et al., 2013). Наши новые результаты согласуются с моделью, в которой FEN1 активно изгибает ДНК, чтобы взаимодействовать с соединениями ss / ds-ДНК, а затем проверяет эти взаимодействия с помощью упорядочения белков, индуцированного 3’-лоскутом ».}

Рецензенты надлежащим образом попросили нас сослаться на работу Cragg et al.(НАР 2014). Это исследование показало, что подложка с двойным лоскутом чередуется между изогнутым и разогнутым состояниями. Мы полагаем, что использование схемы маркировки лоскутов является причиной, по которой Cragg et al. предположил, что двойная лоскутная подложка представляет собой динамическую структуру. Мы обнаружили, что такая динамическая природа является результатом локального изменения геометрии 5’-створки, а не изменения конформации дуплексной ДНК, когда длина 5’-створки превышает 6 нуклеотидов.

Репродукция Cragg et al. Эксперименты и их обсуждение представлены на Рисунке 1 — в приложении 2B к исходной рукописи.В исправленную рукопись мы добавили следующее утверждение в основной текст для решения этого вопроса.

«Схема мечения лоскута была чувствительна к изменению концентрации ионов Mg ²⁺ , когда длина 5’-лоскута превышала 6 нт (Рисунок 1 — приложение к рисунку 2B). Это могло бы объяснить, почему в предыдущей работе было высказано предположение, что двухстворчатый субстрат представляет собой динамическую структуру (Craggs et al., 2014) ».

— Многие из критических аргументов в рукописи основаны на способности авторов очень точно построить распределение времени, прошедшего между сгибанием и разрезанием.Из описания в рукописи не ясно, как именно это делается экспериментально. Авторам необходимо уточнить, как они определяют точный момент изгиба и исключают ли они определенные молекулы на основе свойств в их следах FRET.

Мы ценим экспертное мнение рецензента по этим вопросам. В отредактированной рукописи мы даем более подробное описание назначения событий расщепления и их анализа в разделе «Методы». Мы также предоставляем дополнительный подробный анализ всех частиц во всем поле зрения как для родственных, так и для неродственных субстратов в новом дополнительном рисунке 2 — рисунке 2A, B, E.Эти анализы теперь количественно демонстрируют нашу способность приписать событие расщепления 5’-створок.

— Утверждается, что доля событий связывания / изгиба, которые приводят к расщеплению, составляет 100%. Пожалуйста, предоставьте подтверждающие данные / статистические данные, подтверждающие это утверждение.

Мы не собирались подавать такое заявление и сожалеем об этом недоразумении. Мы имели в виду, что в случае родственного субстрата все эффективные частицы, которые были расщеплены на основании критериев, подробно описанных в разделе «Методы» в измененной рукописи и показанных на новом дополнительном рисунке 2 — приложение к рисунку 2A, расщеплены. на первом этапе гибки.Мы надеемся, что новый дополнительный рисунок 2 — рисунок 2A и подробное описание анализа данных в разделе «Методы» устранят эту путаницу с нашей стороны в пересмотренной рукописи.

— На рис. 2 и 5 авторы анализируют время задержки между уменьшением FRET (изгиб) и исчезновением донорского сигнала (разрезание лоскута). Как они узнают, что исчезновение донорского сигнала не вызвано обесцвечиванием донора? Авторы должны предоставить экспериментальные доказательства, чтобы исключить этот сценарий.

Спасибо, что подчеркнули эту мысль. В отредактированной рукописи мы выполнили подробный анализ контрольных экспериментов, сравнивающих потерю Cy3 в условиях, когда FEN1 изгибает родственную ДНК, не расщепляя ее (ионы Ca ²⁺ ), или изгибает ее и расщепляет (ионы Mg ²⁺ ). показать, что потеря сигнала Cy3 происходит из-за расщепления; новый дополнительный рисунок 2 — приложение к рисунку 2A. Потеря сигнала Cy3 под Ca ²⁺ составляла ~ 20%, в то время как потеря сигнала под Mg ²⁺ составляла ~ 80%.Аналогичные результаты были получены для не родственного субстрата, как показано на новом дополнительном рисунке 2 — рисунок в приложении 2E.

Мы дополнительно проанализировали зависящую от времени потерю сигнала Cy3 в родственном субстрате в присутствии Ca ²⁺ или Mg ²⁺ , как показано на новом дополнительном рисунке 2 — приложении к рисунку 2B. В присутствии Ca ²⁺ количество потерянных Cy3 было медленным и составляло около 20%.

В то время как в случае Mg ²⁺ наблюдается резкое изменение скорости потери сигнала примерно на 6 с, что совпадает с поступлением FEN1 в проточную ячейку.

Взятые вместе, эти анализы показывают, что потеря сигнала Cy3 в основном наблюдается из-за расщепления, а не фотообесцвечивания.

— Для неоптимальных субстратов расщепление и высвобождение продукта все еще наблюдается, но только после многих циклов непродуктивных событий связывания / изгиба. Авторы трактуют последнее событие привязки иначе, чем предыдущие события привязки, но почему? Сильная вероятность состоит в том, что каждое событие связывания может приводить к расщеплению, но с меньшей скоростью, чем в случае оптимальных субстратов.Как исключить такую ​​возможность? Если можно показать, что распределение времени пребывания последнего связывающего события количественно отличается от распределений времени пребывания более ранних событий связывания, возможно, текущая интерпретация может быть одобрена. В противном случае интерпретация последнего абзаца в подразделе «FEN1 предотвращает расщепление ДНК вне мишени на этапе блокировки ДНК» является подозрительной.

Время жизни изогнутого конформера в несвойственных субстратах было определено в присутствии Ca ²⁺ и показано на рисунке 4.Действительно, эти времена жизни значительно отличались от тех, которые наблюдались для последней стадии изгиба перед расщеплением в присутствии Mg ²⁺ , либо больше, либо меньше. Это различие послужило основой для нашей интерпретации того, как FEN1 избегает расщепления неродственных субстратов.

Вкратце, взаимосвязь между временем жизни изогнутого конформера в присутствии Ca ²⁺ и временем пребывания в последнем изогнутом состоянии перед расщеплением в присутствии Mg2 можно разделить на две категории.В одной группе время жизни ограничивало скорость и, следовательно, не поддерживало время, необходимое для катализа. Во втором — в 3-4 раза больше времени, необходимого для катализа. Если каждое прерванное событие изгиба представляет собой этап, на котором катализ протекает медленнее, тогда ожидалось бы, что время задержки в последнем событии изгиба ДНК, которое привело к расщеплению, будет больше в обеих категориях, чем родственный субстрат, особенно во второй категории, где время жизни изогнутого конформера значительно больше, чем требуется для катализа.Мы наблюдали, что время задержки перед расщеплением отличалось от показанного на рисунке 4, и было количественно сходным как для родственных, так и для неконференционных субстратов. Сценарий, в котором катализ протекает с более медленной скоростью, показан в случае мутанта по активному сайту FEN1-Y40A, где время задержки перед расщеплением было в 3 раза больше, чем у родственных и не родственных субстратов.

