Мультивен т5: Купить Volkswagen Multivan с пробегом по цене от 400 000 рублей

Содержание

Ремонт АКПП Фольксваген Мультивен Т5 в Москве

Расскажем об автомобиле Volkswagen Passat B7 1.8 tsi, 2012 года выпуска, с пробегом 280.000км. За все это время владелец сталкивался лишь с проблемой сцепления, которое благополучно поменял на 210.000км. пробега. Но из-за несвоевременного обслуживания кинематики, к сожалению, столкнулся с серьезными проблемами.

Укомплектованный роботизированной коробкой передач DQ200, она же 0AM. Напомним информацию об этой трансмиссии:

 

DQ200 это коробка передач с двойным сухим сцеплением (DryDual DSG) — особенность этой кпп в том, что это отдельный тип коробок, управляемый с помощью электрических насосов, вместо гидравлических клапанов и поршней. В народе они называются «роботизированными».

 

Среди детских болезней можно отметить:

 

  • Сильный износ двойного сцепления при агрессивной езде;
  • Ранний износ электрического масляного насоса;
  • Неисправность платы мехатроника;
  • Неисправность кинематики (валы, подшипники).

 

Тут же у нас случай особый, приехал автомобиль с кучей ошибок, две из них:

 

-Ошибки по замыканию фрикционной муфты;
-Ошибки по электронной плате мехатроника и леверу селектора.

 

Началась процедура демонтирования DSG 7 0AM с автомобиля, и вот она уже на нашем столе. В результате дефектовки было выявлено, что первичный вал АКПП поврежден роликовым подшипником, расположенным в маховике. Как можно понять из этого, первичный вал отправляется на замену, в добавок к прошлым неисправностям.

Так же напомним, что изначально автомобиль приехал с проблемами по сцеплению, при дефектовке эта проблема однозначно подтвердилась, об этом можно судить по фото ниже:

Невооруженным взглядом виден сильный износ выжимного подшипника сцепления.

Заменён маховик т.к. он был заклинен. Что самое интересное, замену маховика можно было бы обойти стороной, если бы не настолько сильно изношенное сцепление, которое по сути разбило пружину демпфера.

По итогу всех работ, коробка прошла все адаптации, никаких ошибок нету, и авто радует своего владельца! Гарантия 1 год.

Набор замены линз для Volkswagen Tranporter / Multivan Т5 дорестайл

Комплекты для замены штатных линз автомобиля Фольксваген Транспортер, Мультивэн в кузове Т5 дорестайлинг 2003-2009 г.в. с заводскими галогеновыми или ксеноновыми фарами.

Почему плохо светят фары на Фольксваген Т5?

Владельцы автомобилей со штатными линзами зачастую сталкиваются с проблемой потери головного освещения. Заключается она в том, что со временем отражатель заводских линз выгорает, а модуль постепенно перестает освещать дорожное полотно. И простой заменой ламп тут не обойтись. Если Вы поняли, что ближний свет Вас не устраивает, а фары на дороге видно всё тусклее и тусклее, то пора задуматься о замене линз.


Как улучшить свет Фольксваген Т5?

Мы предлагаем не только восстановить заводской свет фар Вашего автомобиля, но и улучшить его с помощью наших фирменных линз. А чтобы проще установить новые модули в штатные отверстия, нами были разработаны специальные переходные рамки под конкретный автомобиль. Задача данных рамок заключается в совмещении заводских отверстий, в которые были закреплены старые линзы с отверстиями новых модулей. Тем самым Вы значительно упрощаете процесс установки, при этом сохраняете положение линз и горизонт, а также не нарушаете надежность конструкции фары.


Какие линзы подойдут для замены?

Наши наборы адаптированы специально для автомобилей Volkswagen Tranporter / Multivan Т5 дорестайл 2003-2009 года выпуска с заводскими галогеновыми ил ксеноновыми фарами. Таким образом комплект выбирается исходя из типа свечения штатных фар и Вашими предпочтениями.

Бигалогеновые модули Hella R H7:

Данный комплект подходит для замены штатных галогеновых линз. Если Вы не хотите переходить на другой тип свечения, а остаться на галогене, то выбирайте его. В набор входит:

  • Бигалогеновые линзы Hella R H7 * 2 шт;
  • Пружина крепления H7 лампы * 2 шт;
  • Проводка для подключения шторки * 2 шт;
  • Переходные рамки * 2 шт;
  • Крепеж.

Биксеноновые модули Hella 3R:

Наша топовая версия модулей Hella 3R поможет выжать максимум из данного типа свечения. Если у Вас заводской ксенон, то лампы и блоки можно оставить, т.к. они совместимы. При штатном же галогене для установки дополнительно потребуется комплект ксенона. В набор входит:

  • Биксеноновые линзы Hella 3R * 2 шт;
  • Патрон крепления лампы D1/D2/D3/D4 * 2 шт;
  • Проводка для подключения шторки * 2 шт;
  • Переходные рамки * 2 шт.
  • Крепеж.

Бисветодиодные модули Vision Bi-Led Advance:

Если Вы хотите перейти на самый современный диодный тип освещения, то выбирайте данный комплект. В линзы уже встроены LED чипы и модули готовы к работе. Никаких дополнительных ламп и блоков не потребуется. В набор входит:

  • Бисветодиодные линзы Vision Advance * 2 шт;
  • Проводка для подключения шторки * 2 шт;
  • Переходные рамки * 2 шт.
  • Крепеж.

Что Вы получаете в результате замены:

Улучшение качества света — высокая прибавка к яркости, а также правильная и четкая СТГ;

Более широкий пучок — Вы повышаете видимость в темное время суток за счет освещения не только своей полосы, но и всего дорожного полотна, а также обочин и съездов с дороги. Лучше видны пешеходы и животные.

Дополнительный дальний свет — все наши линзы имеют шторку управления ближним / дальним светом. При желании ее всегда можно легко подключить.

Надежность — Мы являемся торговой маркой и работаем напрямую с производителем по своему тех. заданию. Это позволяет вести свой дополнительный контроль качества и выбирать материалы, которые используются в изготовлении модулей. Никаких дешевых альтернатив в этом аспекте мы не ищем. Цель — получить максимально эффективную линзу в каждом типе свечения, а клиенту забыть о проблемах освещенности дороги на долгие годы.

Гарантия — Модули нашей фирмы имеют Российский Сертификат Соответствия, который является гарантом качества изделия и его соответствия требованиям национальных стандартов.

VW Multivan T5 Tuning / Фольксваген Мультивэн Т5 Тюнинг

Высокопроизводительные компоненты для тюнинга Фольксваген Мультивэн Т5

Официальный дилер Eurocode Tuning в России предлагает вашему вниманию чип-тюнинг Фольксваген Мультивэн Т5

, турбо-киты и турбины для VW Multivan T5, тюнинг двигателя VW Мультивэн Т5. Снижена цена на отключение вторичных систем, отключение EGR, отключение DPF. У нас вы можете купить тормоза брембо для Фольксваген Multivan T5, выхлопные системы, фильтры нулевого сопротивления AFE, стабилизаторы поперечной устойчивости, компоненты тюнинга подвески, перепрошивку и чип-тюнинг коробок передач, первоклассные оригинальные и неоригинальные колесные диски, оригинальные запчасти для дооснащения Фольксваген Мультивэн Т5, детали интерьера и экстерьера, измерительную аппаратуру и многое другое.

Большинство товаров для тюнинга Фольксваген Мультивэн Т5 в нашем интернет магазине имееют качественные фотографии и подробные описания. Фото тюнинга Multivan T5 доступны в разделе «Проекты».



Каталог комплектующих для тюнинга Фольксваген Мультивэн Т5 по категориям:


Список всех комплектующих для тюнинга VW Multivan T5 2010-2016:

На странице: 200255075100

Сортировка: По умолчаниюНаименование (А -> Я)Наименование (Я -> А)Цена (по возрастанию)Цена (по убыванию)Рейтинг (по убыванию)Рейтинг (по возрастанию)Модель (А -> Я)Модель (Я -> А)

Перепрошивка 7 ступенчатой мокрой коробки передач DQ-500 [0BT / 0BH]. .

25000 р. 18900 р.

Увеличение мощности 2.0TSI до 285 л.с…

29000 р. 20000 р.

Увеличение мощности 1.9TDI до 140 л.с…

18900 р. 14900 р.

Увеличение мощности 2.0FSI до 168 л.с…

18900 р. 14900 р.

Технические характеристики Volkswagen Multivan (Фольксваген Мултиван)

Для просмотра технических характеристик выберите марку и модель автомобиля

Марка *:

МаркаACAcuraAixamAlfa RomeoAlpinaAlpineAMCArgoArielAroAsiaAston MartinAudiAustinAustin HealeyAutobianchiAutosanAviaBarkasBartolettiBAWBedfordBeijingBentleyBlonellBMWBOVABrillianceBristolBugattiBuickBYDCadillacCallawayCarbodiesCaterhamChanaChanganChangFengChangheCheryChevroletChryslerCitroenCizetaCoggiolaColeman MilneDaciaDadiDaewooDAFDaihatsuDaimlerDallasDatsunDe TomasoDeLoreanDerbiDerwaysDFSKDodgeDongFengDoninvestEagleEfiniExcaliburFAWFerrariFiatFiskerFordFotonFreightliner FSOFuqiGac GonowGeelyGeoGMCGonowGreat WallGrozHafeiHaimaHarley-DavidsonHavalHawtaiHindustanHINOHoldenHondaHowoHuangHaiHummerHurtanHyosungHyundaiInfinitiInnocentiInternationalInvictaIran KhodroIrbisIsderaIsuzuIVECOJACJaguarJCBJeepJiangnanJinbeiJMCKawasakiKiaKoenigseggKomatsuKTMLamborghiniLanciaLand RoverLandwindLDVLeaderFoxLexusLifanLincolnLoncinLotusLTILuxgenM1NSKMahindraMANMarcosMarlinMarussiaMarutiMaseratiMaxusMaybachMazdaMcLarenMegaMercedes-BenzMercuryMetrocabMGMinelliMiniMitsubishiMitsuokaMonte CarloMorganNAVECONeoplanNissanNobleNysaOldsmobileOpelOscaPaganiPanozPaykanPeroduaPeugeotPlymouthPontiacPorschePremierProtonPumaQorosQvaleRAFRavonReliantRenaissance CarsRenaultRolls-RoyceRonartRoverSaabSaleenSamandSamsungSantanaSaturnScaniaScionSEATSetraShifengShuangHuanSkodaSMASmartSokonSoueastSpectreSpykerSsangYongStelsSubaruSuzukiSymTalbotTataTatraTeslaTianmaTianyeTofasToyotaTrabantTriumphTVRVauxhallVectorVenturiVolkswagenVolvoVortexWartburgWestfieldWiesmannWulingXin KaiYamahaYuejinZastavaZXБАЗБелАЗБогданВАЗ (Lada)ВИСВТЗГАЗГуранЗАЗЗИЛИЖКАМАЗКрАЗЛиАЗЛуАЗМАЗМосквичМТЗПАЗСеАЗСМЗТагАЗУАЗУралХТЗЧТЗЯВА

Модель *:

Модель AmarokBeetleBoraBrasiliaCaddyCaliforniaCaravelleCiti GolfClasicoCorradoCountry BuggyCrafterDerbyEosFoxGolGolfIltisJettaKarmann GhiaL80LavidaLTLupoMagotanMultivanNew BeetleParatiPassatPassat CCPhaetonPointerPoloQuantumRabbitRoutanSagitarSantanaSaveiroSciroccoSharanSP2SuranTaroTiguanTouaregTouranTransporterType 3UpVentoVoyage

Volkswagen Multivan T5 [рестайлинг] Микроавтобус технические характеристики


Volkswagen Multivan T5 Микроавтобус технические характеристики

Volkswagen Multivan T5 Микроавтобус 4-дв.

технические характеристики

1.9 MT TD (84 л. с.) 2003 2015
1.9 TD MT (105 л. с.) 2003 2015
1.9 MT TD (68 л. с.) 2003 2015
2.0 MT (115 л. с.) 2003 2015
2.4 D MT (75 л. с.) 2003 2015
2. 5 TDI AT (174 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI AT (130 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI MT (174 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI MT (130 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI MT 4Motion (174 л. с.) 2003 2015
2. 5 TDI MT 4Motion (130 л. с.) 2003 2015
2.8 MT (204 л. с.) 2003 2015
3.2 АT (234 л. с.) 2003 2015
3.2 MT 4Motion (234 л. с.) 2003 2015
3.2 V6 MT (234 л. с.) 2003 2015

Volkswagen Multivan T5 Микроавтобус 5-дв.

технические характеристики

1.9 TDI MT (105 л. с.) 2003 2015
2.0 MT (116 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI AT (174 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI AT (131 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI MT 4Motion (131 л. с.) 2003 2015
2. 5 TDI MT (174 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI MT 4Motion (174 л. с.) 2003 2015
2.5 TDI MT (131 л. с.) 2003 2015
3.2 AT (235 л. с.) 2003 2015
3.2 MT 4Motion (235 л. с.) 2003 2015

Volkswagen Multivan T4 Микроавтобус технические характеристики

Технические характеристики Volkswagen Multivan (Фольксваген Мултиван). На этой странице вы найдете характеристики различных модификаций Volkswagen Multivan: типы кузова, год выпуска, клиренс и прочие особенности.

Volkswagen Multivan (T5) | VB-Airsuspension

Пневмоподвеска  Фольксваген Т5 

Multivan/Caravelle/Transporter/California

Полностью автоматическая пневмоподвеска задней оси
VB-NivoAir

 

Предназначена для установки на автомобили Volkswagen T5 (Multivan/Caravelle/Transporter/California), в том числе 4×4.

Артикул: 1900906200
для VW T5
 

Включает в себя пневморессоры 2 Continental, кронштейны для установки, блок компрессора (включая блок клапанов и блок электронного управления), 2 датчика высоты, пневматические трубки, документацию.

 

Полностью автоматическая пневмоподвеска задней оси
VB-FullAir 2C

 

Предназначена для установки на автомобили Volkswagen T5 (Multivan/Caravelle/Transporter/California), в том числе 4×4.

Артикул: 1050906260
для VW T5(2010-)
 

 

Включает в себя 2 пневморессоры Continental, кронштейны для установки, компрессор AMK, ресивер, блок клапанов, блок электронного управления VB-ASCU, 2 амортизатора AL-KO (Германия), 2 датчика высоты, пульт дистанционного управления, пневматические трубки, документацию.

 

Полностью автоматическая пневмоподвеска обеих осей
VB-FullAir 4C

 

Предназначена для установки на автомобили Volkswagen T5 (Multivan/Caravelle/Transporter/California), в том числе 4×4.

Артикул: 1050906462
для VW T5   2,6t — 3,08t (2010-)
Артикул: 1050906472
для VW T5   3,2t Maxi (2010-)
Артикул: 1050906463
для VW T5   2,6t — 3,08t +30mm (2010-)
 
Артикул: 1050906473
для VW T5   3,2t Maxi +30mm (2010-)

 

 

 

Включает в себя 2 передние пневматические стойки AL-KO (Continental), 2 задние пневморессоры Continental, кронштейны для установки, компрессор AMK, ресивер, блок клапанов, блок электронного управления VB-ASCU, 2 задних амортизатора AL-KO (Германия), 4 датчика высоты,  пульт дистанционного управления, пневматические трубки, документацию.

Опция 1: Автогоризонт
Артикул: 1052200400
 

Позволяет насколько это возможно выравнивать автомобиль на неровной поверхности (например, когда оба колеса одной из сторон (осей) автомобиля находятся на бордюре- ниже представлены соответствующие фото).

Опция 2: Блок аварийных клапанов
Артикул: 1052250514
 

Позволяет накачивать воздух в любую из четырех пневморессор системы в ручном режиме штатным компрессором для накачивания шин или стравливать воздух из системы при необходимости. Опция незаменима при неисправностях системы (выход из строя компрессора пневмоподвески, блока клапанов, повреждение датчика (датчиков) высоты, неисправность блока электронного управления). Подкачайте те пневморессоры, где недостаточно воздуха- и в путь! Эвакуатор не нужен! Пока происходит поиск неисправности- автомобиль на ходу.

Опция 3: Блок WAM
Артикул: 1052200047
 

Позволяет управлять всеми опциями пневматической подвески с помощью Вашего мобильного телефона под управлением Android или iOS. Приложение VB-APP можно скачать на Google Play Market или App Store.

VW Multivan VB-FullAir 4C

press to zoom

VW Multivan VB-FullAir 4C

press to zoom

VW Multivan VB-FullAir 4C

press to zoom

VW Multivan VB-FullAir 4C

press to zoom

Пневмоподвеска на Фольксваген Т5
 

Постоянная активная эксплуатация грузопассажирского и грузового транспорта приводит к сложным и дорогостоящим поломкам и преждевременному износу. Для того, чтобы минимизировать износ транспортного средства, рекомендуется использовать пневмоподвеску для Фольксваген Т5 в соответствии с моделью авто. С её помощью можно увеличить дорожный просвет независимо от степени загруженности автотранспорта, исключить появление поперечного и продольного крена, а также пробои подвески, повысить ресурс авто, увеличить тяговую силу.

Предлагаем качественные пневмоподвески на Volkswagen T5 для моделей (Multivan/Caravelle/Transporter/California), включая полноприводные версии. Пневмосистема в нескольких вариациях:

·        Автоматическая версия VB-NivoAir, устанавливаемая на заднюю ось, включая полноприводные. Комплектация состоит из двух пневморессор Continental, элементов и устройств для проведения установки и фиксации, компрессорного и автоматического блока управления и блока клапанов, 2-х индикаторов контроля высоты, пневмотрубок и документов по монтажу и эксплуатации.

·        Автоматическая пневматическая подвеска для Фольксваген Т5 VB-FullAir 2C, устанавливаемая на заднюю ось. Применима к маркам Multivan/Caravelle/Transporter/California, включая полноприводные. Комплект состоит из 2-х пневморессор Continental, элементов и устройств для проведения монтажа и фиксации, нагнетателя АМК, ресивера, компрессорного блока, автоматикиуправления VB-ASCU и блока клапанов, двух амортизаторов AL-KO, 2-х индикаторов контроля подъёма, пульта ДУ, пневмотрубок и документации по установке и эксплуатации.

·        Автоматическая пневматическая подвеска на Volkswagen T5 VB-FullAir 4C, предназначенная для обеих осей. Подходит для (VW T5  2,6t — 3,08t/2,6t — 3,08t  +30 мм (2010-), VW T5  3,2t Maxi/Maxi +30 мм (2010-)), включая 4х4. Комплект состоит из двух передних пневмостоек Continental, 2-х задних пневморессор Continental, элементов и устройств для проведения монтажа и фиксации, нагнетателя АМК, ресивера, автоматики VB-ASCU и блока клапанов, 2-х задних амортизаторов AL-KO немецкого производства, 4-х датчиков контроля высоты, пульта ДУ, пневмотрубок и документов по монтажу и эксплуатации.

Установку можно осуществить самостоятельно или в сервисных центрах. Внесение изменений в конструктив кузова не требуется.

Ремонт двигателя Мультивен Фольксваген Т5 • Технический Центр

VW Multivan 2.5TDI пробег 318 000 км.

Официально, Фольксваген Мультивен (в простонародье – Мультик) – относится к разряду коммерческого транспорта, но ведь зачастую, эти автомобили покупают и частные лица. У таких покупателей, как правило, достаточно большие пробеги, частые грузовые перевозки, или просто большая семья 😉   Так или иначе, но когда речь идет о таком использовании и больших пробегах – при выборе двигателя вопрос встает об экономичности, при сохранении максимальной отдачи от силовой установки.   Таким двигателем является дизельный 2,5 TDI. При малом расходе он обеспечивает достаточную тягу и нормальные режимы эксплуатации автомобиля, НО…

Вымытый антифризом клапан

Как известно, чем меньше объем двигателя – тем меньше его ресурс, при прочих равных условиях. На данном автомобиле проблемы начались на пробеге за 300 000 км. Двигатель начал расходовать антифриз. Как правило, это показательный симптом, говорящий о неисправности двигателя, разумеется, если отсутствует утечка охлаждающей жидкости. В нашем случае проверка показала, что течей нет, соответственно, антифриз уходит непосредственно через камеру сгорания и далее выхлопную систему. В этой связи было принято решение о разборке и дефектовке двигателя, что и было сделано. В результате дефектовки (методом опрессовки) была обнаружена трещина в ГБЦ (головке блока цилиндров), из-за чего и падал уровень антифриза. Также, по итогам замеров – было решено заменить распредвал из-за сильного износа (болезнь этих моторов). Так же, в ходе осмотра и замеров были приговорены к замене впускные и выпускные клапаны, т. к. они имели большую выработку. Все необходимые запчасти и расходники были нами заказаны. Там, где возможно – мы заказали неоригинал хорошего качества. Сэкономить без ущерба качеству – ведь тоже приятно, согласитесь. Головку блока использовали новую, неоригинальную, немецкой фирмы SM. ремонт двигателя мультивен

“Сервисное положение” передней панели

Как только пришли все необходимые запчасти – приступили к ремонту. Говоря о процессе ремонта с начала и до конца – необходимо отметить, что автомобиль немного специфический. Если смотреть на компоновку силового агрегата под капотом – он требует специального “сервисного положения” передней панели для проведения ремонта. К примеру, у автомобиля Фольксваген Туарег этот же самый мотор расположен продольно, а не поперечно, как тут, и не вызывает таких затруднений в работе. Так что, начинаем именно с частичной разборки передней части авто, ну после слива охлаждающей жидкости, конечно.  Итак, какие манипуляции нужно произвести: ремонт двигателя мультивен

  • Слить охлаждающую жидкость
  • Установить рамку радиатора в сервисное положение
  • Снять патрубки наддувочного воздуха между интеркулером и турбонагнетателем, а также между интеркулером и впускным патрубком
  • Снять впускной коллектор ремонт двигателя мультивен
Разборка старой ГБЦ
  • Снять соединительную трубу системы рециркуляции отработавших газов
  • Снять кожух двигателя, а также клапанную крышку
  • Выкрутить болты крепления крышки картера привода ГРМ к головке блока цилиндров
  • Снять тандемный насос
  • Вывернуть крепёжные болты турбонагнетателя/выпускного коллектора
  • Отсоединить все необходимые вакуумные шланги, шланги системы охлаждения и разъёмные соединения от головки блока цилиндров
  • Снять верхний патрубок системы охлаждения
  • Повернуть двигатель в положение ВМТ 1 цилиндра
  • Снять ведущую шестерню распределительного вала ремонт двигателя мультивен

Далее можно приступать к процессу разборки / сборки ГБЦ. Многие детали были заменены на новые. Это, как мы уже отметили выше – распредвал, вкладыши, гидрокомпенсаторы, клапаны и тд. Список деталей большой. Все клапаны тщательно притираются перед сборкой. Сборка производится в обратной последовательности с учетом дополнительных требований завода-изготовителя.

Новая ГБЦ

Надеемся, что этот автомобиль пройдет еще не одну сотню тысяч километров 🙂 ремонт двигателя мультивен

Другие фото ремонта можно посмотреть ниже, в галерее: ремонт двигателя мультивен

ремонт двигателя мультивен

Новый мультивалент т5. Фольксваген Мультиван Т5 (Volkswagen Multivan Highline T5) отзывы

Отзыв Volkswagen Multivan 2.5 TDI (Фольксваген Мультиван) 2008

Первый мультивэн был куплен подержанным в 2001 году. Просто переделан из транспортера. Причём переделан он был неплохо: помимо роскошного дивана, имелось ещё правое вращающееся кресло, откидной стол, окно с антимоскитной сеткой… Но был и недостаток — маломощный бензиновый двигатель . .. Большой расход — разгон более 20 сек.

В начале 2003 года Т-4 были сняты с производства, но в автосалонах они продавались еще до конца года. Решил взять 2,5 литра 100 лошадей на механике.

Тогда они стоили 40 тысяч евро. На пробеге до 70 000 км вообще никаких проблем не доставлял. Потом сразу замена летней резины, передних стоек, рулевых тяг. А после замены подвески (а у официалов все меняли, запчасти тоже свои) по гарантии все переделывали каждые 10-15 тыс. км.Такое ощущение, что на новый автомобиль запчасти ставят с одного конвейера, а на обслуживание — с другого. На 125 000 км вышла из строя помпа, что повлекло за собой капитальный ремонт двигателя. Ремонт обошелся примерно в 90 000 руб. А до поломки несколько раз ездил в салон по причине посторонних звуков из-под капота. Но они ничего не нашли. Больше ничего не ломалось

Сильные стороны:

  • Диван
  • Высокая талия
  • Прибыльность

Слабые стороны:

  • Шумный
  • Сверчки
  • Неуважаемый на дороге, все пытаются обогнать

Мультиван понравился с первого взгляда. Но так уж сложилось, что с ним было связано очень много негатива. О чем хочу сказать в первую очередь, потому что чаще пишут хорошие вещи.

Машину купил в марте 2009 года в Новосибирске у официального дилера.

В августе 2009 года на восьмой тысяче километров пробега в результате поломки коромысла отлетевший осколок пробил блок цилиндров, вытекло масло. Неисправность признали гарантийным случаем и заменили двигатель целиком.Если бы не близкий мне человек, который разбирается в машинах, то я бы поменял машину. Но я убедился, что волноваться не о чем, двигатели меняли как перчатки, иначе мне придется ждать машину еще два месяца.

Сильные стороны:

Слабые стороны:

Обзор Volkswagen Multivan 2.5 TDI (Фольксваген Мультиван) 2003

Практичный автомобиль, удобный для работы и семейного отдыха (особенно на дальние расстояния).Вместительность салона и небольшие габариты (не легковой автомобиль или джип) делают его семейным любимцем. Хорошая обзорность дороги, высокая посадка. Не укачивает детей, собак и взрослых.

Салон: в нем можно жить! При встрече с друзьями — заменяет кафе (столик и 5 посадочных мест).

Двигатель: не капризный, резвый, экономичный. Расход 8л по трассе, 11л — по городу и пробкам. Крейсерская скорость — 120-130 км/ч.

Сильные стороны:

Слабые стороны:

  • Проходимость по бездорожью после дождя отсутствует

Люблю марку Volkswagen, так как езжу на автомобилях этой модели с 1993 года.С этого года и по сей день в эксплуатации Volkswagen DOKA T2 (из Швеции), пробег 550 тыс.км. Ржавчины нет. На первом моторе 1.6 TD проехал 400 тыс.км. Потом заменил на 1.9TD (из Германии) и уже проехал 150 тыс.км. Машина просто чудо! В 1996 году купил подержанный Volkswagen B3, ездил 2 года. Никаких проблем, кроме замены подшипников задних ступиц… Дважды. Продан в 1999г. другу. До сих пор ездит.

В 2003 году я купил Volkswagen Sharan 1. 9 TDI (2001 года выпуска) из Франции. Начальный пробег 70 тыс. км. Никаких проблем, кроме ремонта турбины. Первый раз после 110тыс. Второй после 190тыс. Я сам поменял. В 2007 году продан с пробегом 250тыс. Машина просто чудо!

В 2007г. купил свою первую новую машину. Мультиван Т5 Комфортлайн. Беру из салона. никак нельзя отрегулировать водительское сиденье??? Я не вижу никаких устройств. Неудобно. Наконец я пошел. Приостановки нет.Измерил давление в шинах. Отлично. Накатался, купил зимнюю Нокианскую резину 5. Стало немного лучше. После 35 тысяч зависаний не было — и нет. Это не Комфортлайн. Это даже не Шаран и уж точно не Т2.

Отзыв Volkswagen Multivan 2.5 TDI (Фольксваген Мультиван) 2007

Отзыв Volkswagen Multivan 3.2 V6 4Motion (Фольксваген Мультиван) 2008

Машину купил отец в июле, ездили вместе, проехали 10000 км, проехали почти весь Юг страну в разных режимах и ситуациях, поэтому мне удалось максимально «трезво» охарактеризовать автомобиль, оценив его достоинства и отметить некоторые недостатки, ну обо всем по порядку.

Долго выбирали семейный многофункциональный автомобиль для работы, отдыха, на все случаи жизни. До этого был MB Vito 98 г.в., который сейчас выкатываю, после продажи своего C-Max, жду марта месяца, зарабатываю деньги на мечту. Витек устал ломаться, видимо правильно сказал, что испанский мерседес не очень мерседес, хотя свою нормальную службу отслужил, прошел 320 тыс. км и до сих пор дышит. Из аналогов вижу только VW, остальные меньше и из другой оперы.выбирай двигатель, есть не плохие дизеля, особенно туарегов пятицилиндровый около 174 лошадей и с замечательным моментом 400 ньютонов, но трактор уже был, а живем один раз, хочется разнообразия.

Взяли шестицилиндровый VW Multivan T5 объемом 3,2 литра на 235 лошадей, но с полным приводом и с ручкой. Оснащение топовое хайлайн, нафаршировано богато, начиная от 3-х зонного климат-контроля с управлением для тех, кто сидит сзади, заканчивая сдвижными дверями, в общем все Офигенный замшевый салон алькантра (замша где жопа и зад есть, а боковые валики и подголовники кожаные, двери, обивка тоже кожа), вставки под дерево и фирменная красно-синяя подсветка приборной панели, кнопок, розеток создают первоклассный комфорт. когда сидишь сзади машина ассоциируется с самолетом. Для комфортной жизни есть разные фишки такие как дополнительный подогрев двигателя, электрообогрев стельки лобового стекла, функция использования остаточного тепла и еще куча всего.

Сильные стороны:

Слабые стороны:

  • Высокий расход топлива (20 литров по городу при динамичном движении, или можно увеличить)

Volkswagen Multiven — легендарный микроавтобус, представляющий собой роскошную версию фургона Transporter.Автомобиль последнего поколения производится на немецком заводе, расположенном в Ганновере. На внутренний рынок поставляются модели, производство которых осуществляется на мощностях Калужского предприятия (Россия).

Volkswagen Multivan пользуется большой популярностью у звезд шоу-бизнеса. На этой машине ездили Робби Уильямс, Red Hot Chili Peppers и Крис де Бург. Это связано с высочайшим качеством и надежностью машины. Неслучайно в 2012 году модель была названа «Автомобилем года».

Интересно, что Multiven не пользуется особой популярностью у угонщиков. Так, ежегодно в Москве пропадает не более 3-4 автомобилей этой модели.

Обзор, тест-драйв

История модели и назначение

Volkswagen задумывается о создании минивэна повышенной комфортности на базе классического микроавтобуса начала 1990-х годов. Первое поколение основано на легендарном автомобиле Volkswagen Transporter четвертого поколения в исполнении Caravelle. Премьера Multivan I состоялась в 1996 году. Публика высоко оценила комфортные настройки подвески, дорогие материалы отделки и отличную шумоизоляцию.Вскоре модель вышла на массовый рынок, но купить ее мог далеко не каждый. Поставки в Россию были эпизодическими, так как цены на «Мультивен» оказались заоблачными для отечественного потребителя.

При этом модель позиционировалась как классический семейный транспорт, что отразилось даже в ее названии («Вен» — вместительный, «Мульти» — легко трансформируемый). Основными достоинствами автомобиля являются большая функциональность и комфорт. Volkswagen Multivan унаследовал все достоинства классической версии Transporter, но стал более привлекательным и комфортным.

Дизайн модели напоминал более бюджетного «родственника». Основные черты, характеризующие Volkswagen Multiven, — массивная передняя часть, мощный бампер, классические фары головного света и небольшая решетка радиатора.

В 2002 году дебютировала обновленная версия Multivan. Модель сильно отличалась от своего предшественника. Интерьер и дизайн автомобиля были изменены. Благодаря новым технологиям гарантия от сквозной коррозии увеличена до 12 лет.Специалисты немецкой марки полностью переработали салон автомобиля, сделав его более роскошным. При этом основная черта предыдущего поколения (возможность трансформации) сохранена. Для дополнительного удобства в салоне установили специальные полозья, по которым перемещали задние сиденья, что позволяло максимально быстро менять конфигурацию. Клиентам было предложено 2 варианта автомобиля: пассажирский с местами в несколько рядов и люксовый с местами «лицом к лицу». В салоне также много полочек, ящичков и карманов, а список дополнительных опций у машины увеличился.

Внешний вид нового Volkswagen Multiven стал более дорогим и брутальным. Спереди классическая для немецкой марки решетка радиатора, крупный бампер и фары правильной формы. В более поздних версиях они стали светодиодными. В Европе модель оказалась невероятно популярной, но для россиян автомобиль все равно был очень дорогим. На отечественном авторынке использовались гораздо более популярные версии Volkswagen Multivan.

Машина имеет довольно узкую специализацию и редко используется в коммерческих целях. Volkswagen Multiven – автомобиль для большой семьи, которая любит передвигаться с повышенным комфортом. Транспорт предоставляет большие возможности для трансформации салона и может одновременно вместить пассажиров и достаточное количество груза.

Фото





Технические характеристики

Volkswagen Multivan не такой компактный, как его бюджетный родственник Transporter. Размеры модели:

  • длина — 4892 мм;
  • ширина
  • — 1904 мм;
  • высота — 1970 мм;
  • дорожный просвет – 167 мм;
  • передняя колея – 1628 мм;
  • задняя колея
  • — 1628 мм;
  • Колесная база
  • – 3000 мм.