— На рисунке 2 авторы показывают распределение времени, прошедшего между сгибанием и резкой, по возрастанию и убыванию.Утверждается, что это распределение вызвано наличием нескольких стадий, ограничивающих скорость, включая переход беспорядок-порядок и химию расщепления. Важным свойством распределений нарастания и спада является то, что они возникают только в том случае, если лежащие в основе ступени примерно одинаково ограничивают скорость. В последующем элегантном эксперименте авторы замедляют переход беспорядок-порядок в 3-4 раза (рис. 2D). Этот результат обеспечивает надежный прогноз; а именно, что распределение нарастания и спада теперь должно коллапсировать до распределения, которое полностью определяется переходом беспорядок-порядок как ступенькой, ограничивающей скорость.Однако, если посмотреть на рис. 2 — дополнение к рисункам 1B и C, можно увидеть распределение нарастания и спада с еще большим количеством шагов, ограничивающих скорость. Это разъединение необходимо устранить.

Здесь мы проясняем нашу логику. Если мы предположим, что распределение времени задержки должно отражать ограничивающий скорость этап конформационных изменений, вызванных 3’-лоскутом, все еще возможно, что лежащее в основе распределение конформационных изменений при добавлении вискогена само по себе может стать более сложным распределением.Это можно понять из простой модели диффузии, в которой скорость сворачивания обратно пропорциональна вязкости раствора. Предполагая, что без вискогена конформационные изменения были распределены экспоненциально, можно утверждать, что при добавлении вискогена конформационные изменения предполагали бы многоэкспоненциальное поведение из-за разной степени трения, создаваемого вискогеном для разных остатков в белке и, таким образом, показывая очевидные многоэкспоненциальные ступени во временах выдержки при расщеплении.Фактически, если мы построим график стандартного отклонения времени выдержки в зависимости от вязкости, мы обнаружим почти линейную зависимость (новый дополнительный рисунок 2 — рисунок в приложении 1E), как можно было бы спрогнозировать с помощью простой диффузионной модели. Проще говоря, это может означать, что при добавлении вискогена энергетические границы сворачивания становятся больше, в результате чего распределение индивидуальных скоростей сворачивания белков показывает большее стандартное распределение между собой. В отредактированной рукописи мы обсудили распределение времени выдержки нарастания и спада в присутствии вискогена следующим образом:

«Форма гистограмм в присутствии вискогена, однако, остается нарастающей и затухающей (Рисунок 2 — рисунок в приложении 1B), что свидетельствует о том, что упорядочение белков, индуцированное 3′-лепестками, вероятно, будет включать многоступенчатые процессы, которые замедляются присутствием вискогена.Фактически, стандартное отклонение kSTO было почти линейно пропорционально вязкости, что можно было бы предсказать с помощью простой диффузии, когда разные участки белка испытывают различное трение при увеличении концентрации вискогена (Рисунок 2 — рисунок в приложении 1E) ».

— Аргумент в пользу взаимной индуцированной подгонки очень умозрительный. Конформационные изменения белков не измеряются напрямую, и любые предполагаемые конформационные изменения, по-видимому, не подтверждаются данными. Настоятельно рекомендуется удалить эти претензии.

Мы ценим эту продуманную рекомендацию. В переработанной рукописи мы пересмотрели наши аргументы о взаимной индуцированной подгонке и использовали вместо нее только индуцированную подгонку. Мы согласны с рецензентом в том, что мы нечувствительны к конформационным изменениям белков. Однако мы чувствительны к вытягиванию 3 ’лоскута из 1 нуклеотида, который, как установлено в предыдущих структурных исследованиях, вызывает конформационные изменения в белке. В отредактированной рукописи мы также прояснили, почему мы думаем, что индуцированные отношения между FEN1 и ДНК имеют взаимную природу, опираясь на аргумент, что 3’-створка активно тянется после изгиба ДНК.

— Выводы, сделанные на основе данных на Рисунке 3, основаны на способности авторов надежно различать довольно похожие уровни FRET. Описывается, как для этого анализировались конфокальные данные FRET, но на самом деле данные не показаны. Учитывая высокий уровень уверенности, необходимый для веры в точность значений FRET, очень важно, чтобы авторы показали эти данные, наблюдаемую вариацию в наборах из трех экспериментальных повторов и подгонку данных.

Это ключевой момент, который мы рады улучшить.Мы добавили новый дополнительный рисунок, чтобы показать все гистограммы, относящиеся к рисунку на новом дополнительном рисунке 3 — рисунок в приложении 1. Фактически мы повторили все эксперименты, представленные на рисунке 3, чтобы добавить еще один контрольный эксперимент, показывающий отсутствие эффекта от FEN1 на дцДНК. Это привело к незначительным изменениям всех исходных показаний FRET из-за небольших различий в условиях настройки лазерного луча конфокального микроскопа. Как видно на новом Рисунке 3, показания чрезвычайно согласуются между собой и с показаниями на первоначально представленном Рисунке 3 и имеют очень низкое стандартное отклонение.

[Примечание редакции: до принятия были запрошены дополнительные исправления, как описано ниже.]

Рукопись была улучшена, но некоторые из комментариев, похоже, были неправильно поняты, и в результате их исправление в ответе не дало адекватных ответов на вопросы. Эти несколько оставшихся проблем (изложенных ниже) необходимо решить до принятия:

1) «Для неоптимальных субстратов расщепление и высвобождение продукта все еще наблюдается, но после многих циклов непродуктивных событий связывания / изгиба.Авторы трактуют последнее событие привязки иначе, чем предыдущие события привязки, но почему? Сильная вероятность состоит в том, что каждое событие связывания может приводить к расщеплению, но с меньшей скоростью, чем в случае оптических субстратов. Как они исключают такую ​​возможность? Если они смогут показать, что распределение времени пребывания последнего связывающего события количественно отличается от распределения времени пребывания более ранних событий связывания, возможно, их текущая интерпретация может быть одобрена ».