Количество дверей — 4 или 5, количество мест — 7. Модель имеет внушительный объем багажника — 1210 литров (при желании его можно увеличить до 4525 литров). Снаряженная масса автомобиля 2099-2199 кг, полная масса 2850-3000 кг.Volkswagen Multiven имеет грузоподъемность 766-901 кг.

Динамические характеристики модели:

  • максимальная скорость — 163 км/ч;
  • время разгона до 100 км/ч — 17,8 сек.

Средний расход топлива зависит от типа двигателя:

  1. Дизельная версия: 9,5 л/100 км (городской цикл), 7,7 л/100 км (смешанный цикл), 6,7 л/100 км (шоссе).
  2. Бензиновый двигатель: 13,8 л/100 км (городской цикл), 10,6 л/100 км (смешанный цикл), 8.6 л/100 км (трасса).

Емкость топливного бака равна 80 л.

Двигатель

Volkswagen Multivan поставляется с разными типами силовых установок. Наиболее популярны среди европейцев турбодизели мощностью 180 и 140 л.с. Дизельные агрегаты унифицированы и отличий в их конструкции практически нет. В приводе газораспределительного механизма в этих моторах используется шестерня. Он необслуживаемый и ломается только при прямом попадании пушечного снаряда, что позволяет эксплуатировать машину очень долго.Непосредственный впрыск значительно повышает динамику двигателя.

На российском рынке Volkswagen Multiven доступен с дизельными и бензиновыми 2-литровыми агрегатами мощностью от 102 до 240 л.с. Дизельные версии обеспечивают большую динамику, но менее экономичны.

Наибольшей популярностью у россиян пользуется 2-литровый турбодизель со следующими характеристиками:

  • максимальная мощность — 140 л.с.;
  • максимальный крутящий момент – 220 Нм;
  • количество цилиндров — 4 (рядное расположение).

Устройство

Кузов Volkswagen Multivan тщательно обработан, поэтому проблемы с ним возникают крайне редко. Единственным слабым местом является область на дверных ручках. Через несколько зим покрытие может отслоиться, и внешний вид элемента станет непрезентабельным. Однако стоимость его восстановления невелика.

Для Volkswagen Multiven применили традиционную для продукции марки конструкцию подвески: в передней части — McPherson, в задней — независимая подвеска на косых рычагах.Элементы подвески продаются отдельно от сборочных единиц, что снижает стоимость ремонта и обслуживания. При этом монтажные и геометрические размеры Детали Мультивэна и классического Транспортера Т5 одинаковые, поэтому элементы от дешевого «собрата» подходят для роскошного минивэна. Этот факт особенно важен, так как многие продавцы не хотят загромождать склады покупкой запчастей на Фольксваген Мультивен, пользующихся малым спросом. А вот узлы на Транспортер всегда есть в наличии.Правда, у этой ситуации есть обратная сторона. Комфортабельный Мультивэн после замены пружин амортизаторов вполне может превратиться в «дребезжащую» машину, так как характеристики запчастей будут совершенно другими. В любом случае о замене элементов придется побеспокоиться не ранее, чем через 40 000-50 000 км.

В Volkswagen Multivan используется дисковая тормозная система. Здесь жалобы крайне редки.

Рулевое управление имеет гидроусилитель и является не самым долговечным элементом.На российских дорогах довольно быстро выходят из строя немецкие рулевые рейки. Более 50 000 км данный элемент вряд ли прослужит. Самые большие проблемы возникают с планками, замена которых стоит очень дорого.

Для россиян Volkswagen Multiven предлагается с 2-мя типами коробок передач: 6-ступенчатая механическая коробка передач и 5-диапазонный автомат японской компании Aisin. Трансмиссии не требуют технического обслуживания и заполнены маслом на весь срок службы. Поломки здесь крайне редки. При этом полноприводная версия Multivan 4Motion, где задний мост подключается через Haldex IV, тоже отличается большой надежностью.

По электрической составляющей Volkswagen Multivan отличается не только от отечественных «ГАЗелей», но и от зарубежных «одноклассников». Помимо генератора, лампочек, вентиляторов и множества реле, в машине есть блок управления с высокой вычислительной мощностью.

Компоновка салона Volkswagen Multiven отличается повышенным комфортом. Два передних сиденья, отсутствие центрального тоннеля и ручка управления на приборной панели отличают модель от других.Водитель может легко выйти через пассажирскую дверь или войти назад… Диван внутри трансформируется в кровать, где можно расслабиться. Все это делает автомобиль идеальным для дальних путешествий.

Видео

Заданий, поставленных перед нами:

  • полная шумоизоляция салона
  • Шумоизоляция приборной панели
  • изоляция капота
  • установка аудиосистемы среднего уровня с сохранением головного устройства — RNS510
  • установка преобразователя 12\220 вольт
  • установка охранного комплекса


Всегда нравился салон ФВ своей лаконичностью и какой-то законченностью


поэтому грех менять RNS510, который уже есть у Клиента. Одна из самых удачных стандартных головок, которые мы встречаем… Но… чтобы снять с нее сигнал и не просто тупо его усилить, но и «оживить» в плане качества, аудиосистема будет иметь процессор


в этих местах штатные пищалки


салон-трансформер.

хороший широкий потолок, на котором обычно ставится монитор 15-17 дюймов. Но на этот раз клиент решил отказаться от него.У детей айпады (Стив Джобс постепенно начинает забирать наши рабочие места 🙂



5 дверка — на брутальных амортизаторах. это хорошо


Ну-ну… мы все обсудили. Осталось только замерить машину перед работой.


в принципе неплохо… но… на большой громкости все равно выходит много искажений. Четкой середины практически нет — сказывается 20 см мидбаса в передней двери.И нет низкого баса. Сабвуфера нет. То что видно слева на фото результат «игры» 20см штатной акустики в передние двери



Начинаем разборку. Пойдем!

разбираем весь салон до металла

и снять торпеду



на задних арках есть хороший кусок штатной шумоизоляции. используем в своих целях



обрабатываем торпеду в первую очередь




и все детали которые можно обрабатывать — под торпеду


потом — очередь капота


здесь — только виброизоляция.Селезенку сюда клеить бесполезно — очень быстро отклеится


торпеда стоит на месте и убираем пол



и начать виброизоляцию материалом — TEAC M2







боковины сразу обработаны шумоизоляцией — сплен


задняя дверь обработана по полной программе, так как штатные амортизаторы очень крепкие и хорошо держат дверь. В отличие от автомобиля типа Гранд Старекс, у которого полноценная шумоизоляция 5 дверей вызывает его дальнейшее падение — не выдерживают стандартные патроны


раздвижные двери, обработанные классическим «сэндвичем»


арки… Обычно обрабатываем арки самым толстым виброгасителем — TEAC M4 , Но не в этот раз. Проблема Мультвена в том, что у него очень мало места между кожей и телом. Немцы сократили его до минимума.Поэтому если арки обработать материалом М4, то спленом, то штатные боковые обшивки просто не защелкнутся на штатные заглушки. Поэтому используем — TEAC M2, а сверху кладем стандартную шумоизоляцию.



теперь очередь потолка. Черные полосы — стандартная вибрация.

и вот наш. Есть разница?


потолочная планка

и готовая потолочная планка

а вот и слой шумоизоляции


последнее, но не менее важное, пол



и 5-дверный



после этого ставим на штатный пол и можно спокойно работать внутри салона


передняя часть салона после полной обработки


кидаем «силу» для усилителя и преобразователя. Как всегда, и «плюс», и «минус» берутся только напрямую с аккумулятора. Никаких «минусов» по кузову… не в детском саду


предохранители на две лампы


полностью коммутируемая проводка в районе аккумуляторной батареи


Изначально в этом автомобиле предполагалась аудиосистема среднего уровня на достаточно бюджетной аппаратуре от известных брендов. 5-канальный усилитель Alpine MRX V70, процессор Audison Bit ten, акустика (спереди) — CDT Audio CL62, (сзади) — CDT Audio CL6EX

установка началась именно по этому техническому заданию… Вот например установил усилитель под пассажирское сиденье Alpine MRX V70


над ним, на втором этаже, стоит процессор


такая вот готовая конструкция


Берем сигнал с магнитолы и подаем на высокоуровневый вход процессора. Оттуда он идет по кратчайшим межблочным соединениям к усилителю. От него — к акустике.

Давайте взглянем на штатную акустику, которую мы сняли с этой машины.

У меня по поводу этой акустики всегда одна ассоциация — «бумажные тарелки для шашлыка в уличном кафе» 🙂 они действительно похожи?


а вот и магниты. Вообще смешно


единственная полезная часть штатной акустики (фронтальной) это эти резиновые тоннели. Они размещены между динамиком и обшивкой двери (свободного места там прилично) и не дают акустике играть за обшивку. Мы будем использовать их и в нашей установке.


Штатные места для задней акустики в этом автомобиле находятся за задними юбками. На этих фото — эти места уже доработаны — стоят переходные фанерные кольца


сине-белая проводка — новая топовая проводка от Stinger. Во всех серьезных установках мы используем только лучшие расходные материалы этой марки.


а вот и новая акустика. Только это не то, что мы планировали изначально, а более серьёзно — CDT Audio CL6CX





для этого двери разбираются. с них снята металлическая «карта» со стеклоподъемником


На этом фото хорошо видно как установлены новые подиумы под переднюю акустику. Это было сделано по причине


изначально речь шла о том, что мы пойдем на фронт с достаточно простой акустикой — CDT Audio CL62, но она закончилась на складе в Москве и мы начали прикидывать ближайшие аналоги. В этот момент у нас была дискуссия (по электронной почте) с Клиентом, который интересовался возможностью установки 20 см акустики на фронт.От этого. что реально можно купить в Москве за адекватные деньги, так это Focal Is200. Но это очень простая по звуку и характеристикам акустика. Следующий по возрастанию — Morel Elate 902… но извините, цена….

а посередине ничего нет. И мы настаивали на том, что если ставить нормальный фронт, то он должен быть 16 см. Просто нужно выбрать акустику помощнее и по басовее. В правильно созданной двери она будет играть правильно.

Выбор пал на CDT Audio HD-62. .. Это мощная, басовитая акустика за вполне адекватные деньги.


для установки такой серьезной акустики нужно подготовить плацдарм. У нас это — двойной подиум из фанеры 21 мм. Первое кольцо подиума прикручено к металлу двери. Вторая часть подиума делается из двойного листа фанеры, крепится к первой саморезами и ставится через герметик. Потом вся конструкция снаружи промазывается герметиком… в общем после атомной войны на Земле останутся только тараканы и эти подиумы 🙂


затем на дверь укладывается слой шумоизоляции

кроссоверы от передних колонок устанавливаются прямо в приборную панель

ВЧ динамики — в штатные места

салон начинает приобретать первозданный вид


под водительское сиденье ставим инвертор 12\220 вольт.Чистый синус. Производство Новосибирск. Лучше инверторов

я еще не встречал



питает розетку


закрытый крышкой


под панель управления от Webasto встраиваем кнопку включения инвертора


Параллельно с основными работами начинаем монтаж малого охранного комплекса


Замок капота


клиентский видеорегистратор установлен


и камера заднего вида.

с ней — отдельная шутка.

Клиент хотел картинку с камеры заднего вида. Как-то не особо задумываясь о том, что в машине остается СТАНДАРТНАЯ голова — RNS510, я начал искать камеру под Мультивен. А в Москве их нет. С трудом нашли одну единственную. Мы купили его. Ставить. Протянул всю проводку к магнитоле. И тут у установщиков возникает вопрос — куда с него подавать видеосигнал? На RNS нет видеовхода.

Начинаем «курить» интернет и находим некий комплект (типа обычный), в который входит камера, некий интерфейс, вся проводка. А на форуме находим информацию о том, что за прошивкой RNS и включением видеовхода нужно еще ехать к официалам. Те. по кругу получается более 40 тысяч рублей. для фото при парковке задним ходом.

Клиент говорит — не надо… нам такое счастье не нужно. Я лучше потрачу деньги на автозвук.И после этого меняем наш усилитель Alpine MRX V70 на Alpine PDX V9, что, конечно же, более серьезный аппарат.


и демонтируем установленную камеру и откладываем в сторону до следующего Мультивэна с нестандартной «головой»

Установить 12-вольтовую розетку в передней части салона

обрабатываем все скины





по периметру всех скинов — Антискрип

подключиться к процессору


первоначальная настройка процессора и «запуск» всей системы в первый раз


Тем временем производится изготовление сабвуфера. В этой системе это будет обычный закрытый бокс для 10-дюймовой головы — Ground Zero GZUW10SQ



хорошая голова. Бумажный рассеиватель. Большая подвеска… все как надо



коробку накрываем ковром

и вот он на своем месте.


легко отсоединяется с помощью разъема XLR


окончательная настройка процессора и замер АЧХ


стало


Это было


сейчас разницы не видно.Подождем недельку. Прогреем акустику и будем еще раз тюнинговать и обмерять машину

Работы заняли 8 рабочих дней

© Игорь Кузнецов

  • Фольксваген Т5 Мультиван 2,5 ТДИ
  • ПОЛНАЯ МАССА: 2850 кг.
  • НАЧАЛО ПРОДАЖ: 2004 г.р.
  • ЦЕНА: 2 137 700 руб.

Немецкие автомобили давно снискали славу очень надежных, но их производителям этого мало. Они всегда старались добавить своим автомобилям еще больше практичности и комфорта. Совокупность этих трех факторов мы решили оценить, что называется, «на своей шкуре», отправившись в путешествие из Москвы в Санкт-Петербург на VW Multivan последнего поколения.

Мультивэн Volkswagen , как и все его предшественники, выполнен на базе коммерческих «Транспортеров», в нашем случае — пятого поколения. О популярности VW Transporter не может быть и речи.Это, пожалуй, один из тех автомобилей, которые стали культовыми с момента их выпуска. Машины этой серии пользуются устойчивым спросом и по сей день, что бы ни делали конкуренты.


© Игорь Кузнецов

Новый Мультивэн получил обновленный кузов, современную линейку двигателей и модернизированное шасси. Он стал немного больше и безопаснее.

По внешнему виду Multivan легко отличить от своих собратьев по семейству — Transporter и Caravella. В первую очередь на окрашенные в цвет кузова бамперы, зеркала заднего вида и хромированную окантовку решетки радиатора. Все это придает автомобилю большей солидности, переводя Multivan из обычных коммерческих автомобилей в более престижный класс. От коммерческих автомобилей он унаследовал угловатые формы кузова, в связи с тем, что для коммерческих автомобилей первостепенной задачей является объем перевозимого груза, а не дизайнерские изыски. Но это, пожалуй, единственный незначительный недостаток. В остальном наш Multivan роскошен и престижен. Роскошь чувствуется во внешности, ей придают как литые колесные диски, так и окраска кузова — голубой металлик, имеющий имя собственное — Atlantis.Такое же название было присвоено оборудованию автомобиля. На имидж автомобиля также играет крупная прозрачная оптика фар в сочетании с заводской тонировкой салона. Большой хромированный значок между фарами завершает вышесказанное.


© Игорь Кузнецов

В салоне все сделано если не роскошно, то очень добротно – от фирменной фольксвагеновской сине-красной подсветки приборов до обивки салона. Даже ящики для мелочей изнутри обтянуты бархатной черной тканью, что придает особый шик. Комбинация приборов покажется знакомой тем, кто уже сталкивался с поколением Т5. При этом здесь все сделано с учетом топовой версии, которой является наш Мультиван. Это подчеркивают как широкие алюминиевые вставки, так и такая же светлая окантовка ручек управления климатом и аудиосистемой. Руль обшит тонкой кожей, и держать его в руках гораздо приятнее, чем пластиковый руль на «Транспортере». На руле появились кнопки управления бортовой аудиосистемой и круиз-контролем, имеющим функцию разгона до заданного значения.Мы не раз пользовались этой опцией во время наших путешествий, она очень удобна.
Информационный дисплей расположен в центре комбинации приборов. У него сразу несколько функций. При открытых дверях весь дисплей занимает схематичное изображение микроавтобуса с открытыми дверями дисплея. В движении отображает положение селектора АКПП, температуру на улице, несколько топливных и экономических показателей на выбор от (мгновенный или средний расход топлива, расстояние до заправки), а также дублируется выбранный режим работы аудиосистемы. Все остальное по отношению к «Транспортеру» без изменений. Большие стрелки спидометра и тахометра с левой и правой стороны и два чуть меньших по размеру циферблата, расположенных по центру, показывают температуру охлаждающей жидкости и остаток топлива в баке.