В ответ на этот комментарий авторы сравнили время жизни связанного состояния в присутствии кальция со временем жизни конечного связанного состояния до расщепления.Однако такое сравнение не решает проблему, потому что нельзя исключить возможность того, что наличие кальция вместо магния может изменить кинетику на неоптимальных субстратах. Поскольку неоптимальные субстраты показывают несколько событий связывания (1, 2, …, n-1) до того, как n-е событие связывания приведет к расщеплению, они должны построить гистограмму времени пребывания предшествующих событий связывания и сравнить его со временем пребывания. гистограмма финального события. Этот вывод будет поддержан только в том случае, если они будут существенно отличаться друг от друга.

Мы ценим проницательность наших рецензентов. Мы сравнили время пребывания пропущенных событий в присутствии Mg ²⁺ во всех непознанных субстратах, а также мутантов FEN1 Y40A и R47A и обнаружили, что они аналогичны данным Ca ²⁺ . Эти новые данные представлены на новой панели на рисунке 5 — рисунок в приложении 1 (панель F). Таким образом, первоначальный вывод остается в силе, поскольку время пребывания одинаково для Mg ²⁺ и Ca ²⁺ .

2) «- На рисунке 2 авторы показывают распределение времени, прошедшего между сгибанием и резкой, по возрастанию и убыванию.Утверждается, что это распределение вызвано наличием нескольких стадий, ограничивающих скорость, включая переход беспорядок-порядок и химию расщепления. Важным свойством распределений нарастания и спада является то, что они возникают только в том случае, если лежащие в основе ступени примерно одинаково ограничивают скорость. В последующем элегантном эксперименте авторы замедляют переход беспорядок-порядок в 3-4 раза (рис. 2D). Этот результат обеспечивает надежный прогноз; а именно, что распределение нарастания и спада теперь должно коллапсировать до распределения, которое полностью определяется переходом беспорядок-порядок как ступенькой, ограничивающей скорость.Однако, если посмотреть на рис. 2 — дополнение к рисункам 1B и C, можно увидеть распределение нарастания и спада с еще большим количеством шагов, ограничивающих скорость. Это отключение необходимо устранить «.

Опять же, авторы, кажется, неправильно поняли комментарий. По крайней мере, одно из утверждений в оригинальной рукописи неверно, но какое из них не установлено.

Приносим извинения за недоразумение. Мы согласны с авторами обзора в том, что профиль нарастания и спада времени пребывания предполагает наличие нескольких шагов с аналогичными константами скорости, происходящих во время пребывания.Как отметили обозреватели, когда константа скорости одного из этапов (например, конформационного изменения) уменьшается, а другие остаются постоянными, этот этап действует как этап ограничения скорости, и гистограмма должна демонстрировать одноэкспоненциальный профиль затухания. Когда этот шаг замедляется, среднее время задержки должно увеличиваться, и это действительно то, что мы наблюдали экспериментально на рисунке 2B. Стандартные отклонения в отсутствие или в присутствии различных концентраций глицерина находились в диапазоне 60-70% от их среднего значения, предполагая, что форма гистограмм аналогична и что количество этапов ограничения скорости не увеличивалось в присутствии вискогена.Это сходство в подходах нарастания и спада можно увидеть визуально, если мы будем объединять наши данные в соответствии с некоторым оптимальным правилом объединения, таким как правило Скотта. Тем не менее, мы решили представить их с экспериментальным временным разрешением, поскольку оно наиболее близко отражает необработанные данные.

Таким образом, рецензенты правы в том, что все еще существует несколько стадий, ограничивающих скорость, которые способствуют реакции расщепления. Одна возможность состоит в том, что в этой реакции есть несколько отдельных стадий конформационных изменений, которые замедлятся при увеличении вязкости раствора.Это включает в себя индуцированное 3’-лоскутом упорядочение белков, которое само по себе может быть многоступенчатым, и потенциально последующие конформационные изменения, необходимые для разрыва пары ДНК и смещения ее в активный сайт. Если это так, все шаги будут замедляться при увеличении вязкости раствора, и, следовательно, общая скорость реакции будет уменьшаться, в то время как форма нарастания и спада гистограммы останется прежней. Поэтому мы считаем, что утверждение в оригинальной рукописи о том, что упорядочение белков, вызванное 3’-лоскутом, является вероятным этапом ограничения скорости, неверно.В отредактированной рукописи мы исправили это утверждение, а также прокомментировали форму гистограмм, как указано рецензентами. Теперь абзац гласит следующее: «Форма гистограмм в присутствии вискогена, однако, остается нарастающей и спадающей (Рисунок 2 — рисунок в приложении 1B), в отличие от предсказания коллапса в единичный экспоненциальный спад, если упорядочение белков будет действовать. за один ограничивающий шаг. Это предполагает, что упорядочение белков, индуцированное 3′-лоскутом, вероятно, связано с многоступенчатыми процессами, которые замедляются присутствием вискогена, и / или эти многоступенчатые действия контролируют различные этапы, ограничивающие скорость во время катализа, такие как разрушение пар ДНК и / или смещение ДНК в активный центр. .”

3) «- Анализ данных, по-видимому, предполагает, что продуктивное высвобождение происходит мгновенно, поскольку время ожидания между начальным изгибом и исчезновением флуоресценции интерпретируется как время реакции. Пожалуйста, предоставьте обоснование для этого предположения».

Это по существу не ответ, потому что исчезновение лоскута оцДНК определяется как расщепление («лоскут оцДНК не взаимодействует с FEN1, исчезновение которого определяется как расщепление в нашем анализе»).Конечно, при таком определении выпуск продукта происходит одновременно с расщеплением. Однако расщепление действительно должно относиться к химической реакции расщепления остова; нет никаких априорных оснований полагать, что продукт расщепления должен высвобождаться мгновенно. Этот вопрос все еще требует решения.

Наше определение расщепления и общепринятое, используемое в литературе, состоит в том, что с момента, когда FEN1 связывает ДНК, комплекс претерпевает все необходимые конформационные изменения, происходит разрез и 5’-лепесток отходит от комплекса.Мы предоставили доказательства, подтверждаемые предыдущей литературой, что выпуск 5’-створок не является ограничивающим шагом, но, конечно, не означает, что он не способствует увеличению времени выдержки, которое мы называем единичным оборотом. Однако самым убедительным доказательством нашего предположения о том, что большая часть времени пребывания перед расщеплением соответствует катализу, а не высвобождению 5′-створок, является то, что наш единичный оборот аналогичен таковым из анализов объемного расщепления, которые не чувствительны к высвобождению 5′-створок в случае родственный субстрат.Чтобы устранить любую потенциальную путаницу в определении единичного оборота, мы добавили в нашу исправленную рукопись следующее утверждение: «Однако, поскольку выпуск 5′-створки по-прежнему будет вносить вклад в время выдержки перед расщеплением, наш единичный оборот следует рассматривать как очевидную ценность. . »

4) Что касается наблюдения, что при добавлении вискогена, распределение времени выдержки остается нарастанием и спадом (что подразумевает, что продолжают существовать несколько этапов, ограничивающих скорость), утверждается, что присутствие визогена само по себе приведет к дополнительному увеличению сложный ландшафт свободной энергии, который приведет к дополнительным шагам, ограничивающим скорость.Хотя это в принципе возможно, неясно, обязательно ли ширина распределения времени пребывания вызвана диффузией. Это утверждение следует уточнить или опустить.