© Игорь Кузнецов

По поводу того же салона , если сказать, что удобно, значит ничего не сказать. Проход к нему открывает большая раздвижная дверь, которых по желанию покупателя может быть две, с левой и с правой стороны.Внутри салона, где только можно, есть ящики, карманы и подстаканники. Все это дополняется откидным столиком, спрятанным в левом борту «Мультивэна». Температура микроклимата салона регулируется отдельно с места водителя и отражается на панели управления в центре потолка. На ровном полу салона расположены четыре направляющие, по которым перемещается как задний большой диван, так и отдельно стоящие передние сиденья. Интерьер нашего автомобиля был изменен, чтобы соответствовать названию отделки салона Atlantis с синими акцентами на сиденьях и по бокам. Раздельные сиденья в салоне идентичны установленным для водителя и пассажира рядом. Удобные, имеют хорошую боковую поддержку и откидные подлокотники, поэтому востребованы в дальних поездках.


© Игорь Кузнецов

Название «Мультивэн» было дано этому микроавтобусу не случайно, а за трансформируемый салон. Дорога в нем пролетает незаметно, отдельно стоящие сиденья поворачиваются на 360 градусов по желанию седоков. На остановках или в пути можно быстро организовать место для «аниматоров» (или просто перекусить).Жаль только, что водительское кресло со стоящим рядом пассажиром нельзя развернуть в получившуюся «каютку». Когда до конца пути еще далеко, задний диван можно трансформировать в большую кровать. Полка за сиденьями будет служить ее продолжением. Также можно сложить стулья, чтобы увеличить получившуюся площадь для сидения, но и без них его длина составляет два метра, чего вполне достаточно. В этом случае температурный комфорт будет поддерживаться автономным отопителем.


© Игорь Кузнецов

Наш Мультивэн был оснащен 5-цилиндровым дизельным двигателем с насос-форсунками объемом 2,5 литра и мощностью 174 л.с. при 3500 мин-1
(не так уж и мало для практически легковой машины) соответствующего нормам Евро 3, и 6-ти ступенчатой ​​АКПП Типтроник. Увидеть под коротким капотом силовой агрегат вряд ли получится. Кроме заливных горловин ничего не бросается в глаза. Моторный отсек упакован очень плотно, что не доставит удовольствия сервисникам.Хотя механикам редко придется заглядывать под капот. Частота К в Европе составляет 30 тыс. км, но в российской действительности, диктующей свои законы, будет 15 тыс. км, что тоже не так уж и часто.

Садимся за руль. Кресло удобное, имеет массу регулировок, в том числе по высоте. Если этого недостаточно, рулевая колонка также имеет регулировки угла наклона и высоты вылета. Заводим двигатель. В салоне об этом можно догадаться только по ожившим стрелкам на панели приборов и показаниям бортового компьютера, начавшего свой отсчет. Элементы управления компактны и интуитивно понятны. Селектор АКП располагался на выступе центральной консоли в непосредственной близости от руля. Такое решение позволило оставить узкий проход между сиденьями водителя и пассажира, через который можно «просочиться» в салон.


© Игорь Кузнецов

Переводим селектор АКПП в положение D и нажимаем педаль газа в пол. Multivan начинает двигаться плавно и динамично одновременно.Как мы поняли позже, автоматическая коробка передач не позволяет машине дергаться, как бы этого ни хотел водитель. В момент начала движения динамику разгона нельзя назвать взрывной, но когда на скорости 80 км/ч при нажатии на педаль акселератора микроавтобус разгоняется с адекватной троганию динамикой, начинаешь в полной мере оценить дизельный двигатель. кроме мощного дизеля активному стилю вождения способствует подвеска, позволяющая проходить относительно крутые повороты, очерчивая траекторию движения словно по велению компаса.Следует отметить, что предоставленный нам автомобиль был оснащен спортивной подвеской с заниженным клиренсом, что позволяло без тени сомнения проезжать самые крутые повороты. Но все же залогом безопасной езды на любой машине являются хорошие тормоза. Multivan поставляется с дисковыми тормозными механизмами на всех колесах, прекрасно дополненными ABS и ESP. Все вышеперечисленное позволяет эффективно останавливать Мультиван на любой скорости. Также отметим акустический комфорт Мультивана: даже на скорости выше 120 км/ч в салоне тишина.

Подводя итоги, хотелось бы еще
сразу вернуться к цене « Мультивана «: За 2 миллиона рублей, что не так уж и мало. За эту сумму можно купить седан представительского класса… Но при этом в «Мультивэне» нет ни кожаной отделки, ни ослепительного лоска. Это просто хорошо упакованный большой минивэн с мощным и экономичным мотором. Однако окончательное решение при выборе автомобиля всегда остается за покупателем. Мы дадим ему право приоритета покупки.

VW T5 Multivan конкуренты:

Citroen Jumper, Ford Tourneo, Mercedes-Benz Viano, Peugeot Boxer, Renault Trafic.

Преимущества и недостатки

Качество изготовления, управляемость сравнимая с легковым автомобилем, мощный и экономичный двигатель.

Угловой, консервативный дизайн, относительно высокая стоимость по сравнению с аналогами этого класса.

Технические характеристики

Фольксваген Т5 Мультиван 2.5 ТДИ

Снаряженная масса, кг

Полная масса, кг

Размеры (длина/ширина/высота), мм

Полезный объем, м3

Двигатель

дизель, 5-цилиндровый, рядный, с непосредственным впрыском через насос-форсунки

Рабочий объем, см 3

Мощность ч. п. при мин -1

Крутящий момент, Нм при мин-1

Трансмиссия

6-ступенчатая АКПП Типтроник

Передний

независимый

независимый

Диск с АБС

Максимальная скорость, км/ч

Результаты испытаний

Название индикатора

Результаты измерений

Масса автомобиля при испытаниях, кг

Расход топлива, л/100 км, при заданных скоростях, км/ч

Вмакс

Максимальная скорость, км/ч

Расход топлива, л/100км в л. Общий режим

при средней скорости, км/ч

10,8 на 41,4

11,5 на 41,0

Последний заднемоторный Т3, правда, пока пропустили, но каждому овощу свое время. Не будем повторяться, а сразу перейдем к сегодняшнему Т5.

Выпуск этой модели стартовал в 2003 году, и только в 2015 году появился ее преемник Т6. Совершенно очевидно, что за 12 лет производства немецкий минивэн постоянно обновлялся.Скажу больше — он эволюционировал. А эволюция человека от питекантропа до Homo, простите, разумного на фоне эволюции Т5 выглядит просто забавной возней в песочнице. Если бы человек попытался догнать в своей эволюции Т5, то мы бы сейчас умели читать мысли, левитировать, пускать огонь из ноздрей и, наверное, даже не смотрели бы «Давай поженимся» и «Дом-2».

Судите сами: в рамках одной модели Volkswagen сменил схему питания с насос-форсунок на Common Rail, с пятиступенчатой ​​механической коробки передач на семиступенчатый робот DSG, с очень близкого к утилитарному коммерческому фургону Т4 на один из самых роскошных минивэнов последних лет с турбированным дизелем мощностью 174 л. с участием. (и даже V-образный бензиновый 3,2 л, 230 л.с.), трехзонный климат-контроль, холодильник и полный привод 4Motion… Проследим основные вехи развития этого автомобиля.

Итак, в 2003 году публике было представлено новое поколение Транспортеров. Он мало чем отличался от Т4: передний привод, грузоподъемность — полторы тонны, поперечное расположение двигателя. С самого начала у Т5 было множество модификаций (около десяти) — от пикапов до дорогих микроавтобусов Caravelle и Multivan.Отличительной особенностью Т5 первых лет выпуска можно назвать использование насос-форсунок во всех дизелях (минимальный объем — 1,9 литра, максимальный — 2,5, все рядные комплектации).

В 2007 году появилась версия с удлиненной колесной базой, а в 2009 году Transporter пережил первый рестайлинг, причем очень серьезный. Помимо внешних отличий (новая головная оптика, решетка радиатора, бампера) автомобиль получил массу недоступного ранее дополнительного оборудования — начиная от датчиков давления в шинах и заканчивая серьезными электронными помощниками водителя. Линейка моторов также стала немного шире.

Спустя три года, в 2012 году, два новых дизеля получили Caravelle, Multivan, Transporter и California. Моторы уже получили топливные насосы высокого давления (ТНВД) и общую топливную рампу. Для новых Мультивэнов уже стали нормой и полный привод, и система старт-стоп, и многое другое. Например, технология DVE (Digital Voice Enhancement), которая позволяет пассажирам разговаривать в разных частях салона, не повышая голоса: сама DVE ретранслировала речь сидящих в автобусе с помощью микрофонов и динамиков.


Сегодня мы прокатимся на далеко не новом Мультивэне — пробег у него 180 тыс. км, а выпущен он в 2005 году. И наша задача не просто проехать на этом автомобиле и рассказать насколько он удобен и красив, а увидеть, какой он может столкнуться человек, желающий купить Мультивэн этого возраста.

Просто и со вкусом

Внешний вид T5 Multivan кому-то может показаться скучным, мол, автобус как автобус. Мне это нравится. Не вызывающе, не громко, с достоинством. Собственно, эмоциональный восторг от внешности всех Транспортеров мог вызвать только Т1, и то через тридцать лет после окончания его производства.

Но в Т5 чувствуется бессмертный дух Фольксвагена, в основном за счет присущей этой марке практичности (да, были такие времена!). Например, обратите внимание на лючок бензобака — его видно за водительской дверью. Его можно открыть только при открытой водительской двери, иначе язык на нем не позволит. В Германии разливают солярку?! Теперь внимательно посмотрим на корпус, будет интересно.


В общем хорошо сохранилась, особенно если не забывать, что машине скоро исполнится 12 лет.И все же есть характерные возрастные дефекты. Например, на задней двери очень заметна коррозия, причем не только вокруг ручки (тут вообще как-то грустно), но и по нижней кромке.


Но особенно плохо досталось порогам — там возраст просто вырывается наружу. Но не будем обвинять в этом Volkswagen, здесь причина более объективного характера. Дело в том, что предыдущий владелец этого автомобиля не слишком трясся над ним, скорее, относился к нему как к потребителю.Машина использовалась активно, много чего на ней возили и иногда ездили по дорогам, где Т5, честно говоря, делать нечего. Отсюда и некоторые повреждения лакокрасочного покрытия, приведшие к коррозии.

1 / 2

2 / 2

Справедливости ради отметим, что все сложности жизни от предыдущего владельца Т5 вынес с честью, и ржавчина на некоторых слегка «побитых» элементах не так страшна. Силовые элементы кузова здесь целы, а те места, которые не ударялись и не терлись о другое железо, ржаветь не собираются.

Однако отметим для себя: для автомобиля любого возраста (и для автобуса в большей степени) кузов необходимо осматривать особенно тщательно, ведь его ремонт может обойтись очень дорого. Ничего смертельно опасного у нас пока нет, хотя нынешний хозяин(заботливый и внимательный) уже готовится перекрасить свой фургон.


Напомню еще один факт: Volkswagen пообещал, что за 12 лет кузов сквозной коррозии не узнает. В этом случае не обманули. Теперь посмотрим, как обстоят дела в салоне.

Откровенно говоря, редко увидишь машину, в которой не знаешь, где лучше сидеть — за рулем или на пассажирском сиденье. Недаром Multivan уверенно лидирует в своем классе по уровню комфорта пассажиров. И хотя у нас не самая люксовая версия, вряд ли найдется человек, который скажет что-то плохое о салоне этого фургона.


Займите хотя бы места. У нас их всего четыре (вместе с передними получается шесть), на заднем ряду — три места, и одно кресло отдельное.И вот тут он самый интересный, потому что он способен вращаться вокруг своей оси на 360 0 . Фиксируется он, правда, только в двух положениях, лицом вперед и назад, боком на ходу сесть нельзя. Но и этого вполне достаточно, чтобы выйти лицом к лицу или сделать самостоятельный выход и оторваться от команды, повернувшись к водителю и переднему пассажиру. И все же первый вариант предпочтительнее: можно расширить стол — и тогда салон приобретает полностью домашний уют (если вы путешествуете с семьей) или становится кабинетом для переговоров (если другого нет).

1 / 2

2 / 2

На потолке перед каждым рядом сидений есть не только настоящая люстра освещения, но и свой климат-контроль. Кстати, интересная деталь: Передние двери оборудованы вентиляторами, которые выдувают воздух из передней панели (от кондиционера) в заднюю часть салона через воздуховоды под обивкой. Для того, чтобы система работала должным образом, двери, конечно же, должны быть закрыты.


Если вы хотите перевезти какой-нибудь длинномерный груз (доски или что-то в этом роде) на Т5, вы можете воспользоваться люками под задним рядом сидений.Если их открыть, то можно дотянуться хотя бы до багажника. Теперь пересядем на водительское место, осмотримся и отправимся в путь.


Каждый раз, когда я сажусь за руль Volkswagen на рубеже 20 и 21 веков, я чувствую себя так, будто третьего января переключаю телеканалы и везде встречаю «Иронию судьбы». Я знаю, что будет дальше, знаю, кто и что сейчас скажет, но выбора нет. Вроде скучно, но иначе быть не должно и быть не может — все устроено как надо.


Панель и кнопки описывать не буду — машина не премьера. Но хотелось бы отметить, что у Т5 есть одна удобная «фишка» — рычаг КПП на приборной панели. Странно, но туда же: даже не снимая руки с подлокотника, можно включить любую передачу, тем более что ход рычага небольшой, а переключатели очень четкие. И даже несмотря на возраст, пластик не сильно изношен и не изношен, на качестве материалов не экономили, хотя приборку богатой не назовешь.И хоть после химчистки на сиденьях остались пятна, ткань за 180 тысяч не отстиралась.

1 / 8

2 / 8

3 / 8

4 / 8

5 / 8

6 / 8

7 / 8

8 / 8

Запускаем двигатель. У нас один из самых интересных — 2,5 литра, пять цилиндров, турбодизель, 174 л. с участием. Звук в салоне почти как у легкового автомобиля, а если включить печку, то его вообще не слышно.Включаем первую передачу и… глохнем. Особенность нашей машины в том, что кто-то отрегулировал сцепление так, что оно схватывает почти в самом низу, причем достаточно резко. Но к этому можно привыкнуть.

Разгон очень резвый, хотя весит машина около двух тонн. И что особенно радует, так это обзор, который, пожалуй, лучше, чем у легкового автомобиля: площадь остекления большая, а боковые зеркала заднего вида безобразно большие, как у грузовика. Красота, одним словом.


Во всем остальном характер движения в пространстве Т5 ничем не отличается от легкового автомобиля.Очень чутко реагирует на педали тормоза, педали газа, на движения руля. Я думаю, что этот автомобиль идеально подошел бы в качестве автомобиля для большой семьи: места в нем много, но габариты небольшие, маневренность просто отличная — парковаться не сложнее, чем на седане.

А вот и настало самое интересное время: дорого ли содержать этот автомобиль и сколько будет стоить его ремонт? Что ж, пришло время дегтя в бочке меда. А может целое ведро.

Дай мне денег!

Расход на 100 км

Расход топлива первый вопрос. И ответ на него прекрасен, как тенор Баскова: по трассе легко уложишься в восемь литров. В городе, конечно, все зависит от характера и особенностей вождения, но в среднем вряд ли будет намного больше 12 литров на сотню. А это очень хорошие показатели для вместительного и достаточно мощного автомобиля. Но не стоит забывать, что он уже проехал почти двести тысяч.А последние километры стоили, увы, недешево.

Начнем с мотора. Как я уже говорил, его особенностью являются насос-форсунки в системе питания. К 160 тысячам они стали потихоньку гнуться. И сколько они стоят? Дилер со скидкой по акции (!) предложил их по 62 тысячи за штуку (их всего пять, по количеству цилиндров). Минимальная цена, по которой они были найдены, составляет 48 тысяч рублей. Кому лень считать, комплект без установки потянул на 240 тысяч рублей.Но Т5 уже хорошо курил, надо было что-то решать. Выручил ремонт имеющихся форсунок — всего 100тыс за все. Но это с учетом того, что самому хозяину пришлось все разбирать и собирать, иначе ремонт обошелся бы еще тысяч в 50. Но в эту цену входило гораздо больше, чем ремонт некоторых форсунок.


При разборе выяснилось, что скоро придется менять гидрокомпенсаторы и, возможно, распредвал.Их заменили заранее, и это правильно по одной простой причине: насос-форсунки находятся под клапанной крышкой, каждая работа с ними связана с ее снятием, а для этого также необходимо снимать коллектор. Везде прокладки, и если каждый раз менять все одноразовое, то к стоимости запчастей придется каждый раз добавлять еще пять тысяч на расходники. Выйдет дорого.