Мы исключили это утверждение из исправленной рукописи, как это предлагается, а также связанную с ним панель рисунков для ясности.

https://doi.org/10.7554/eLife.21884.021

Повышение яркости и фотостабильности зеленых и красных флуоресцентных белков для визуализации живых клеток и отчетов FRET

Эволюция mRuby3

mRuby2 является подходящим акцепторным флуорофором в GFP-RFP FRET из-за его высокого квантового выхода, большого стоксова сдвига, быстрого созревания, и высокая фотостабильность ¹ .Мы спросили, можем ли мы увеличить яркость mRuby2, чтобы улучшить его работу в качестве приемника FRET. Мы выполнили полурациональную эволюцию, выполняя мутагенез комбинаторным и одновременным образом в нескольких местах одновременно, отбирая аллели, встречающиеся в естественных условиях в RFP, и выбирая сайты, которые могут повлиять на сворачивание белка или яркость хромофора в зависимости от их расположения в структуре. В частности, чтобы улучшить яркость, мы предположили, что плотная упаковка остатков рядом с хромофором может уменьшить колебания возбужденного состояния, которые могут привести к безызлучательному распаду.В каждом раунде бактериальные колонии проверяли на высокую абсорбцию и высокую флуоресценцию, и лучший мутант использовали в качестве матрицы для следующего раунда. В течение 6 раундов мы тщательно скринировали сайты с вариабельностью последовательностей среди RFP и с вероятным влиянием на флуоресцентные характеристики. Последний лучший вариант содержит 21 замену относительно его родительского mRuby2 (N33R, M36E, T38V, K74A, G75D, M105T, C114E, h218N, Q120K, h259D, M160I, S171H, S173N, I192V, L202I, M202V, F216 , A222S, G223N, рис.1а). Судя по кристаллической структуре mRuby, большинство этих мутаций расположено на внешнем цилиндре (рис. 1b). Этот вариант был мономерным и мигрировал аналогично исходному mRuby2 и FusionRed ²¹ при гель-фильтрации (дополнительный рис. 1a). Мы обозначили этот окончательный вариант mRuby3.

Рисунок 1: Разработка mRuby3.

(a) Выравнивание последовательности mRuby3 с его родительским mRuby2. Аминокислоты, образующие хромофор, обозначены черным прямоугольником.Мутации внешнего ствола обозначены синим цветом, мутации внутреннего ствола обозначены зеленым цветом, а мутации петли обозначены оранжевым. (b) Кристаллическая структура mRuby (регистрационный номер PDB 3U0M), демонстрирующая мутации между mRuby2 и mRuby3. (c) Поглощение (слева) и испускание (справа) mCherry, mKate2, FusionRed, mRuby2 и mRuby3. Спектры поглощения масштабируются до максимального коэффициента экстинкции. Спектры излучения масштабируются таким образом, чтобы площади под кривыми были пропорциональны яркости пика (произведение коэффициента экстинкции пика и квантового выхода).

mRuby3 имеет максимумы возбуждения и излучения на 558 и 592 нм, соответственно, что смещено в синий цвет по сравнению с mRuby2 (рис. 1c). Максимальный коэффициент экстинкции составляет 128 мМ ⁻¹ см ⁻¹ , а квантовый выход составляет 0,45 (таблица 1), в результате чего расчетная яркость на 35% выше, чем у mRuby2, и mRuby3 является самым ярким мономерным RFP, охарактеризованным на сегодняшний день. . Примечательно, что mRuby3 очень фотостабилен: при освещении дуговой лампой mRuby3 имел период полураспада 349 с (дополнительный рис.1b), по сравнению с 123 с для mRuby2 и 337 с для TagRFP-T, ранее наиболее фотостабильным RFP. Как и mRuby2, mRuby3 демонстрирует незначительную обратимость и моноэкспоненциальную кинетику фотообесцвечивания. Кроме того, mRuby3 демонстрирует сопоставимую кислотостойкость по сравнению с mRuby2 с pKa 4,8 (дополнительный рисунок 1c). В целом, эти результаты показывают, что mRuby3 является самым ярким и наиболее фотостабильным мономерным RFP, описанным на сегодняшний день.

Таблица 1 Фотофизические свойства ярких и мономерных зеленых и красных флуоресцентных белков.

Эффективность mRuby3 в клетках млекопитающих

Затем мы систематически тестировали эффективность mRuby3 в клетках млекопитающих. Мы сначала подтвердили, что различные слияния mRuby3 с критическими субклеточными нацеливающими доменами правильно локализованы в клетках млекопитающих (Fig. 2a) и что слияния с гистоном h3B не мешают митозу (Supplementary Fig. 2). Затем мы сравнили флуоресцентные сигналы, генерируемые mRuby3, с сигналами других мономерных RFP в клетках млекопитающих. В то время как измерения коэффициента экстинкции и квантового выхода очищенных белков in vitro позволяют объективно измерить яркость на одну молекулу зрелого флуоресцентного белка, кажущаяся яркость флуоресцентных белковых конструкций в клетках также зависит от эффективности созревания белка и полу- продолжительность жизни белка и, следовательно, должна быть проверена эмпирически.Поэтому мы сравнили яркость клеток, экспрессирующих различные мономерные RFP из бицистронной конструкции, позволяющей коэкспрессию с mTurquoise2 ²² , и использовали сигнал mTurquoise2 для нормализации различий в уровнях мРНК. mRuby3 генерировал самый высокий сигнал при экспрессии в клетках млекопитающих, превосходя mRuby2, FusionRed и mCherry более чем на 100% как в клетках HEK293A, так и в клетках HeLa ( p <0,05 по данным ANOVA с последующими апостериорными тестами Даннета; рис. 2b). Интересно, что эта степень улучшения была больше, чем ожидалось только по измерениям яркости на молекулу.Таким образом, наши результаты предполагают, что по сравнению с другими мономерными RFP, mRuby3 не только ярче на зрелую молекулу, но также более полно созревает или более стабилен в клетках млекопитающих.

Рисунок 2: Характеристики mRuby3 в клетках млекопитающих.