Кстати, выпускной коллектор тоже пришлось поменять — появились микротрещины.А свечи накала — там вообще ни одна не работала.

Еще одна проблема Т5 (и это не только конкретный экземпляр) — проводка. Наше второе сопло периодически отключалось. Причина оказалась в слабом контакте, до которого еще надо добраться (коллектор, крышка клапана…). Клемма сжималась лучше, но специалисту было лень подгонять всю оплетку, пришлось лезть заново (коллектор… ну вы поняли). В общем, здесь если что-то начинать делать, то нужно делать все сразу и только в хорошем сервисе.


И снова слабость — карданный вал… Точнее его подвесные подшипники. Их два, и если средний можно купить (всего за 9,5 тысяч, ничего), то задний продается только с задней частью кардана, а это 84 тысячи. В поисках специалистов по ремонту пришлось ездить без заднего кардана — Т5 с мощным турбодизелем прыгал на переднем приводе по бездорожью слишком весело, так что надо быть осторожным.


К счастью, мы нашли сервис, где смогли отремонтировать все без необходимости загружать полную стоимость всей детали.Но это в большом городе, не стоит об этом забывать. Аналог прослужил менее пяти тысяч километров. Ну вот опять поменяли, пока уже больше 10 тысяч ездит. Может повезет.

А вот шасси пока держатся за работу — ничего не менял. Вроде и КПП, и сцепление — все родное, все без ремонта, в пределах 180тыс.

Брать или не брать?

Каждый может сделать для себя выводы, но нужно понимать: современным коммерческим Фольксвагенам уже далеко до «вечности» своих предков, «прошедших» 500-700 тысяч без особых вложений. На самом деле безаварийная эксплуатация обычно заканчивается на 150 тысячах, после чего нужно либо проводить очень дорогие плановые замены, либо ездить на поломки и молиться, чтобы они не обездвижили машину в самый ответственный момент.

многовалентный T-антиген вакцина на основе группы для группы Streptococcus

, 1, 2 , 3, 4 , 1, 2 , 1, 2 , 1, 2 , 2 , 3 , 1, 2, 5 , 1, 2 , 3 и 1, 2

Jacelyn M.S. Loh

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Школа медицинских наук Оклендского университета, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Центр молекулярных биооткрытий им. Мориса Уилкинса, Окленд, Новая Зеландия

Tania Rivera-Hernandez

3 Австралийский исследовательский центр инфекционных заболеваний и Школа химии и молекулярной биологии, Университет Квинсленда, Сент-Люсия, Квинсленд, Австралия

4 Текущий адрес: Cátedras CONACYT—Unidad de Investigació , Hospital de Especialidades del Centro Médico Nacional Siglo XXI, Instituto Mexicano del Seguro Social, Мехико, Мексика

Reuben McGregor

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Школа медицинских наук, Оклендский университет, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Центр молекулярной биологии Мориса Уилкинса iodiscovery, Окленд, Новая Зеландия

Адрина Хема Дж.

Khemlani

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Школа медицинских наук Оклендского университета, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Центр молекулярных биооткрытий им. Мориса Уилкинса, Окленд, Новая Зеландия

Mei Lin Tay

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Школа медицинских наук Оклендского университета, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Центр молекулярных биооткрытий им. Мориса Уилкинса, Окленд, Новая Зеландия

Аманда Дж.Cork

3 Австралийский исследовательский центр инфекционных заболеваний и Школа химии и молекулярной биологии, Университет Квинсленда, Сент-Люсия, Квинсленд, Австралия

Jeremy M. Raynes

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Медицинский факультет наук, The University of Auckland, Private Bag , Auckland, New Zealand

2 Maurice Wilkins Center for Molecular Biodiscovery, Auckland, New Zealand

5 Текущий адрес: Monash University, Clayton Campus, Melbourne, VIC Australia

Николь Дж.

Moreland

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии Школы медицинских наук Оклендского университета, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Центр молекулярных биооткрытий Мориса Уилкинса, Окленд, Новая Зеландия

Mark J. Walker

3 Австралийский исследовательский центр инфекционных заболеваний и Школа химии и молекулярной биологии, Университет Квинсленда, Сент-Люсия, Квинсленд, Австралия

Thomas Proft

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Медицинский факультет наук, Университет Окленда, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Центр молекулярных биооткрытий Мориса Уилкинса, Окленд, Новая Зеландия

1 Кафедра молекулярной медицины и патологии, Школа медицинских наук, Университет of Auckland, Private Bag , Окленд, Новая Зеландия

2 Морис Wilkins Center for Molecular Biodiscovery, Auckland, New Zealand

3 Австралийский исследовательский центр инфекционных заболеваний и школа химии и молекулярной биологии, Университет Квинсленда, St Lucia, QLD Australia

4 Текущий адрес: Cátedras CONACYT—Unidad de Investigacion Médica en Inmunoquimica, Hospital de Especialidades del Centro Médico Nacional Siglo XXI, Instituto Mexicano del Seguro Social, Мехико, Мексика

5 Текущий адрес: Monash University, Clayton Campus, Melbourne, VIC Australia

Автор, ответственный за переписку.

Поступила в редакцию 6 октября 2020 г .; Принято 19 января 2021 г.

Открытый доступ Эта статья находится под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 International License, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или в любом формате при условии, что вы укажете оригинал. автор(ы) и источник, предоставьте ссылку на лицензию Creative Commons и укажите, были ли внесены изменения. Изображения или другие сторонние материалы в этой статье включены в лицензию Creative Commons на статью, если иное не указано в кредитной строке материала.Если материал не включен в лицензию Creative Commons статьи, а ваше предполагаемое использование не разрешено законом или выходит за рамки разрешенного использования, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя. Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Abstract

Пили стрептококка группы А (GAS) представляют собой открытые на поверхности структуры, участвующие в адгезии и колонизации хозяина во время инфекции. Основным белковым компонентом пилуса GAS является Т-антиген, который мультимеризуется, образуя стержень пилуса.В настоящее время нет лицензированных вакцин против инфекций, вызванных GAS, и Т-антиген представляет собой привлекательную мишень для вакцинации. Мы создали поливалентную вакцину под названием TeeVax1, рекомбинантный белок, состоящий из слияния шести доменов Т-антигена. Вакцинация TeeVax1 продуцирует опсонофагоцитарные антитела у кроликов и обеспечивает защитную эффективность у мышей от инвазивного заболевания. Два дополнительных рекомбинантных белка, TeeVax2 и TeeVax3, были сконструированы для охвата 12 дополнительных Т-антигенов.Комбинация TeeVax1–3 вызывала сильный гуморальный ответ у кроликов, который был перекрестно-реактивным к полной панели из 21 Т-антигена, что, как ожидается, обеспечит более 95% покрытия вакциной. Эти результаты демонстрируют потенциал вакцины на основе Т-антигена для предотвращения инфекций GAS.

Тематические термины: Бактериальные инфекции, Белковые вакцины, Бактерии

Введение

Streptococcus pyogenes , также известный как Streptococcus группы A (GAS), является патогеном человека, который, по оценкам, ежегодно вызывает более 500 000 смертей1 . Приблизительно одна треть этих смертей вызвана тяжелыми инвазивными инфекциями, в то время как большинство связано с ревматической болезнью сердца (РБС). Тяжелому поражению сердца, наблюдаемому у пациентов с РБС, обычно предшествуют эпизоды острой ревматической лихорадки (ОРЛ), аутоиммунного заболевания, вызванного множественными нелечеными поверхностными инфекциями ГАС, такими как фарингит или импетиго 2 4 . В то время как показатели ОРЛ и РБС снижаются в большинстве регионов с высоким уровнем дохода, они продолжают вызывать значительную заболеваемость и смертность в регионах с низким уровнем дохода.Непропорционально высокие показатели также зарегистрированы в общинах коренных народов в таких странах, как Новая Зеландия и Австралия 5 . Крупномасштабные программы лечения болей в горле для контроля ОРЛ в Новой Зеландии оказались ресурсоемкими и вряд ли будут устойчивыми в странах с низким доходом 6 , и вакцина рассматривается как осуществимое и экономически эффективное решение для контроля заболевание долгосрочное 7 , 8 .

В разработке вакцины GAS относительно немного продуктов, и только четыре из них основаны на M-белке и прошли I фазу клинических испытаний 9 12 .М-белок является основной детерминантой вирулентности ГАС, и данные свидетельствуют о том, что иммунный ответ, вызванный М-белком, может быть защитным 13 , 14 . Однако при наличии более 200 аллельных вариантов гена emm (кодирует белок М) достижение широкого охвата в странах с низким доходом и высоким разнообразием штаммов остается препятствием для вакцин, специфичных для М-типа 15 , 16 . Подход, основанный на консервативной области C-повтора М-белка, устраняет проблему покрытия, хотя остаются вопросы относительно доступности этой области для иммунной системы, особенно у штаммов с капсулой из гиалуроновой кислоты 17 .Большие неочищенные дозы неочищенной вакцины с М-белком были связаны с развитием ОРЛ в исторических испытаниях 18 , 19 , что еще больше затруднило разработку вакцины.

Волосы GAS представляют собой привлекательную альтернативную мишень для вакцинации. Пили представляют собой поверхностные факторы вирулентности, участвующие в адгезии, колонизации и уклонении от иммунитета 20 23 . Было показано, что нацеливание на пилус посредством вакцинации с использованием рекомбинантных белков ворсинок эффективно против типоспецифической инфекции на животных моделях 24 , 25 .Однако необходимо решить проблему антигенной изменчивости белков ворсинок среди различных штаммов GAS. Основной белковый компонент пилуса, Т-антиген, полимеризуется с образованием удлиненного (> 1 мкм в длину) волокна ворсинки (рис. , S1 ). Т-антиген экспрессируется в виде белка-предшественника с сигналом секреции на N-конце и доменом сортазы на С-конце. Кодируемая опероном сортаза распознает сортазаный домен и ковалентно связывает до  ~ 100 мономерных Т-антигенов 25 , 26 . Большинство Т-антигенов имеют двухдоменную белковую структуру, хотя известно или предполагается, что некоторые Т-антигены являются трехдоменными (Т6, Т2, Т23, Т25) или четырехдоменными (Т4) белками 26 , 27 . Исторически сложилось так, что Т-антиген использовался в качестве дополнительного инструмента серотипирования для классификации штаммов GAS. Хотя совсем недавно, с переходом к рутинному генотипическому emm -типированию клинических изолятов, находящихся в обращении, относительно небольшое количество эпидемиологических исследований использовали Т-серотипирование.Во многих случаях T-тип (или tee -генотип) сильно сцеплены с 28 и tee -тип можно вывести из emm -типа — например, все штаммы emm -1 несут тройник -1 ген. Однако, поскольку типы tee гораздо менее разнообразны, чем типы emm , один и тот же тип tee может быть обнаружен во множестве штаммов типа emm , например. tee- 11 встречается у штаммов emm- 11, 44, 78 и 89.Основываясь на выводах крупномасштабных эпиднадзорных исследований emm -типа в странах с высоким уровнем дохода, tee -1, 12 и 28 являются преобладающими tee типами в обращении, тогда как в странах с низким уровнем дохода доминирование типа не очевидно (рассмотрено Efstratiou et al. 29 ). Предыдущий анализ последовательности гена tee примерно из 100 изолятов GAS выявил 18 различных tee -типов и три подтипа, практически без вариаций внутри каждого tee -типа 30 .Ожидается, что включение всех 18 Т-антигенов в вакцину обеспечит охват штаммов GAS, циркулирующих во всем мире, более чем на 95 %.

Используя биоинформатический подход, мы разработали рекомбинантную мультивалентную белковую вакцину путем слияния иммуногенных доменов различных вариантов Т-антигена. Первый из трех предложенных нами слитых белков, названный TeeVax1, содержит белковые домены из шести вариантов Т-антигена (T28. 1, T12, T1, T5, T18.1, T11). Мы демонстрируем, что иммунизация TeeVax1 может генерировать опсонофагоцитарные антитела и обеспечивает защитную эффективность на мышиной модели инвазивного заболевания GAS.Еще два поливалентных рекомбинантных белка (TeeVax2 и TeeVax3) были сконструированы аналогичным образом, охватывая оставшиеся основные клады Т-антигена (рис. S2 ). Мы показываем, что иммунизация смесью всех трех белков TeeVax может генерировать широко перекрестно-реактивные антитела против полной панели из 21 известного Т-антигена. Важно отметить, что все три белка TeeVax являются растворимыми и могут быть получены в E. coli с высоким выходом, что делает их подходящими для крупномасштабного производства вакцин.

Результаты

Клонирование и экспрессия TeeVax1

Предыдущий биоинформатический анализ двухдоменных Т-антигенов выявил высококонсервативное ядро, украшенное поверхностными вариациями по всей длине белка, без видимой доминирующей области 31 . Поэтому мы разработали поливалентную вакцину, которая включала целые домены Т-антигена, чтобы максимизировать как включение защитных эпитопов, так и выход белка. TeeVax1 был сконструирован как слияние чередующихся N- и C-концевых доменов из шести различных двухдоменных Т-антигенов, чтобы напоминать гибридное ворсинчатое волокно.Праймеры были разработаны на основе предсказанных границ для каждого домена, полученного из этих моделей 31 . Сайт рестрикции BamHI был сконструирован на 5′-конце, а сайты рестрикции BglII и EcoRI были сконструированы на 3′-конце каждого домена, введенного с помощью праймеров для ПЦР (таблица S2 ). BamHI и BglII имеют совместимые когезивные концы, которые не могут быть повторно расщеплены после лигирования. Это позволило последовательно добавить каждый домен tee в вектор, выполнив соответствующие гидролизы BamHI/EcoRI и BglII/EcoRI (фиг.). TeeVax1, состоящий из T28.1N, T12C, T1N, T5C, T18.1N и T11C, клонированных последовательно и экспрессированных в E. coli BL21(DE3) pLysS, продуцирует белок с прогнозируемой молекулярной массой 102 кДа. Очистка с помощью аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом и эксклюзионной хроматографии привела к конечному выходу примерно 10 мг/л бактериальной культуры (рис. C).

Строительство TeeVax1. ( A ) Структурная модель TeeVax1, показывающая предсказанные слияния N-концевого (красный) и C-концевого (синий) доменов шести Т-антигенов.( B ) Стратегия клонирования, используемая для соединения последовательных доменов Т-антигена из разных штаммов. Сайты рестрикции в скобках обозначают необратимое лигирование с использованием совместимых липких концов. ( C ) 12,5% SDS-PAGE анализ TeeVax1, окрашенного красителем кумасси синим. L = Стандартная белковая лестница, 1 = После аффинной хроматографии с никелем, 2 = После эксклюзионной хроматографии.

Реакции антител после иммунизации кроликов TeeVax1

Очищенный TeeVax1 использовали для иммунизации кроликов. Антисыворотки, собранные через 2 недели после последней бустерной иммунизации, были протестированы с помощью ELISA против панели из 21 полноразмерного рекомбинантного Т-антигена (рис.  ). Специфические ответы IgG в сыворотке на родственные Т-антигены (T28.1, T12, T1, T5, T18.1, T11) находились в диапазоне 10–280 мкг/мл. Самый низкий ответ наблюдался в отношении Т11, а самый высокий – в отношении Т5. Обширная перекрестная реактивность наблюдалась в отношении T3.1, при этом средние концентрации IgG составляли 200 мкг/мл. Также наблюдалась перекрестная реактивность к близкородственным Т-антигенам, Т28.2 и Т18.2.Перекрестная реактивность ко всем другим Т-антигенам была низкой или не определялась.

Реакция сывороточных антител на TeeVax1 у кроликов. Сыворотки кроликов (n = 2), иммунизированных TeeVax1, анализировали методом ELISA. Концентрацию IgG к каждому конкретному Т-антигену интерполировали с использованием известного стандарта. Каждая биологическая повторность нанесена на график (кружки), а полоса представляет собой среднюю концентрацию IgG. Серые столбцы представляют Т-антигены, присутствующие в конструкции TeeVax1, а белые столбцы представляют Т-антигены, отсутствующие в TeeVax1.

Анализ опсонофагоцитарного уничтожения (OPKA) антисыворотки TeeVax1

Антисыворотку кролика тестировали на опсонофагоцитарную функцию в стандартизированном OPKA против GAS SF370 (штамм M1T1). Антисыворотку кролика, иммунизированного белком М1, использовали в качестве положительного контроля, а предиммунную сыворотку — в качестве отрицательного контроля. Лизинг опсонофагоцитов был значительно выше при использовании сыворотки против Т1 по сравнению с анти-М1 и анти-TeeVax1, с индексами опсонофагоцитов 4802, 131 и 119 соответственно (рис.).

ОПКА антисыворотки кролика. Сыворотки иммунизированных кроликов тестировали в ОПКА против GAS SF370 (штамм М1Т1). ( A ) Репрезентативный линейный график, показывающий КОЕ, восстановленные после инкубации с серийными разведениями антисыворотки M1 (синий), T1 (зеленый) и TeeVax1 (красный). Незакрашенные символы указывают на преиммунную сыворотку, сплошные символы указывают на иммунную сыворотку. Разведение сыворотки, приводящее к гибели 50%, обозначается точкой, в которой кривая пересекает пунктирную линию, используемую для расчета опсонического индекса.( B ) Опсонический индекс (n = 2), рассчитанный на основе разведения сыворотки, приводящего к 50%-ному уничтожению. Каждый биологический повтор нанесен на график (круги), а полоса представляет собой среднее значение. Заштрихованные столбцы обозначают преиммунную сыворотку (Pre), сплошные столбцы обозначают иммунную сыворотку. Пунктирная линия обозначает предел обнаружения.

Эффективность вакцины у гуманизированных мышей, трансгенных по плазминогену

Эффективность вакцины оценивали с использованием модели инвазивного заболевания на гуманизированных трансгенных по плазминогену мышах 32 .Мышей иммунизировали TeeVax1, T1-антигеном, M1-белком или PBS (фиктивным) и подкожно заражали штаммом GAS 5448 (изолят инвазивного заболевания M1T1, оптимизированный для этой модели). Перед контрольным заражением специфические ответы сывороточных антител измеряли с помощью ELISA. Все вакцинации давали значительно более высокие титры IgG по отношению к их родственному антигену (антигенам) по сравнению с контрольными мышами, иммунизированными PBS (рис. A). У мышей, иммунизированных TeeVax1, наблюдался сильный гуморальный ответ на все шесть Т-антигенов, содержащихся в слитом белке.Не было существенной разницы между титрами анти-Т1 у мышей, иммунизированных полноразмерным Т1, по сравнению с TeeVax1. После заражения GAS за выживаемостью следили в течение 10 дней. Все вакцинные антигены обеспечивали значительную защиту от заражения (p < 0,01) по сравнению с мышами, иммунизированными PBS (рис. B). Полноразмерный M1-белок был способен обеспечивать почти полную защиту с 90% выживаемостью, как наблюдалось ранее 33 , 34 . И TeeVax1, и T1 обеспечивали умеренную защиту с выживаемостью 33% и 50% через 10 дней соответственно.

Модель испытания мыши. Мышей Alb PLG1 иммунизировали внутримышечно. с M1/квасцы (n = 10), T1/квасцы (n = 10), TeeVax1/квасцы (n = 9) или PBS/квасцы (n = 10). Через две недели после последней иммунизации всех мышей заражали подкожно. с ГАЗ 5448 и под наблюдением в течение 10 дней. ( A ) Титры антител из сыворотки иммунизированных мышей на 35-й день перед контрольным заражением измеряли с помощью ELISA против родственных антигенов. Кружки = титр от мышей, иммунизированных PBS/квасцами, треугольники = соответствующие мыши, иммунизированные антигеном.( B ) Анализ выживаемости Каплана-Мейера иммунизированных мышей, зараженных GAS 5448. Все группы были значительно защищены от заражения по сравнению с контролем PBS (логарифмический критерий Мантеля-Кокса).

Создание TeeVax2 и TeeVax3

Доказательства защиты с помощью TeeVax1 требуют создания двух дополнительных белков TeeVax, TeeVax2 и TeeVax3, для расширения охвата вакцинных штаммов. TeeVax2 был разработан и сконструирован аналогично TeeVax1 с чередующимися N- или C-концевыми доменами из предсказанных двухдоменных Т-антигенов (T9, T3. 2, Т8, Т10, Т14, Т7) , и оканчивающийся полноразмерным Т13 (как N-, так и С-концевые домены). T13 был включен в его полноразмерную форму, поскольку терминация TeeVax2 с помощью T13N или T13C приводила к заметному снижению экспрессии слитого белка в E. coli (данные не показаны). Выход TeeVax2 был примерно в три раза выше, чем TeeVax1 при 30 мг/л бактериальной культуры. TeeVax3 содержал домены из генетически дивергентных трехдоменных (Т6, Т2, Т23, Т25) и четырехдоменных (Т4) Т-антигенов.Кристаллическая структура T6 из штамма GAS MGAS10394 (PDB ID 4P0D) 27 использовалась для моделирования и прогнозирования доменных границ T2, T23 и T25. T4 был смоделирован на RrgB (PDB ID 3RPK) 35 , пилин из четырех доменов, который формирует костяк пилюса у S. pneumoniae 35 . Средний домен из T6, T2, T23 и T25 и N-концевой домен из T4 последовательно клонировали в pPROEX-HTb. Предыдущий структурный анализ Т-антигенов показал, что антигенные эпитопы обнаруживаются по всей поверхности структуры Т-антигена без какого-либо явного доминантного домена 27 , 31 . Однако для T4 был выбран N-концевой домен, поскольку предыдущие исследования RrgB показали, что N-концевой домен обладает такой же защитой, как и полноразмерный белок 35 . Поскольку соединение последовательных средних доменов не слишком напоминало нативную структуру трех- или четырехдоменных Т-антигенов, между каждым доменом, кодируемым в праймерах ПЦР, используемых во время ПЦР, была введена короткая линкерная последовательность, состоящая из пяти аминокислот (GSGSG). усиление. Предполагалось, что это обеспечит некоторое разделение между отдельными доменами и будет способствовать сворачиванию белка.Выход TeeVax3 был примерно в два раза выше, чем TeeVax1 при 20 мг/л бактериальной культуры.

Реакции антител на TeeVax2, TeeVax3 и TeeVax1–3

Очищенные белки TeeVax использовали по отдельности или в комбинации для иммунизации кроликов. Антисыворотки, собранные через 2 недели после последней бустерной иммунизации, измеряли с помощью ELISA против панели из 21 полноразмерного рекомбинантного Т-антигена (рис.  ). Антисыворотка от TeeVax2 продуцировала специфические антитела к Т-антигенам, содержащимся в TeeVax2, а также существенные перекрестно-реактивные антитела к другим двухдоменным Т-антигенам, включая Т3.1, Т11, Т12, Т18 и Т28. Антисыворотка TeeVax3 показала небольшую перекрестную реактивность или ее отсутствие в отношении двухдоменных Т-антигенов, но была реактивна в отношении Т-антигенов, содержащихся в TeeVax3. Важно отметить, что антисыворотка кроликов, иммунизированных смесью всех трех объединенных белков TeeVax (TeeVax1–3), реагировала на полную панель из 21 Т-антигена, включая три подтипа (T3.1, T18.2, T28.2). не включен ни в одну из отдельных вакцин. Специфические концентрации IgG в сыворотке варьировали от 10 до 1200 мкг/мл к отдельным Т-антигенам.Предиммунная сыворотка содержала  < 1 мкг/мл специфичных к Т-антигену IgG (данные не показаны). Также было показано, что антисыворотка TeeVax1-3 способна обнаруживать нативный ворсинок на поверхности GAS SF370 с помощью проточной цитометрии (рис. , S3, ).

Антиген-специфический ответ IgG белков TeeVax. Сыворотку кроликов, иммунизированных TeeVax1 (n = 2), TeeVax2 (n = 1), TeeVax3 (n = 1) или эквимолярную концентрацию всех трех (TeeVax1–3) (n = 1), анализировали методом ELISA. Концентрация IgG к каждому конкретному полноразмерному Т-антигену была интерполирована с использованием известного стандарта и представлена ​​в виде тепловой карты.Штриховка обозначает гомологичные вакцинные антигены.

Обсуждение

GAS является одной из десяти основных причин смерти от инфекционных агентов во всем мире, и потребность в вакцине против GAS очевидна. Недавний всплеск серьезных инвазивных инфекций 36 и сообщения о частых неудачах лечения, несмотря на то, что GAS остается чувствительным к пенициллину 37 39 , привлекли внимание к достижению этой цели. Существует несколько причин, по которым разработка вакцины против GAS до сих пор затруднена, в том числе неполное понимание того, как GAS вызывает иммунопатологические состояния, такие как ARF 40 . Например, неясно, в какой степени определенные факторы вирулентности могут вызывать выработку перекрестно-реактивных антител к человеческим белкам. Таким образом, использование цельных микроорганизмов нецелесообразно, и в центре внимания находятся вакцины с четко определенными субъединицами.

Здесь мы описываем типоспецифичную вакцину, основанную на поверхностных ворсинках GAS. Ранее мы показали, что нацеливание на пилюс может генерировать защитные иммунные ответы в модели колонизации мышей 24 .Однако необходимо учитывать антигенную вариацию, хотя и гораздо более ограниченную по сравнению с М-белком. Многовалентный подход, описанный здесь, широко нацелен на основной белок остова (Т-антиген) пилуса GAS из нескольких штаммов. Целые белковые домены (~ 140 аминокислот каждый) были генетически слиты с образованием рекомбинантной растворимой химеры волокна GAS пилуса, названной TeeVax. TeeVax1, белок, охватывающий шесть серотипов Т-антигенов, продуцировал ответы антител против гомологичных антигенов, а также перекрестно-реактивные антитела к дополнительным трем гетерологичным Т-антигенам. Реакция на T5 была самой высокой, когда у кроликов продуцировалось более 200 мкг/мл специфического IgG. Точно так же высокие уровни антител наблюдались по отношению к антигену T3.1, что неудивительно, учитывая, что он имеет С-концевой домен, идентичный T5 30 . Самый низкий ответ был на T11, что, вероятно, связано с положением этого домена на карбокси-конце слитого белка. Сравнительно аналогичное снижение гуморального ответа на Т4-домен, расположенный на карбокси-конце в TeeVax3, также наблюдалось, что, возможно, свидетельствует об усиленном расщеплении/деградации протеазами хозяина после инъекции.Это наблюдение аналогично наблюдениям, наблюдаемым в вакцинах с поливалентным М-белком, и потенциально может быть решено путем повторной итерации того же домена на N-конце или добавления защитного «кэпа» белка на С-конце 41 . Ответ на Т13, расположенный на карбокси-конце в TeeVax2, не снижался, возможно, из-за общих перекрестно-реактивных эпитопов с Т3. 2 31 ; или потому, что полноразмерный T13 был включен в эту химеру, а не в отдельный домен, и, таким образом, может служить его собственным защитным колпачком.

Опсонофагоцитарную функцию кроличьей антисыворотки оценивали против штамма M1T1 SF370 с использованием HL-60 OPKA 42 . Антисыворотка TeeVax1 давала такой же опсонический индекс, что и антисыворотка к белку M1, который был скромным, но находился в диапазоне, указанном в других исследованиях с использованием этого анализа 42 , 43 . Антисыворотка T1 давала гораздо более высокий опсонический индекс, который ожидался из-за более высокой концентрации специфических антител, присутствующих в антисыворотке T1 (примерно в 20 раз выше, данные не показаны).Однако мы не можем исключить возможность того, что антитела к С-концевому домену Т1 (не входящему в состав TeeVax1) являются лучшими опсонинами. Способна ли антисыворотка TeeVax оказывать опсонофагоцитарную функцию на другие штаммы GAS, является предметом будущих исследований.

У мышей не наблюдалось различий между титрами Т1-специфических антител при иммунизации Т1 и TeeVax1. Это привело к аналогичному уровню защиты в модели заражения мышей Alb PLG1 инвазивного заболевания.Иммунизация TeeVax1 или T1 значительно улучшала выживаемость мышей в этой модели. Полноразмерный M1-белок был лучше для предотвращения инвазивного заболевания в этой модели, однако было показано, что антитела, вызванные вакцинацией M-белком, перекрестно реагируют с человеческими белками (обзор Guilherme et al. 44 ), повышая серьезные опасения по поводу безопасности. О таких опасениях не сообщалось в отношении Т-антигена. В соответствии с этим мы провели поиск гомологии между белками TeeVax и протеомом человека, используя базу данных Universal Protein Resource (UniProt) 45 .Сообщалось о менее чем 35% идентичности совпадений последовательностей, и не было идентифицировано ни одного белка человеческого сердца.

Сообщения о защите вакцин-кандидатов от GAS на мышиных моделях сильно различаются, при этом недавние исследования показали, что вакцины могут быть защитными в одной, но не в другой модели 33 . Та же самая модель инвазивного заболевания мышей Alb PLG1, используемая здесь для оценки TeeVax, ранее использовалась для оценки других вакцин-кандидатов. Следует отметить, что антиген J8 с адъювантом квасцами не обладал защитным действием в этой модели 33 , равно как и Combo#5 с адъювантом квасцами (содержащий пять консервативных антигенов GAS: стрептолизин O, Streptococcus pyogenes , протеиназа клеточной оболочки, аргининдеиминаза). , триггерный фактор и стрептококковая пептидаза С5а группы А), или кандидаты на углеводную вакцину группы А 33 .Это подчеркивает потенциальное защитное преимущество TeeVax-alum по сравнению с этими вакцинами против инвазивных заболеваний. Тем не менее, защита с использованием этих вакцин-кандидатов наблюдалась в других моделях инфекций животных 33 , 43 , 46 , 47 .

Мы показали, что TeeVax1–3 имеет широкий охват в отношении панели из 21 Т-антигена, представляющей  > 95% всех известных на сегодняшний день Т-серотипов GAS. Концентрации сывороточных антител к специфическим Т-антигенам во многих случаях были выше в комбинации TeeVax1-3 по сравнению с соответствующим одиночным белком TeeVax, вероятно, из-за перекрестно-реактивных эпитопов 31 .Воронка GAS может распространяться дальше от клеточной поверхности, чем другие белки GAS, наиболее вероятно, проникая в капсулу гиалуроновой кислоты, из-за мультимерной природы Т-антигена, который формирует волокно ворсинки 48 . Это делает его привлекательной мишенью для вакцин из-за легкой доступности для иммунной системы. Хотя нам еще предстоит протестировать TeeVax1–3 в модели заражения in vivo, это исследование ясно демонстрирует потенциал создания широко защитной вакцины против GAS путем нацеливания на пили.

Методы

Этика животных

Процедуры с использованием гуманизированного плазминогена Мыши Alb PLG1 были проведены в соответствии с Австралийским кодексом по уходу и использованию животных в научных целях в Университете Квинсленда, Австралия, и одобрены Университетом Квинсленда Комитет по этике животных (SCMB/136/16/NHMRC/BREED и SCMB/140/16/NHMRC). Все другие эксперименты на животных проводились в отделении Вернона Янсена в Оклендском университете, Новая Зеландия, и были одобрены Комитетом по этике животных Оклендского университета.Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями ARRIVE.

Бактерии и условия культивирования клеток

Штаммы GAS, использованные в этом исследовании, перечислены в дополнительной таблице 1 . GAS культивировали в бульоне Тодда Хьюитта с добавлением 0,5% дрожжей (THY) при 37 °C в статических условиях. E. coli DH5α и BL21(DE3) pLysS (Novagen) культивировали в LB при 37°C при 200 об/мин. Твердую питательную среду готовили путем добавления 1,5% бактериологического агара. При необходимости в среду для выращивания добавляли 30 мкг/мл хлорамфеникола и 50 мкг/мл ампициллина.

Клонирование и экспрессия белков

Гены tee или emm1 амплифицировали из геномной ДНК между предполагаемым сайтом расщепления сигнального пептида и мотивом сортазы с помощью ПЦР с использованием высокоточной полимеразы iProof (Bio-rad) с праймерами, перечисленными в Дополнительном документе. Таблица 2 . Гены клонировали в вектор экспрессии pPROEX-HTb (ThermoFisher) или модифицированный вектор pET-32a (Novagene) с сайтом расщепления 3c и трансформировали в E. coli BL21(DE3) pLysS.Для создания мультивалентных конструкций TeeVax домены последовательно клонировали с использованием совместимых выступающих частей, полученных рестрикционным расщеплением BamHI и BglII. Белки экспрессировали путем индукции 0,1 мМ изопропил-β-d-1-тиогалактопиранозида (IPTG) при 18 °C в течение 18 часов. Все белки очищали в соответствии с ранее опубликованными протоколами 27 , 31 . Это включало никель-аффинную хроматографию с использованием либо колонки HisTrap HP (GE Healthcare) на AKTA FPLC, либо гравитационной колонки с Ni 2+ -NTA сефарозой 6, быстрым потоком (GE Healthcare) с использованием буферов, содержащих до 250 мМ имидазола в 20 мМ фосфатно-натриевый буфер, рН 7.4/300 мМ NaCl/1% глицерина. Вторую стадию очистки проводили с помощью эксклюзионной хроматографии с использованием колонки Superdex 200 с увеличением 10/300 GL (GE Healthcare) в 20 мМ фосфатно-натриевом буфере, рН 7,4/300 мМ NaCl/1% глицерина.