(a) Флуоресцентные изображения клеток HeLa, экспрессирующих различные гибридные белки mRuby3, которые проявляют различные субклеточные локализации: mRuby3-7aa-actin (актиновый цитоскелет), mRuby3-6aa-тубулин (микротрубочки), коннексин43-7aa-mRuby3 (клетка-mRuby3). стыки клеточной адгезии), mRuby3-10aa-h3B (нуклеосомы).Длины линкеров в аминокислотах обозначены числом перед «аа». Шкала 10 мкм. (b) Сравнение яркости мономерных RFP в клетках HEK293A и HeLa, экспрессирующих mTurquoise2-P2A-RFP. Красная флуоресценция каждого RFP, скорректированная mTurquoise2, была нормализована к флуоресценции mCherry. Данные представлены как среднее ± S.E.M. (n = 3). Звездочки указывают на статистически значимые различия ( p <0,05 по ANOVA с последующими апостериорными тестами Даннета). (c) FRET эффективность Clover-mRuby2 по сравнению с Clover-mRuby3 в клетках HEK293A и HeLa.Экспериментально полученные спектры излучения (красные линии) соответствовали линейным комбинациям спектров излучения донора и акцептора (черные линии).

Учитывая эти превосходные качества, мы предположили, что mRuby3 будет хорошо работать в качестве акцептора FRET. Ранее было показано, что mRuby2 является более эффективным акцептором FRET, чем несколько других мономерных RFP, включая mCherry ¹ , mOrange ¹⁴ и TagRFP ¹⁴ . Поэтому нас особенно интересовало, как mRuby3 работает по сравнению с mRuby2.Используя клевер в качестве донора FRET, рассчитанный радиус Ферстера (r ₀ ), предполагающий случайную ориентацию межфлуорофоров, составил 6,5 нм для mRuby3 по сравнению с 6,3 нм для mRuby2 (таблица 2). Чтобы проверить, является ли mRuby3 более эффективным акцептором FRET для Clover на практике, мы сконструировали гибридные белки, состоящие из Clover, гибкого линкера из 15 аминокислотных остатков, а затем mRuby2 или mRuby3. Затем мы экспрессировали каждый слитый белок в клетках млекопитающих и получили значения эффективности FRET путем линейного разделения спектров излучения. Эффективность FRET была выше с mRuby3 (E = 0.40) в качестве акцептора, чем с mRuby2 (E = 0,35) (рис. 2в). Эти результаты показывают, что mRuby3 производит более высокую яркость и действует как более эффективный акцептор FRET в клетках млекопитающих, чем mRuby2.

Таблица 2 r ₀ значений для пар GFP-RFP FRET.

Развитие mClover3

Мы попытались определить GFP, который превосходит Clover по яркости и фотостабильности и обеспечивает более эффективный FRET для mRuby3. Мы предположили, что более фотостабильный вариант Clover будет функционировать как идеальный донор для mRuby3, поскольку пара Clover-mRuby2 FRET имеет наивысший на сегодняшний день r ₀ (Таблица 2).Скрининг случайных мутантов на предмет более высокой фотостабильности на самодельном массиве синих светодиодов мы идентифицировали мутанты N149Y (Clover1.5) и N149Y G160S (dClover2) со все более высокой фотостабильностью (таблица 3). dClover2 имел нормированный по яркости период полураспада фотостабильности in vitro , равный 98 с по сравнению с 50 с для клевера, а также более высокий коэффициент экстинкции (ε = 123 против 111 мМ ^–1 см ^–1 ) и квантовый доходность (φ = 0,80 против 0,76). Однако в то время как Clover был мономерным при 10 мкМ, Clover1.5 существовал в равновесии мономер-димер, а dClover2 был димерным (дополнительный рис. 3a). Введение мутации A206K, которая оказалась эффективной в снижении димеричности других Aequoria производных GFP ²³ , мономеризованных Clover1.5, но не dClover2 (дополнительный рис. 3b). Однако после насыщающего мутагенеза в положении 160 и скрининга на фотостабильность и мономеричность мы получили вариант S160C, который мигрировал как мономер (дополнительный рис. 3b). Этот вариант, который мы назвали mClover3 (рис.3a, b), показал нормализованный по яркости период полураспада in vitro при отбеливании 80 с (дополнительный рис. 3c). По сравнению с родительским Clover, mClover3 имел аналогичные спектры (рис. 3c), немного более высокую яркость (ε = 109 против 111 мМ ^–1 см ^–1 , φ = 0,78 против 0,76, таблица 1) и немного уменьшенную. Чувствительность к pH (pK _a 6,5 против 6,6, дополнительный рис. 3d).

Таблица 3 Развитие mClover3. Рисунок 3: Разработка mClover3.

(a) Выравнивание последовательностей mClover3 и dClover2 с его родительским, Clover.Аминокислоты, образующие хромофор, обозначены черным прямоугольником. Мутации внешнего ствола обозначены оранжевым цветом. (b) Кристаллическая структура суперпапки GFP (регистрационный номер PDB 2B3P), демонстрирующая мутации между Clover и mClover3. (c) Спектры поглощения (слева) и излучения (справа) mEGFP, Envy, mNeonGreen, Clover и mClover3. Спектры поглощения масштабируются до максимального коэффициента экстинкции. Спектры излучения масштабируются таким образом, чтобы площади под кривыми были пропорциональны яркости пика (произведение коэффициента экстинкции пика и квантового выхода).

Эффективность mClover3 в клетках млекопитающих

Как и в случае с mRuby3, мы систематически тестировали эффективность mClover3 в клетках млекопитающих. Во-первых, мы определили, что различные слияния mClover3 с критическими субклеточными целевыми доменами локализуются правильно (Fig. 4a). Более того, слияния mClover3 с гистоном h3B не нарушали прогрессию митоза (Supplementary Fig. 4a). Затем мы сравнили Clover и mClover3 с другими GFP по яркости при экспрессии в клетках млекопитающих. Среди вариантов Aequoria victoria GFP мы выбрали для сравнения mEGFP, суперпапку GFP (sfGFP) и Envy.mEGFP — наиболее широко используемый флуоресцентный белок, sfGFP — производное EGFP с высокой эффективностью сворачивания ²⁴ , а Envy недавно был описан как придающий более высокую яркость почкующимся дрожжам ¹⁹ . Все они имеют меньшую яркость, чем Clover или mClover3 в очищенных препаратах in vitro (Таблица 1), но их видимая яркость в клетках млекопитающих не сравнивалась. Среди GFP от других видов, mNeonGreen, недавно описанный мономерный GFP, полученный из B.lanceolatum YFP, на 10% ярче, чем mClover3 in vitro (таблица 1). mClover3 и mNeonGreen имеют очень похожие спектры возбуждения и излучения, которые слегка сдвинуты в красную область относительно GFP, что может быть связано с тем, что хромофоры обоих белков участвуют в взаимодействиях катион-π (с His-203 в Clover и Arg-197 в mNeonGreen). ¹⁸ .