Иммунизация кроликов

Новозеландских белых (NZW) кроликов иммунизировали подкожно на 0, 14 и 28 дни 100 мкг рекомбинантного белка, эмульгированного 1:1 с неполным адъювантом Фрейнда (IFA). Эвтаназию проводили путем инъекции пентобарбитала.Антисыворотку собирали на 42-й день.

Проточная цитометрия

GAS SF370 выращивали до ранней экспоненциальной фазы (OD 600 нм  = 0,2), затем блокировали PBS/5 мМ EDTA/3% фетальной бычьей сыворотки (FBS). Затем GAS ресуспендировали в кроличьей сыворотке 1:10, разведенной в промывочном буфере (PBS/5 мМ EDTA/1% FBS), и инкубировали на льду в течение 30 минут. Для обнаружения использовали козий антикроличий IgG, конъюгированный с Alexa Fluor 647 (Life Technologies) в разведении 1:100. Всего было получено 10 000 событий с использованием проточного цитометра BD LSRII (BD Biosciences).

Иммуноферментный анализ (ELISA)

Планшеты MaxiSorp (Nunc) покрывали 1 мкг/мл полноразмерного Т-антигена в PBS в течение ночи при 4 °C. В лунки с покрытием добавляли разбавленную антисыворотку и инкубировали в течение 3 ч при комнатной температуре. Лунки промывали фосфатно-солевым буфером/0,05% твин-20 (PBS-T) с последующей инкубацией с козьим антикроличьим IgG-HRP (ThermoFisher) в течение 1 часа. Лунки промывали PBS-T и инкубировали со 100 мкл 3,3,5,5-тетраметилбензидина (ThermoFisher).Развитие окраски останавливали с помощью 100 мкл 1 М соляной кислоты. Поглощение при 450 нм определяли с помощью устройства для чтения планшетов с несколькими метками EnSpire (Perkin Elmer). Для кроличьей антисыворотки концентрации антител интерполировали из стандартной кривой, построенной с использованием аффинно-очищенных анти-Т-антигенных антител известной концентрации. Для мышиной антисыворотки (день 35) конечные титры определяли как минимальное разведение сыворотки выше контроля (абсорбция разведения 1:100 доиммунизированной сыворотки + 3-кратное стандартное отклонение).

Анализ опсонофагоцитарного уничтожения (OPKA)

OPKA проводили аналогично ранее описанным 42 , 49 с использованием штамма M1T1 SF370. Клетки промиелоцитарного лейкоза человека (HL-60) дифференцировали путем инкубации в 0,8% диметилформамиде (ДМФА) при 37 °C с 5% CO 2 в течение 3 или 4 дней. Клетки HL-60 соответствовали критериям приемлемости для дифференцированного фенотипа (> 55% CD45, < 12% CD71, < 10% мертвых клеток) по оценке проточной цитометрии, а затем были разведены в опсонизирующем буфере (5% об./об. инактивированной нагреванием FBS ( Хайклон), 0.1% масс./об. желатина (Sigma) в сбалансированном солевом растворе Хэнкса (HBSS) с Ca/Mg) до 1 × 10 7 клеток на мл. GAS SF370 промывали и разводили в опсонизирующем буфере до  ~ 1,2 × 10 5 КОЕ/мл и 10 мкл бактериальной суспензии инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре, при 700 об/мин, с 20 мкл серийно разведенной инактивированной нагреванием сыворотки. . Предварительно разведенный комплемент крольчат (10 мкл) и дифференцированные клетки HL-60 (40 мкл) добавляли к каждому разведению сыворотки и инкубировали в течение 60 минут при 37 °C с 5% CO 2 при 700 об/мин. Затем планшеты помещали на лед на 20 минут и по 10 мкл из каждой лунки наносили на чашки с агаром THY. На каждую чашку наливали верхний слой агара (THY, 0,75% масс./об. бактериологического агара, 0,005% хлорида 2,3,5-тетрафенилтетразолия (Sigma)) и инкубировали чашки в течение ночи при 37 °C с 5% CO 2 . Количество выживших колониеобразующих единиц (КОЕ) подсчитывали на автоматическом счетчике колоний ProtoCOL3 (Synbiosis). Разведение сыворотки, приводящее к гибели 50%, используется для расчета опсонического индекса (OI).Программное обеспечение Opsotiter использовалось для расчета OI и уровня неспецифического уничтожения (NSK) 49 . OPKA соответствовали всем критериям приемлемости: неспецифическое уничтожение < 35% и максимальное уничтожение иммунных сывороток > 70%. Анализы проводили в двух биологических повторах с использованием одних и тех же образцов кроличьей антисыворотки.

Модель инвазивного заболевания на мышах

Трансгенных гуманизированных мышей с плазминогеном (n = 10), гетерозиготных по гену плазминогена человека ( Alb PLG1), иммунизировали внутримышечно 30 мкг белка, адсорбированного на квасцах (Alhydrogel [2%]; Brenntag) на дни 0, 21 и 28. Образцы сыворотки брали перед каждой иммунизацией и на 35-й день. Одна мышь из группы, иммунизированной TeeVax1, была исключена из контрольного заражения из-за неродственного выпадения прямой кишки. На 41-й день мышам подкожно вводили 1,3 × 10 8 КОЕ штамма GAS 5448, как описано ранее 50 , 51 , и отслеживали выживаемость в течение 10 дней. Эвтаназию проводили путем удушения CO 2 .

Статистический анализ

Весь статистический анализ был выполнен с использованием программного обеспечения GraphPad Prism.Значимость определяли с помощью обычного однофакторного ANOVA с тестом множественных сравнений Тьюки, p < 0,05. Анализ выживаемости сравнивали с использованием логарифмического критерия Мантеля-Кокса.

Дополнительная информация

Благодарности

Это исследование было поддержано грантами Фонда сердца Новой Зеландии, Совета по исследованиям в области здравоохранения Новой Зеландии (HRC 15/172) и Центра Мориса Уилкинса.

Вклад авторов

Т.П. задумал стратегию TeeVax; Дж.Л. и Т.П. спроектировали и изготовили конструкции TeeVax; Н. М. разработал и руководил ОПКА и вестерн-блоттингом; Т.Р.Х. и MW разработали модель мыши и контролировали ее; JL, RM, MT, TRH, AK, AC, JR провели эксперименты и собрали данные; Дж.Л., Р.М., Н.М., Т.П. проанализировали данные; Дж. Л. написал статью; Все авторы участвовали в редактировании и рецензировании статьи.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Сноски

Примечание издателя

Springer Nature остается нейтральной в отношении юрисдикционных претензий в опубликованных картах и ​​институциональной принадлежности.

Дополнительная информация

Онлайн-версия содержит дополнительные материалы, доступные по адресу 10.1038/s41598-021-83673-4.

Ссылки

1. Carapetis JR, Steer AC, Mulholland EK, Weber M. Глобальное бремя стрептококковых заболеваний группы А. Ланцет Инфекция. Дис. 2005; 5: 685–694. doi: 10.1016/S1473-3099(05)70267-X. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]2. О’Салливан Л., Морленд Н.Дж., Уэбб Р.Х., Аптон А., Уилсон Н.Дж. Острая ревматическая лихорадка после группы A Streptococcus pyoderma и группы G Streptococcus pharyngitis .Педиатр. Заразить. Дис. Дж. 2017; 36: 692–694. doi: 10.1097/INF.0000000000001558. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]4. Картикеян Г., Гильерме Л. Острая ревматическая лихорадка. Ланцет. 2018; 392: 161–174. doi: 10.1016/S0140-6736(18)30999-1. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]5. Секелер М.Д., Хок Т.Р. Мировая эпидемиология острой ревматической лихорадки и ревматической болезни сердца. клин. Эпидемиол. 2011;3:67–84. doi: 10.2147/CLEP.S12977. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]6. Джек С.Дж. и др.Первичная профилактика ревматизма в 21 веке: оценка национальной программы. Междунар. Дж. Эпидемиол. 2018;47:1585–1593. doi: 10.1093/ije/dyy150. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]7. Стир А.С. и др. Состояние исследований и разработок вакцин против Streptococcus pyogenes . вакцина. 2016; 34: 2953–2958. doi: 10.1016/j.vaccine.2016.03.073. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 8. Морленд, штат Нью-Джерси, и др. Работа над вакциной против стрептококка группы А: отчет о совместном семинаре Trans-Tasman.вакцина. 2014; 32:3713–3720. doi: 10.1016/j.vaccine.2014.05.017. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]9. Пастураль Э. и др. Безопасность и иммуногенность 30-валентной стрептококковой вакцины на основе белка М у здоровых взрослых добровольцев: рандомизированное контролируемое исследование фазы I. вакцина. 2020; 38: 1384–1392. doi: 10.1016/j.vaccine.2019.12.005. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 10. Котлофф К.Л. и соавт. Безопасность и иммуногенность рекомбинантной мультивалентной стрептококковой вакцины группы а у здоровых взрослых: исследование фазы 1.ДЖАМА. 2004; 292: 709–715. дои: 10.1001/jama.292.6.709. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 11. Макнейл С.А. и др. Безопасность и иммуногенность 26-валентной стрептококковой вакцины группы А у здоровых взрослых добровольцев. клин. Заразить. Дис. 2005;41:1114–1122. дои: 10.1086/444458. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 12. Секулоски С. и др. Оценка безопасности и иммуногенности вакцины-кандидата против стрептококка группы А (MJ8VAX) в рандомизированном клиническом исследовании. ПЛОС ОДИН. 2018;13:e0198658. doi: 10.1371/журнал.пон.0198658. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]13. Smeesters PR, McMillan DJ, Шрипракаш К.С. Стрептококковый М-белок: очень универсальная молекула. Тенденции микробиол. 2010;18:275–282. doi: 10.1016/j.tim.2010.02.007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 14. Лэнсфилд РЦ. Современные знания о типоспецифических М-антигенах стрептококков группы А. Дж. Иммунол. 1962; 89: 307–313. [PubMed] [Google Scholar] 15. Giffard PM, Tong SYC, Holt DC, Ralph AP, Currie BJ. Опасения по поводу эффективности вакцины Streptococcus pyogenes на основе 30-валентного М-белка в регионах с высоким уровнем ревматической болезни сердца. PLoS Негл. Троп. Дис. 2019;13:e0007511. doi: 10.1371/journal.pntd.0007511. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]16. Уильямсон Д.А. и соавт. Сравнительный анализ М-белка Streptococcus pyogenes от фарингита и кожных инфекций в Новой Зеландии: значение для разработки вакцины. Заражение BMC. Дис. 2016;16:561. doi: 10.1186/s12879-016-1891-6. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]17. Sandin C, Carlsson F, Lindahl G. Связывание белков плазмы человека с белком Streptococcus pyogenes M определяет расположение опсонических и неопсонических эпитопов.Мол. Microbiol. 2006; 59: 20–30. doi: 10.1111/j.1365-2958.2005.04913.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 18. Massell BF, Honikman LH, Amezcua J. Ревматическая лихорадка после стрептококковой вакцинации. Отчет о трех случаях. ДЖАМА. 1969; 207: 1115–1119. doi: 10.1001/jama.1969.031501

007. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 20. Эббот Э.Л. и др. Пили опосредуют специфическую адгезию Streptococcus pyogenes к миндалинам и коже человека. Клеточная микробиология. 2007; 9: 1822–1833. doi: 10.1111/j.1462-5822.2007.00918.х. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 21. Манетти АГ и др. Streptococcus pyogenes pili способствуют адгезии клеток глотки и образованию биопленки. Мол. Microbiol. 2007; 64: 968–983. doi: 10.1111/j.1365-2958.2007.05704.x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 22. Чен Ю.Х. и соавт. Пили T4 способствуют фенотипам колонизации и уклонения от иммунитета неинкапсулированного M4 Streptococcus pyogenes . мБио. 2020 г.: 10.1128/mBio.01580-20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 23.Tsai JC, Loh JM, Clow F, Lorenz N, Proft T. Стрептококк группы A серотипа M2 pilus играет роль в адгезии клеток-хозяев и уклонении от иммунитета. Мол. Microbiol. 2016 г.: 10.1111/mmi.13556. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 24. Loh JMS, Lorenz N, Tsai CJY, Khemlani AHJ, Proft T. Вакцинация слизистых оболочек пили из Streptococcus группы A, экспрессированного на Lactococcus lactis , вызывает защитные иммунные реакции. науч. 2017;7:7174. doi: 10.1038/s41598-017-07602-0. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]25.Мора М. и др. Стрептококки группы А продуцируют пилусоподобные структуры, содержащие защитные антигены и Т-антигены Лансфилда. проц. Натл. Акад. науч. США. 2005; 102:15641–15646. doi: 10.1073/pnas.0507808102. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]26. Канг Х.Дж., Кулибали Ф., Клоу Ф., Профт Т., Бейкер Э.Н. Выявлены стабилизирующие изопептидные связи в структуре пилуса грамположительных бактерий. Наука. 2007; 318:1625–1628. doi: 10.1126/science.1145806. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 27. Янг П.Г. и соавт.Структурная консервативность, изменчивость и иммуногенность пилина остова Т6 серотипа М6 Streptococcus pyogenes . Заразить. Иммун. 2014; 82: 2949–2957. doi: 10.1128/IAI.01706-14. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

28. Bessen, D.E. In Streptococcus pyogenes : Basic Biology to Clinical Manifestations (eds Ferretti, JJ et al. ) (2016).

29. Efstratiou, A. & Lamagni, T. In Streptococcus pyogenes : От основ биологии до клинических проявлений (ред. Ferretti, J.J. и др. ) (2016).

30. Steemson JD, et al. Исследование генов bp/tee из изолятов стрептококка клинической группы А в Новой Зеландии — значение для разработки вакцины. Дж. Мед. Microbiol. 2014;63:1670–1678. doi: 10.1099/jmm.0.080804-0. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 31. Янг П.Г. и соавт. Т-антигены стрептококков группы А имеют высококонсервативную структуру, скрытую под гетерогенной поверхностью, что имеет значение для разработки вакцин. Заразить. Иммун. 2019 г.: 10.1128/IAI.00205-19. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]32. Сан Х. и др. Плазминоген является критическим фактором патогенности хозяина для стрептококковой инфекции группы А. Наука. 2004; 305:1283–1286. doi: 10.1126/science.1101245. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 33. Ривера-Эрнандес Т. и соавт. Различная эффективность свинцовых вакцин-кандидатов против стрептококка группы А и полноразмерного белка М в моделях кожных и инвазивных заболеваний. мБио. 2016 г.: 10.1128/mBio.00618-16. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 34.Ривера-Эрнандес Т. и соавт. Вакцино-индуцированный ответ типа Th2 защищает от инвазивной инфекции Streptococcus группы A в отсутствие опсонизирующих антител. мБио. 2020 г.: 10.1128/mBio.00122-20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]35. Патерсон Н.Г., Бейкер Э.Н. Структура полноразмерного основного пилина из Streptococcus pneumoniae : значение для образования изопептидной связи в грамположительных бактериальных пилях. ПЛОС ОДИН. 2011;6:e22095. doi: 10.1371/journal.pone.0022095.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]36. Лински Н.Н. и соавт. Появление доминирующего токсигенного клона M1T1 Streptococcus pyogenes во время повышенной активности скарлатины в Англии: популяционное молекулярно-эпидемиологическое исследование. Ланцет Инфекция. Дис. 2019;19:1209–1218. doi: 10.1016/S1473-3099(19)30446-3. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]37. Disney FA, ​​Hanfling MJ, Hausinger SA. Лоракарбеф (LY163892) против пенициллина ВК при лечении стрептококкового фарингита и тонзиллита.Педиатр. Заразить. Дис. Дж. 1992; 11: С20–С26. doi: 10.1097/00006454-1901-00004. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 38. Гиллеспи Ш. Неэффективность пенициллина при Streptococcus pyogenes глоточной инфекции. Ланцет. 1998; 352:1954–1956. doi: 10.1016/s0140-6736(05)61327-x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 39. Пичичеро М.Э. Растущая частота неудач лечения пенициллином при стрептококковом тонзиллофарингите группы А: новая роль цефалоспоринов? Педиатр. Заразить. Дис.Дж. 1991; 10: S50–55. doi: 10.1097/00006454-19
01-00011. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]41. Дейл Дж.Б. Мультивалентная вакцина против стрептококка группы А, предназначенная для оптимизации иммуногенности шести тандемных фрагментов белка М. вакцина. 1999; 17: 193–200. doi: 10.1016/s0264-410x(98)00150-9. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]42. Джонс С. и др. Разработка анализа опсонофагоцитарного уничтожения стрептококков группы А. вакцина. 2018;36:3756–3763. doi: 10.1016/j.vaccine.2018.05.056. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]43.Ривера-Эрнандес Т. и соавт. Экспериментальная вакцина против стрептококка группы А, которая уменьшает фарингит и тонзиллит в модели приматов, отличных от человека. МБио. 2019 г.: 10.1128/mBio.00693-19. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]44. Guilherme L, Kalil J, Cunningham M. Молекулярная мимикрия в аутоиммунном патогенезе ревматической болезни сердца. Аутоиммунитет. 2006; 39:31–39. doi: 10.1080/080500484674. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]46. Batzloff MR, et al. Защита от стрептококка группы А путем иммунизации J8-дифтерийным анатоксином: Вклад J8- и дифтерийного анатоксина в защиту.Дж. Заразить. Дис. 2003; 187:1598–1608. дои: 10.1086/374800. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]47. ван Зорге Н.М. и соавт. Классический антиген Ланцфилда стрептококка группы А является детерминантой вирулентности, имеющей значение для дизайна вакцины. Клеточный микроб-хозяин. 2014; 15:729–740. doi: 10.1016/j.chom.2014.05.009. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]48. Рейнс Дж. М. и соавт. Белковые адгезины как вакцинные антигены для стрептококков группы А. Патог. Дис. 2018 г.: 10.1093/femspd/fty016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]49.МакГрегор Р., Джонс С., Джереми Р.М., Голдблатт Д., Морленд Н.Дж. Анализ опсонофагоцитарного уничтожения для оценки антисыворотки к вакцине против стрептококка группы А. Методы Мол. биол. 2020;2136:323–335. doi: 10.1007/978-1-0716-0467-0_26. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]50. Ривера-Эрнандес Т., Уокер М.Дж. Гуманизированная мышиная модель с плазминогеном для изучения инвазивного заболевания стрептококком группы А. Методы Мол. биол. 2020;2136:309–316. doi: 10.1007/978-1-0716-0467-0_24. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]51. Уокер М.Дж. и соавт.ДНКаза Sda1 обеспечивает давление отбора для переключения на инвазивную стрептококковую инфекцию группы А. Нац. Мед. 2007; 13: 981–985. doi: 10.1038/nm1612. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно.Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в cookie-файлах может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