Рисунок 4: Производительность mClover3 в клетках млекопитающих.

(a) Флуоресцентные изображения клеток HeLa, экспрессирующих различные слитые белки mClover3, которые проявляют различные субклеточные локализации: mClover3-7aa-actin (актиновый цитоскелет), mClover3-6aa-тубулин (микротрубочки), коннексин43-7aa-mClover3 (клетка-mClover3). стыки клеточной адгезии), mClover3-10aa-h3B (нуклеосомы).Длины линкеров в аминокислотах обозначены числом перед «аа». Шкала 10 мкм. ( b ) Сравнение яркости GFP в клетках HEK293A и HeLa, экспрессирующих GFP-P2A-mCherry. Зеленая флуоресценция каждого GFP, скорректированная по флуоресценции mCherry, была нормализована к флуоресценции mEGFP. Данные представлены как среднее ± S.E.M. (n = 3). Звездочки указывают на статистически значимые различия ( p <0,05 по ANOVA с последующими апостериорными тестами Даннета). (c ) Эффективность FRET различных тандемных слияний GFP-mRuby3 в клетках HEK293A и HeLa.Экспериментально полученные спектры излучения (красные линии) соответствовали линейным комбинациям спектров излучения донора и акцептора (черные линии).

Подобно предыдущему сравнению mRuby3 с другими RFP, мы сравнили яркость клеток, экспрессирующих различные GFP из бицистронной конструкции, позволяющей коэкспрессию с mCherry, и использовали сигнал mCherry для нормализации различий в уровнях мРНК. Мы наблюдали, что в клетках HEK293A самые высокие средние уровни флуоресценции были результатом трансфекции mNeonGreen, затем Clover или mClover3, затем Envy, затем mEGFP и, наконец, sfGFP (рис.4б). Различия между mNeonGreen и mClover3, а также между mClover3 и mEGFP или sfGFP были статистически значимыми ( p <0,05 по ANOVA с последующими апостериорными тестами Даннета). В клетках HeLa экспрессия mNeonGreen, Clover или mClover3 все приводила к аналогичным уровням высокой флуоресценции, за ней следовали Envy, затем mEGFP и, наконец, sfGFP (рис. 4b). Здесь разница между mClover3 и Envy, mEGFP или sfGFP была статистически значимой ( p <0,05 по ANOVA с последующими апостериорными тестами Даннета).Таким образом, среди GFP, Clover, mClover3 и mNeonGreen производят самую яркую флуоресценцию при экспрессии в клетках млекопитающих.

Затем мы определили, какой мономерный GFP будет создавать наиболее оптимального донора FRET для mRuby3. sfGFP был опущен из-за его низкой флуоресценции в клетках млекопитающих, а Envy не рассматривался, поскольку было обнаружено, что он является димером (дополнительный рис. 4b). Рассчитанные значения r ₀ для пар mClover3-mRuby3 и mNeonGreen-mRuby3 составили 6,5 нм, что соответствует Clover-mRuby3, тогда как значение r ₀ для mEGFP-mRuby3 было ниже 5.8 нм (таблица 2). Чтобы определить, какой GFP является лучшим донором для mRuby3 на практике, мы измерили эффективность FRET в слияниях с mRuby3, экспрессируемым в клетках млекопитающих, сравнивая mClover3, mNeonGreen и mEGFP. В соответствии с более высокими расчетными значениями r ₀ , mClover3 и mNeonGreen приводили к более высокой эффективности FRET, чем mEGFP, как в клетках HEK293A, так и в клетках HeLa (фиг. 4c). Интересно, что эффективность FRET слияний mClover3-mRuby3 и mNeonGreen-mRuby3 также была выше, чем у Clover-mRuby3 (рис.2c), несмотря на аналогичные рассчитанные значения r ₀ , что свидетельствует о том, что mClover3 и mNeonGreen созрели более полно, чем Clover, при слиянии с mRuby3. Взятые вместе, эти результаты определяют mClover3 и mNeonGreen как наиболее эффективных доноров для mRuby3.

Clover3-mRuby3 улучшает восприятие FRET активности CaMKIIα

Репортер FRET Camuiα был полезен для выявления пространственного распределения и динамики активации CaMKIIα при долговременной синаптической потенциации и сокращении кардиомиоцитов ^4,25,26 .В нейронах и кардиомиоцитах исследователям требуется обнаружение изменений FRET в небольших субклеточных областях и в короткие промежутки времени, например в 1 мкм ² областях синаптических шипов и с интервалами выборки 1 с. В таких случаях сбор фотонов и амплитуда отклика датчика являются ограничивающими факторами при обнаружении изменений активности. Таким образом, мы стремились определить, можно ли улучшить производительность Camuiα с помощью mRuby3 или mClover3. Camuiα особенно интересен как пример мультимерного репортера FRET.Кристаллические структуры показывают, что CaMKIIα представляет собой додекамерный белок в форме пончика с C-концевым ассоциативным доменом каждой цепи, обращенным к центру, и N-концевыми доменами киназ, расположенными на краю, связанными с взаимодействующим с кальмодулином регуляторным сегментом и ассоциативным доменом. ²⁷ . После связывания кальмодулина с регуляторным сегментом N-концевые киназные домены освобождаются от взаимодействия с регуляторным сегментом и увеличивают свое расстояние от C-концов. В Camuiα флуоресцентные белки сливаются с концами полипептида CaMKIIα, чтобы служить парой FRET.В соответствии со структурой Camuiα имеет высокий FRET в неактивном состоянии и низкий FRET в активном состоянии (рис. 5a).

Рисунок 5: mClover3-mRuby3 и mNeonGreen3-mRuby3 улучшают ответы репортера CaMKIIα Camuiα.

( a ) Организация Камуи с парами FRET зеленый / красный. ( b ) Отношение эмиссии донор / акцептор (R _DA ) для зеленых / красных Camuiα-экспрессированных клеток HeLa без стимуляции иономицином. Данные представлены как среднее ± S.E.M. (n = 11, 14, 17, 10 для Camuiα-CR, Camuiα-CR3, Camuiα-C3R3 и Camuiα-NR3 соответственно).( c ) Среднее соотношение эмиссии донор / акцептор изменяется (ΔR / R _DA ) с течением времени (левая панель) и соответствующие логометрические изображения с модуляцией интенсивности (правая панель) клеток HeLa, стимулированных иономицином. Изменения коэффициента выбросов отдельных ячеек показаны серыми линиями, а среднее значение — черной линией. Данные представлены как среднее ± S.E.M. n = 7 ячеек для Camuiα-CR; n = 6 ячеек для Camuiα-CR3; n = 8 клеток для Camuiα-C3R3; n = 5 ячеек для Camuiα-NR3. Разница в изменении коэффициента пиковой эмиссии между Camuiα-CR и Camuiα-C3R3 и Camuiα-NR3 является статистически значимой ( p <0.05 по Студенческому тесту t ). Масштабная линейка 20 мкм.

Мы выдвинули гипотезу, что использование новых красных и зеленых FP может улучшить реакцию Camuiα, либо смещая ответ на более благоприятную часть кривой эффективности FRET, либо улучшая созревание флуорофоров. Однако мультимерная структура Camuiα может делать его экспрессию чувствительной к взаимодействиям между доменами флуоресцентных белков. До этого исследования вариантом Camuiα с наибольшим ответом был Camuiα-CR, с Clover на N-конце и mRuby2 на C-конце ¹ .Сначала мы проверили, могут ли варианты Camuiα с новыми GFP и mRuby3 хорошо экспрессироваться. Мы создали Camuiα-CR3 с Clover и mRuby3 в качестве пары FRET, Camuiα-C3R3 с mClover3 и mRuby3 и Camuiα-NR3 с mNeonGreen и mRuby3. Все они были хорошо экспрессированы с однородным цитоплазматическим распределением (дополнительный рис. 5а). Напротив, замена Clover на более димерный dClover2 вызывает агрегацию (дополнительный рис. 5a). Интересно, что dClover2 не мешает митозу при слиянии с гистоном h3B (дополнительный рис.5b), что указывает на то, что репортер Camuiα особенно чувствителен к димеризации флуоресцентного белка.

Затем мы протестировали способность новых красных и зеленых FP улучшать базовый FRET в репортере Camuiα. Camuiα-CR3 с mRuby3 показал более высокий базальный FRET, чем Camuiα-CR с mRuby2 (фиг. 5b). Этого ожидали по двум причинам. Во-первых, ожидается, что большее значение r ₀ Clover-mRuby3 по сравнению с Clover-mRuby2 (6,5 нм против 6,3 нм) увеличит базальный FRET. Во-вторых, mRuby3 созрел значительно лучше, чем mRuby2 во многих контекстах (рис.2b), и более полное созревание внутри Camuiα также должно увеличивать базальный FRET. Замена клевера на mClover3 или mNeonGreen дополнительно существенно не изменила базальные уровни FRET (рис. 5b), что согласуется с незначительными различиями в r ₀ между Clover-mRuby3, mClover3-mRuby3 и mNeonGreen-mRuby3 парами и не подразумевает значительных изменений. различия в эффективности созревания этих GFP внутри Camuiα.

Наконец, чтобы определить, можно ли улучшить характеристики Camuiα с помощью новых пар FRET, мы сравнили ответы Camuiα-CR, -CR3, -C3R3 и -NR3 в клетках HeLa, стимулированных иономицином.Средний ответ Camuiα-CR3 (измеренный как изменение соотношения эмиссии донор / акцептор между неактивным и активным состояниями) был аналогичен таковому у Camuiα-CR, приблизительно 45% (фиг. 5c). Поскольку FRET был выше в неактивном состоянии (рис. 5b) у Camuiα-CR3, этот результат означает, что FRET в активном состоянии также был выше у Camuiα-CR3. Напротив, использование mClover3 или mNeonGreen вместо Clover значительно улучшило динамический диапазон Camuiα, увеличив индуцированное кальцием увеличение отношения зеленого / красного излучения с 45% у Camuiα-CR3 до 70% у Camuiα-C3R3 и Camuiα-NR3, a 56% увеличение ( p <0.05 по студенческому тесту t -тест; Рис. 5в). Это улучшение чувствительности Camuiα было неожиданным, учитывая аналогичные значения r ₀ и аналогичную исходную эффективность FRET Camuiα-CR3, -C3R3 и -NR3, поэтому мы предполагаем, что неактивное состояние Camuiα может быть по-разному стабилизировано различными флуоресцентными белками N-конец. Например, слабое взаимодействие между близко расположенными поверхностями мономеров клевера в соседних субъединицах может стабилизировать Camuiα-CR в его закрытой конформации с высоким FRET, препятствуя переходу в открытую конформацию.Этот эффект может отсутствовать или уменьшаться в неродственных mNeonGreen и mClover3 из-за поверхностных мутаций N149Y и A206K, облегчая переход к открытой активной конформации у Camuiα-C3R3 и Camuiα-NR3.

Наша система финансирования школ несправедлива и сдерживает Австралию. Вот как это исправить

Прошло пять лет с тех пор, как Отчет Гонски был скомпилирован, а плоть выброшена.

В Австралии сейчас есть два почти полностью финансируемых государством, но очень разных школьных сектора.

Сектор государственных школ получает все свое текущее финансирование (кроме добровольных взносов) от правительств и должен принимать всех учащихся, которые хотят учиться.

Он обслуживает студентов из всех социально-экономических слоев, распределенных на 52 процента ниже и на 48 процентов выше контрольного среднего, установленного Индексом социально-образовательных преимуществ сообщества (ICSEA), показателем социального и образовательного уровня учащихся.

Неправительственный сектор, охватывающий католические и другие религиозные системы, а также независимые школы, также получает регулярное финансирование от правительства.

Они взимают сборы на уровнях, не подлежащих установлению правительством, и они могут занимать деньги для капитальных работ и обслуживать ссуды из своего общего текущего дохода.

Эти школы обслуживают гораздо более узкий круг учащихся, чем государственные школы: католические школы сейчас набирают только 11 процентов своих учеников из ниже среднего ICSEA; для независимых школ этот показатель составляет всего 5%.

Отдельно, но не равно

Любой, у кого хватит терпения провести достаточно времени на веб-сайте «Моя школа», может убедиться, что объем государственного финансирования негосударственных школ сейчас огромен.

Более 91 процента католических школ получают от 90 до 99 процентов финансирования государственных школ на том же уровне ICSEA; и 79 процентов независимых школ получают от 80 до 95 процентов финансирования государственных школ на том же уровне ICSEA.

Со времени выпуска Доклада Гонски государственные расходы на негосударственные школы увеличивались на 6 процентов в год по сравнению с 3 процентами для государственных школ.

Родителей предупредили о повышении платы за обучение

Есть опасения, что плата за обучение вырастет, если правительство не разработает «последовательную стратегию» финансирования школ.

Подробнее

Несмотря на гарантированный уровень государственного финансирования, большинство негосударственных школ, тем не менее, продолжают увеличивать плату за обучение.