патентов переданы ID Biomedical Corporation of Washington

Номер патента: 7270827

Abstract: Предложены композиции и способы получения и применения терапевтических составов поливалентных гибридных полипептидов, содержащих иммуногенные пептиды белков М различных серотипов стрептококков группы А и антитела к ним.Также предусмотрены нуклеиновые кислоты, кодирующие такие гибридные полипептиды. Композиции гибридных полипептидов можно использовать, например, в способах лечения или профилактики микробной инфекции и индукции защитного иммунного ответа с широкими защитными опсоническими антителами в отсутствие тканевых перекрестно-реактивных антител.

Тип: Грант

Подано: 28 октября 2002 г.

Дата патента: 18 сентября 2007 г.

Правопреемники: Исследовательский фонд Университета Теннесси, ID Biomedical Corporation of Washington

изобретателей: Марк А.Реддиш, Мэри ЧаоХонг Ху, Майкл А. Уоллс, Джеймс Б. Дейл

Многовалентный смешанно-металлический стратегия для односмысленного каркаса Chalcogenide Chall-Cu + -In-Blusted Cluster Cluster Clucoze

, связанные с этим понятия

, связанные с ним

купругиотермано-органические каркас-компонентные декстросекалькогенгнеконцеицииМЕТАЛатегории.

.

COVID-19

Коронавирусы включают большое семейство вирусов, вызывающих обычную простуду, а также более серьезные заболевания, такие как продолжающаяся вспышка коронавирусной болезни 2019 (COVID-19; официально известная как 2019-nCoV).Коронавирусы могут передаваться от животных к человеку; симптомы включают лихорадку, кашель, одышку и затрудненное дыхание; в более тяжелых случаях инфекция может привести к смерти. Этот канал освещает недавние исследования COVID-19.

Бластомикоз

Бластомикоз Грибковые инфекции, распространяющиеся при вдыхании спор Blastomyces dermatitidis. Узнайте о последних исследованиях грибковых инфекций бластомикоза здесь.

Комплекс ядерных пор при БАС/ЛВД

Изменения в ядерно-цитоплазматическом транспорте, контролируемом комплексом ядерных пор, могут быть вовлечены в патомеханизм, лежащий в основе множественных нейродегенеративных заболеваний, включая боковой амиотрофический склероз и лобно-височную деменцию.Вот последние исследования комплекса ядерных пор при ALS и FTD.

Применение молекулярного штрихового кодирования

Концепция молекулярного штрихового кодирования заключается в том, что каждая исходная молекула ДНК или РНК прикрепляется к штрих-коду с уникальной последовательностью. Чтения последовательностей с разными штрих-кодами представляют разные исходные молекулы, в то время как считывания последовательностей с одинаковым штрих-кодом являются результатом ПЦР-дупликации одной исходной молекулы. Узнайте о последних исследованиях в области молекулярного штрихового кодирования здесь.

Синдром хронической усталости

Синдром хронической усталости представляет собой заболевание, характеризующееся необъяснимой инвалидизирующей усталостью; патология которого до конца не изучена.Узнайте о последних исследованиях синдрома хронической усталости здесь.

Эволюция плюрипотентности

Плюрипотентность относится к способности клетки развиваться в три первичных слоя зародышевых клеток эмбриона. Этот материал посвящен механизмам, лежащим в основе эволюции плюрипотентности. Вот последнее исследование.

Эффект положения Разнообразие

Эффект положения Разнообразие возникает, когда ген инактивируется из-за его расположения вблизи гетерохроматиновых областей внутри хромосомы.Ознакомьтесь с последними исследованиями вариативности эффекта положения здесь.

Агонисты рецепторов STING

Стимуляторы генов IFN (STING) представляют собой группу трансмембранных белков, которые участвуют в индукции интерферона типа I, важного для врожденного иммунного ответа. Стимуляция STING была активной областью исследований в области лечения рака и инфекционных заболеваний. Вот последнее исследование агонистов рецептора STING.

Микробициды

Микробициды представляют собой продукты, которые можно наносить на слизистые оболочки влагалища или прямой кишки с целью предотвращения или, по крайней мере, значительного снижения передачи инфекций, передающихся половым путем.Вот последние исследования микробицидов.

связанных бумаг

Manolis J ManosMercouri G Kanatzidis

Полная сменная ложа из жемчужного проса

Тяги, Б.Р. и Сингх, Р.Б. (1974) Полная сменная ложа из жемчужного проса. Труды Индийской национальной академии наук, 40 (4). стр. 359-362.

PDF — Опубликованная версия
Только для исследователей ICRISAT

Аннотация

При скрещивании Pennisetum typhoides линий Т1-7, Т1-3, Т2-4, Т5-4 и Т5-6 были получены квадриваленты, шестиваленты и декаваленты.Гамма-облучение этих линий и их скрещиваний давало в М1-М3 квадриваленты, октаваленты, декаваленты и мультиваленты с участием всех 14 хромосом. У гетерозигот по обмену стерильность пыльцы увеличивалась по мере увеличения числа вовлеченных хромосом и достигала 99,9% в случае вовлечения всех 14 хромосом

Тип изделия: Статья
Принадлежность автора: Департамент генетики и селекции растений, Fac.Agric., Банарасский индуистский университет, Варанаси, Индия
Субъекты: Улучшение урожая
Подразделения: Просо
Вносящий пользователь: Мистер Б. Кришнамурти
Дата депонирования: 25 апр 2012 03:25
Последнее изменение: 25 апр 2012 03:26
URI: http://eprints.icrisat.ac.in/id/eprint/4825

Действия (требуется вход)

Посмотреть товар

Деградация компонентов оболочки клетки-хозяина во время проникновения вируса ~ ViralZone

В начале инфекционного процесса бактериальные вирусы обычно сталкиваются с проникновением через сложную оболочку клетки-хозяина. Грамотрицательная бактериальная оболочка обычно включает клеточную мембрану, тонкую периплазматическую пептидогликановую клеточную стенку, покрытую внешней мембраной, содержащей липополисахариды (ЛПС).Напротив, оболочка грамположительных бактерий не имеет внешней мембраны, но имеет гораздо более толстый пептидогликановый слой, содержащий гликополимеры клеточной стенки. Кроме того, эти структуры клеточной оболочки могут быть окружены другими защитными структурами, такими как капсульные полисахариды (например, α2,8-связанная полисиаловая кислота (PSA), гиалуроновая кислота (HA)), белки S-слоя или муколовые кислоты.

Бактериальные вирусы должны иметь возможность проникать через все эти слои. Вирионы обладают необходимой ферментативной активностью для перфорации слоев капсулы, слизи и пептидогликана своего конкретного хозяина.Связывающие ЛПС вирионы обычно разрушают эти цепи полисахаридов после прикрепления.

Вирус Семья Бактерии-хозяева Тип компонента поверхности Фермент, разрушающий фаг арт.
Фаг φ92 Миовирусы E.coli (K1, K5, K92), штаммы Salmonella ПСА, капсульный Эндосиалидаза gp143
Фаг K1A Podoviridae Кишечная палочка ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг K1E Podoviridae Кишечная палочка ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг K1F Podoviridae Кишечная палочка ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг 63D Сифовирусы ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг K1-5 Podoviridae Кишечная палочка ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг CUS-3 Podoviridae Кишечная палочка ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг ПТ-6 неклассифицированный Синегнойная палочка Альгинат, капсульный Альгинат-лиаза
Фаг h5489A неклассифицированный Пиогенный стрептококк HA, капсульный Гиалуронидаза
Фаг 370.1 Сифовирусы Пиогенный стрептококк HA, капсульный ХилР1, ХилР2, ХилР3
Фаг h20403 неклассифицированный Пиогенный стрептококк HA, капсульный Гиалуроноглюкозаминидаза
Фаг AF Podoviridae Pseudomonas putida EPS, капсульный ЭПС-гидролаза
Фаг P27 Salmonella typhimurium ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг 9NA Salmonella typhimurium ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг КБ-1 Salmonella typhimurium ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг Дет7 Миовирусы Salmonella typhimurium ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг Sf6 Podoviridae Шигелла флекснери ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг ε15 Podoviridae ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг HK620 Podoviridae Кишечная палочка H ЛПС Эндо-N-ацетилглюкозаминидаза хвостового шипа
Фаг GA-1 Podoviridae Бациллы G1R Пептидогликан gp3
Фаг SPβ Сифовирусы Bacillus subtilis Пептидогликан Ёми
Фаг SPO1 Миовирусы Bacillus subtilis Пептидогликан
Фаг SPP1 Сифовирусы Bacillus subtilis Пептидогликан
Фаг M2 Podoviridae Bacillus subtilis Пептидогликан gp3
Фаг φ29 Podoviridae Bacillus subtilis Пептидогликан gp3
Фаг PRD1 Тективирусы Кишечная палочка Пептидогликан стр.7
Фаг T3 Podoviridae Кишечная палочка Пептидогликан gp16
Фаг K1-5 Podoviridae Кишечная палочка Пептидогликан orf35
ПСА, капсульный Эндосиалидаза
Фаг N4 Podoviridae Кишечная палочка Пептидогликан
Фаг Т4 Podoviridae Кишечная палочка Пептидогликан gp5
Фаг Т5 Сифовирусы Кишечная палочка Пептидогликан Pb2
Фаг C1 Podoviridae Кишечная палочка Пептидогликан
Фаг φ949 Lactococcus lactis Пептидогликан
Фаг φ31 Сифовирусы Lactococcus lactis Пептидогликан
Фаг φc2 Миовирусы Lactococcus lactis Пептидогликан
Фаг φr1t Lactococcus lactis Пептидогликан
Фаг φ6 Цистовирусы Pseudomonas syringae Пептидогликан Р5
Фаг φ13 Цистовирусы Pseudomonas syringae Пептидогликан
Фаг SP6 Podoviridae Salmonella typhimurium Пептидогликан orf35
Фаг P22 Podoviridae Salmonella typhimurium Пептидогликан гп4
ЛПС Эндорхамнозидаза
Фаг φYeO3-12 Podoviridae Yersinia enterocolitica Пептидогликан gp16
Фаг φKMV Podoviridae Синегнойная палочка Пептидогликан гп36
Фаг φKZ Миовирусы Синегнойная палочка Пептидогликан gp181
Фаг Т7 Podoviridae Кишечная палочка Пептидогликан гп16

Гидролитическая активность пептидогликана, связанная с вирионами бактериофагов
Michael Moak, Ian J Molineux
Mol.Microbiol. февраль 2004 г.; 51: 1169-1183

Гидролазы пептидогликана, ассоциированные с вирионами бактериофагов: потенциальные новые энзибиотики
Lorena Rodriguez-Rubio, Beatriz Martinez, David M Donovan, Ana Rodriguez, Pilar Garcia
Crit. Преподобный Микробиолог. Ноябрь 2013; 39: 427-434

Структурная пептидогликангидролаза gp181 бактериофага phiKZ
Ив Бриерс, Константин Мирошников, Олег Чертков, Алексей Некрасов, Вадим Месянжинов, Гвидо Волкерт, Роб Лавин
Biochem.Биофиз. Рез. коммун. 3 октября 2008 г .; 374: 747-751

Деполимеразы полисахаридных бактериофагов и биомедицинские применения
Jianlong Yan, Jiaoxiao Mao, Jianping Xie
BioDrugs 19 декабря 2013 г.;

Бактериальные внеклеточные полисахариды
Катерина Базака, Рассел Дж. Кроуфорд, Евгений Л. Назаренко, Елена П. Иванова
Adv. Exp. Мед. биол. 2011 г.; 715: 213-226

Молекулярное клонирование и функциональная экспрессия эндонеураминидазы Endo NE, кодируемой бактериофагом PK1E
R Gerardy-Schahn, A Bethe, T Brennecke, M Muhlenhoff, M Eckhardt, S Ziesing, F Lottspeich, M Frosch
Mol.Microbiol. май 1995 г.; 16: 441-450

Эволюция бактериофагов, заражающих инкапсулированные бактерии: опыт фагов, специфичных для Escherichia coli K1 Microbiol. июнь 2006 г.; 60: 1123-1135

Фермент, полученный из бактериофага, который деполимеризует капсулу альгиновой кислоты, связанную с изолятами муковисцидоза Pseudomonas aeruginosa
T Glonti, N Chanishvili, PW Taylor
J.Прил. Microbiol. февраль 2010 г.; 108: 695-702

Протеолитический процессинг и олигомеризация эндосиалидаз, полученных из бактериофагов
Martina Muhlenhoff, Katharina Stummeyer, Melanie Grove, Markus Sauerborn, Rita Gerardy-Schahn
J. Biol. хим. 11 апреля 2003 г.; 278: 12634-12644

Идентификация активности по разложению ЭПС в хвостовых шипах нового фага Pseudomonas putida AF
Аннелин Корнелиссен, Питер-Ян Цейссенс, Виктор Н. Крылов, Жан-Поль Нобен, Гвидо Волкерт, Роб Лавин
Вирусология 20 декабря 2012 г.; 434: 251-256

Кристаллическая структура хвостового шипа фага Escherichia coli HK620: модули эндогликозидазы подовирусного хвостового шипа эволюционно связаны
Stefanie Barbirz, Jurgen J Muller, Charlotte Uetrecht, Alvin J Clark, Udo Heinemann, Robert Seckler
Mol.Microbiol. июль 2008 г.; 69: 303-316

Гликаназы бактериофагов Salmonella: эндорамнозидазная активность бактериофагов P27, 9NA и KB1
R Wollin, U Eriksson, A A Lindberg
J. Virol. июнь 1981 г.; 38: 1025-1033

Структура рецептор-связывающего белка бактериофага det7: шип подовируса в хвосте миовируса
Monika Walter, Christian Fiedler, Renate Grassl, Manfred Biebl, Reinhard Rachel, X. Секлер, Стефан Миллер, Марк Дж. ван Раай
Дж.Вирол. март 2008 г.; 82: 2265-2273

Белок хвостового шипа (TSP)/эндорхамнозидаза бактериофага Shigella flexneri Sf6 связан с TSP бактериофага P22 и имеет мотив, общий для экзо- и эндогликаназ, а также эпимераз C-5
JE Chua, PA Manning, R Morona
Microbiology ( Рединг, англ.) июль 1999 г .; 145 (часть 7): 1649-1659

Взаимодействие in vitro между фагом и липополисахаридом рецептора: новая гликозидаза, связанная с фагом Salmonella epsilon15
K Takeda, H Uetake
Virology March 1973; 52: 148-159

Мультивалентный адсорбционный аппарат объясняет широкий спектр хозяев фага phi92: всесторонний геномный и структурный анализ
Дэвид Шварцер, Фальк Ф.