Многим не требуется полное или даже частичное государственное финансирование для обеспечения высококачественного образования.

Кроме того, система государственных школ имеет определенные обязательства и подотчетность правительству.

Несмотря на получение государственных средств, негосударственные школы имеют избирательный процесс зачисления, могут по закону отказать в приеме, имеют установленное законом освобождение от ряда антидискриминационных положений (которые не всегда выполняются) и не подпадают под действие законодательства о свободе информации.

Государственные школы делают тяжелую работу

Социально-образовательный градиент ОЭСР, который связывает образовательную успеваемость с социально-экономическим статусом, для Австралии намного круче, чем в других западных странах, что отражает резкое влияние неблагоприятного положения на успеваемость в этой стране.

В то время как государственные школы Австралии охватывают весь спектр достижений, они являются основным поставщиком образования для учащихся из малообеспеченных семей.

Негосударственные школы принимают государственные средства, но имеют избирательный процесс зачисления. (

ABC News: Rhiana Whitson

)

Неправительственный сектор, который в подавляющем большинстве находится на верхнем уровне шкалы ICSEA, должен делать гораздо меньше тяжелой работы в сфере образования.

Ситуация неуклонно ухудшается. Правительства Содружества и штатов никогда не тратили на образование больше, чем в настоящее время, однако наши национальные показатели в области образования продолжают снижаться.

Неужели это действительно то, чего хочет Австралия?

Воспитание низшего образовательного класса не в наших национальных интересах.

Дети в наших школах, находящихся в крайне неблагоприятном положении, характеризуются не только низким социально-экономическим статусом, измеряемым доходом родителей, образованием и занятостью, но и множеством недостатков.

Типичная пригородная государственная школа, обслуживающая сообщество мигрантов, может иметь 80 процентов детей с языковым образованием, отличным от английского, из 10 или более разных языковых групп, проживающих в стране менее трех лет и, вероятно, не останутся в школе надолго. (потому что родители ищут работу).

Правительство никогда не тратило больше на образование, но показатели по стране снижаются. (

ABC News

)

В региональном центре набор обычно включает много детей длительно безработных, некоторые из которых никогда не читали, даже не держали в руках книгу или знают, что страницы перевернуты. справа налево.

Такие школы — неотложные отделения австралийского образования. Тем не менее, они лишены специальной поддержки, нормальной в таких обстоятельствах в больнице.

Детям из социальной неблагополучной среды требуется немедленная диагностика потребностей в обучении, а также немедленное и интенсивное индивидуальное обучение.

Им требуется индивидуальное обучение и обучение в небольших группах, логопеды, консультанты, сотрудники по связям со школой / семьей, включая переводчиков, и ряд других видов поддержки.

А для этого нужны деньги.

Гонски о гораздо большем, чем справедливый ход

Образование должно быть общественным благом для нации, а не позиционным благом для некоторых: оно требует стратегически дифференцированного финансирования, направленного на наиболее нуждающиеся области.Вот чего добивался Гонски.

Гонски был больше, чем справедливость и справедливость для всех детей. По сути, речь шла о создании нашего национального запаса человеческого капитала.

Части отчета Гонски были приняты правительством Гилларда. (

Getty Images: Луис Аскуи

)

До 8 лет ребенок учится читать. Кроме того, цель — читать, чтобы учиться.

Если в 12 лет дети по-прежнему фонетически произносят большинство слов, их понимание будет слабым, их обучение будет ограничено, и, скорее всего, они не полностью выздоровеют.

Использование любых ресурсов, необходимых для обучения ребенка чтению, отвечает не только интересам ребенка, но и национальным интересам, чтобы будущий взрослый был трудоспособным, квалифицированным, творческим и самодостаточным.

Каждому ребенку — будь то из семьи в четвертом поколении с доходом в три раза выше среднего по стране или из семьи, которая была безработной в течение трех поколений, или из недавно прибывшей семьи беженцев, не говорящей по-английски, — следует предоставить такой вид и объем индивидуальной поддержки, необходимой для реализации их потенциала.

Что нужно сделать?

1. Отдельная школа, а не система, должна стать единицей измерения потребностей в соответствии с общим шаблоном для всей страны.

Существующие источники данных делают это возможным. Общие потребности каждого сектора должны быть построены снизу вверх, как сумма образовательных потребностей школ в секторе.

Финансирование сектора больше не должно определяться сверху вниз путем политических переговоров с лидерами системы, такими как власти штата, независимые школьные интересы, церковные власти и Австралийский союз образования.

Борьба за финансирование может затянуться

Борьба между Содружеством и штатами, похоже, затянется до июньской встречи COAG.

Подробнее

2. Финансирование Содружества и штата должно быть объединено, а общие приоритеты финансирования должны определяться Советом по образованию COAG.

Предложение Гонски по стандарту школьных ресурсов достигло бы этого: нынешний стандарт этого не делает. Оба уровня правительства несут ответственность как по отношению к государственным, так и по отношению к негосударственным школам.

3. COAG должен определить долю общих потребностей, которые правительства могут позволить себе удовлетворить в течение периода финансирования.

4. Доступное финансирование должно распределяться в соответствии с потребностями, после гораздо более реалистичной, чем в настоящее время, оценки способности негосударственных школ соответствовать своим стандартам школьных ресурсов за счет оплаты и инвестиций. Школам, государственное финансирование которых будет сокращено, должно быть предоставлено достаточное время для перехода.

5. В качестве условия получения государственного финансирования должен быть установлен предел (рассчитанный по градуированной шкале) на уровень оплаты, который могут взиматься негосударственными школами.

Австралия на распутье

В отсутствие предложения по переосмыслению текущего процесса финансирования школ у государственных министров нет другого выхода, кроме как призывать к неуместно названным «последним двум годам финансирования Гонски».

Хотя это могло бы временно облегчить положение школ, находящихся в неблагоприятном положении, дополнительное финансирование стратегически нецелесообразно в долгосрочной перспективе. В соответствии с текущими договоренностями, часть финансирования, необходимого для школ, находящихся в неблагоприятном положении, будет по-прежнему поступать в другие школы.Общая стоимость образования будет продолжать расти по спирали без каких-либо изменений в нашем социально-образовательном градиенте.

Как работает австралийская экономика и все в ней.

Ничего серьезного не может быть достигнуто путем прекращения финансирования самых богатых негосударственных школ, на которые обучается менее 5 процентов школьного населения.

Это была бы значительная экономия в размере 900 миллионов долларов в год, но это не помогло бы устранить настоящую причину проблемы. Что необходимо, так это реформа корня и филиалов, основанная на стратегическом перераспределении имеющихся средств с учетом потребностей и без учета секторов.